水质细菌分析

来源：农民日报 时间：2008年2月26日 位于以色列海法的Checklight公司利用地中海沿岸一种夜间会发光的细菌开发出一种对水中污染物极为敏感的物质，将这种物质做成的基底与发光细菌相结合，再配上一个光度计，即可快速便捷地对水质进行实时监测。只要将这种发光细菌放到含有害物质的水中，它们就会发出报警光信号，对这种信号测量分析，即可对污染物性质和污染程度做出判断。　　该公司首席执行官尼瑞特表示，随着污染物和恐怖活动的增多，保证饮用水安全显得格外重要。目前，饮用水质量检测尚缺乏一种便捷有效的实时检测手段，此项技术，正好可以填补这一空白。　　实验显示，用这种方法检测水质，只要15分钟即可获得结果，检测成本一次只需数美元，而且能现场完成，即便是浓度很低的污染物也能及时发现，这样便可为管理部门及时采取措施，避免饮用水污染造成的损害赢得宝贵时间。

.4 水质的细菌学检测 9.4.1 水中细菌总数的检测 9.4.1.1 目的和原理 水中细菌总数往往同水体受有机物污染的程度呈正相关，它是评价水质污染程度的一个重要指标之一。由于重金属及某些其它有毒物质对细菌有杀灭或抑制作用，因此总细菌数少的水样，并不能排除已被这些物质所污染。本试验采用标准平皿法对水样中细菌作计数，这是一种测定水中好氧的和兼性厌氧的异养细菌密度的方法，由于细菌在水体中能以单独个体、成对、链状，成簇或成团的形式存在，此外没有单独的一种培养基或某一环境条件能满足一个水样中所有细菌的生理要求，所以由此法所得的菌落数实际上要低于被测水样中真正存在的活细菌的数目。细期总数是指1毫升水样在营养琼脂培养基中，37℃、24小时培养后所生长的菌落数。一般规定，1毫升自来水中总菌数不得超过 100个。 9.4.1.2 材料和器皿 （1）培养基①营养琼脂培养基②2216E培养基：蛋白胨 5.0克 酵母膏 1.0克 FePO4 0.01克 琼脂 18.0克 陈海水 1000毫升 pH 7.6～7.8 （2）无菌采样瓶、灭菌移液管、灭菌培养皿，盛有90ml及 9mL灭菌蒸馏水的锥形瓶和试管。 9.4.1.3 方法和步骤 （1）采集水样。（2）吸取10 ml水样（河水、污水、游泳池水或港湾水等），注入盛有90ml无菌水或无菌海水的三角瓶中，混匀成10-1稀释液，在吸水样前，水样应彻底搅动均匀。（3）按10倍稀释法将水样稀释成10-2、10-3、10-4。（4）根据水样的洁净程度，污染严重者选取10-2、10-3、10-4稀释度；中等的选取10-1、10-2、10-3稀释度，每个稀释液分别注入两个培养皿，每皿 1ml。稀释度的选择是本试验精确度的关键，选择适宜者，平皿上菌落总数介于30—300个之间。（5）注入彻底融化，然后冷却到45℃的营养琼脂培养基（用于河水样）或2216E培养基（用于海水、港湾水样）约15ml，立即旋摇培养血，充分混匀，水平放置至固化。（6）接种河水的培养皿，倒置于37℃培养24小时。接种海水样，港湾水样的培养皿，应倒置后于18—