硬盘克隆机

[size=4]编者的话： 您是否因电脑系统崩溃而感到手足无措，或是没有快速解决的办法呢？ 您是否因电脑硬盘损坏而丢失了所有数据而苦恼呢？ 您是否因电脑故障重新安装N张软盘（软驱不好用）而感到繁琐呢？ 您是否因恢复系统找系统盘和程序盘而东奔西走呢？下面是本人解决类似故障的一点心得，供大家参考：关于硬盘克隆在光谱仪分析程序中的应用[/size]1前言面对炼钢生产节奏的加快，品种的增加，时而出现光谱仪微机死机或根本无法启动等故障，并由此造成系统崩溃和数据的丢失，严重威胁着炉前冶炼和产品质量控制。2光谱仪工作原理其分析原理为通过测定样品激发产生的光强值，再通过计算机分析软件中预先建立的光强和元素百分含量的标准曲线的关系，来间接测定元素的含量。3一般处理法利用一般处理法处理光谱仪微机故障时，必须保证数据不丢失，当硬件出现故障时，尤其是当微机硬盘本身出现故障时，数据丢失的可能性较大，修复的难度也将随之加大，因此此类故障只能由计算机公司来修复，即使将硬盘修好，也难以保证所有的数据不丢失，如果是软件故障需要由系统盘来启动并安装系统，如果光谱仪分析程序在WINDOWS环境下运行，直接安装操作系统和分析程序就可以了，但如果分析软件必须运行在DOS环境中，就需要由DOS启动软盘来启动并安装系统，目前软盘和软驱都已淘汰，即使有的微机配有软驱，因长时间污染也无法使用，因此需要单独寻找一个完好无损的软驱完成安装，安装完毕后，接下来安装分析程序，因软盘容量的限制，仪器分析程序存于多张软盘中，必须将多个软盘依次插入软驱完成分析程序的安装，此步完成后，需要对分析软件中需要分析的各元素通道和其他参数进行设置并重新进行仪器的标准化，到此为止，微机就可以正常使用了，但重装系统后先前的历史分析数据都将丢失掉。 另外还有一种系统备份的方法是采用GHOST软件进行的，此法主要是将装有系统的C盘以文件的形式备份到其他磁盘中，当恢复系统时，需要将存入磁盘的GHOST文件找到，然后再进行还原，但此法的缺陷是当硬盘出现故障、备份文件的磁盘有病毒、系统文件损坏时系统将无法修复。4硬盘克隆法硬盘克隆法需准备一块容量大于源盘文件的硬盘和一张GHOST盘，如主机无光驱，需准备光驱。此法不管是WINDOWS系统还是DOS操作系统都可以进行，在任何情况下都可以进行，而且只需几分钟即可完成，根本不耽误仪器的正常使用。具体方法为将目标硬盘设置为从盘，光盘启动微机后，进入GHOST操作界面，进行硬盘备份操作即可完成。5优点硬盘克隆法与一般处理法相比有以下优点：（1） 故障处理时间短当微机出现硬盘故障或系统故障时只需更换硬盘即可，因此只需要花费更换硬盘的时间和系统启动的时间。（2）节约维修费用 微机硬件出现故障后，只需找一台工作正常的旧微机，将硬盘更换掉即可使用，无需维修。（3）为炼钢生产赢得时间 由于故障处理时间短，及时地反馈了检测信息，有力地指导了炉前冶炼，在为炼钢生产争取了宝贵时间。（4）维护方便（5）无数据损坏风险由于在源盘正常工作的情况下进行克隆操作，无数据丢失或损坏的风险。（6）省时省力此法无需花费大量时间寻找系统盘、光谱仪程序盘、软驱，当然也无需系统安装和分析程序安装，也无需进行分析程序的一系列设置和标准化，只需更换硬盘，启动微机正常工作。当然不用担心因保存不当或者存放时间久而带来的多张分析程序软盘数据丢失的问题。七、结论 硬盘克隆法解决了长期以来低版本分析程序带来的维护、安装的难题，突破了计算机专业水平限制的瓶颈，省去了不可估量的维修费用，为炼钢生产赢得了宝贵的时间，确保了产量的完成，避免了不必要的损失，为炼钢经济效益的提高提供了安全保障。

经过抗体测定的阳性孔，可以扩大培养，进行克隆，以得到单个细胞的后代分泌单克隆抗体。克隆的时间一般说来越早越好。因为在这个时期各种杂交瘤细胞同时旺盛生长，互相争夺营养和空间，而产生指定抗体的细胞有被淹没和淘汰的可能。但克隆时间也不宜太早，太早细胞性状不稳定，数量少也易丢失。克隆化的阳性杂交瘤细胞，经过一段时期培养之后，也还会因为细胞突变或特定染色体的丢失，使部分细胞丧失产生抗体的能力，所以需要再次或多次克隆化培养。克隆化次数的多少由分泌能力强弱和抗原的免疫性强弱而决定。一般说，免疫性强的抗原克隆次数可少一些，但至少要3～5次克隆才能稳定。克隆化的方法很多，包括有限稀释法、显微操作法、软琼脂平板法及荧光激活分离法等。一、有限稀释法1．材料① 微量培养盘，盘内各孔于克隆化前一天培养小鼠腹腔细胞（即饲养细胞）每孔2万～4万。② HT培养基2．操作方法① 取出抗体阳性孔细胞，用HT培养液制成细胞悬液。并取样进行台盼兰染色，计数。② 用HT培养液将细胞稀释成200个/ml、40个/ml、20个/ml和的悬液。③ 用吸管将细胞悬液分别种入微量培养盘，每孔0.05ml，细胞含量分别为10个/孔、2个/孔、1个/孔和0.5个/孔。④ 5％CO2饱和湿度，37℃培养。⑤ 每天用倒置显微镜观察克隆生长情况，选择只有一个集落生长的孔，弃掉两个以上和没有细胞生长的孔。⑥ 克隆大量繁殖后，布满孔底的1/3～1/2时，测培养液抗体。⑦ 抗体阳性孔细胞，移到有饲养层的组织培养瓶中，并传2～4代就可以脱离饲养细胞，建成克隆株。二、软琼脂克隆化借助撒在软琼脂上单个细胞定位生长，而达到克隆化，具体操作如下：1．配2.5％的琼脂糖30ml，水浴溶化后，移入45℃水浴中。2．将117ml完全DMEM液和3ml 10倍浓度的DMEM液混合，置45℃水浴预热。3．将琼脂糖与DMEM液混合，即为含0.5％琼脂糖的完全DMEM液，并加75×108 脾细胞。4．每块平皿加10ml，于室温中凝固。5．DMEM中的细胞与DMEM―琼脂1:1混合，将细胞琼脂混合物2ml铺于凝固的平板上，使其全部覆盖。6．放入CO2箱饱和湿度，37℃培养10天。7．用PBS配制0.6％琼脂糖，于沸水浴溶解后，置45℃，在保温情况下取一试管，迅速加入0.1ml 25％羊红血球，0.2ml豚鼠补体，2.7ml 0.6％琼脂糖。8．用3ml琼脂糖―羊红血球混合液覆盖克隆。于37℃CO2箱孵育1h~2h。从克隆上部溶解羊红血球的溶血范围，可筛选抗羊红血球Ig。三、显微镜操作法在直径6cm培养皿中，加入1ml 1.0×108 细胞悬液放置5％CO2饱和湿度，37℃温箱中放置30min以上，倒置显微镜下，寻找那些与周围相距甚远的单个细胞，将毛细管口（一头有直角弯头毛细管，一头连接一尺长乳胶管，用口控制液体进入）水平置放于液面上，左右微动，直到看见管口，对准细胞，吸入毛细管，将管中细胞移到预先加有2.0×104~5.0×104 饲养细胞96孔板内，培养后，即可获得单个细胞形成的克隆。四、荧光激活分离法用一种荧光激活细胞分类器（Fluorescein Activafed Cell Sorter，FACS）。其基本原理是：将细胞经荧光抗体染色后，经喷嘴形成单个细胞的线形液滴，在莱塞光激发下，荧光素发射荧光，此信号由光电倍增管接收，再结合细胞形态大小产生光散射信号，经电脑处理，产生信号并与预定的信号对比，根据细胞荧光强度及细胞大小不同，将细胞分成不同级别，在电场中发生偏离，而分别收集于不同容器中。

近日，新型食品及其加工咨询委员会（ACNFP）在一次公开会议上，评价了由克隆牛及其后代加工成的肉乳制品的安全性，并在《新型食品法规》基础上决定是否批准克隆肉乳制品。 新型食品及其加工咨询委员会（ACNFP）指出： 克隆肉乳制品同普通的肉乳制品在成分上是一致的，因此克隆肉乳制品不可能导致食品安全风险。 有关肉乳制品在成分上的证据较为有限，进一步表明肉乳产品受动物喂养环境的影响证据是必需的。 消费者可能希望由克隆动物及其后代加工成的产品具有明确的标识。 针对以上观点，食品标准局首席科学家安德鲁。维奇（Andrew Wadge）表示，由克隆牛及其后代加工成的肉乳制品同普通的肉乳制品没有本质的区别，因此克隆肉乳产品不可能导致食品安全风险。 食品标准局委员会将在12月的会议继续讨论克隆肉乳制品的安全性，该委员会将认真考虑ACNFP的观点、欧洲委员会对克隆肉乳产品的禁令以及其它的意见，最终将其建议提供给部长。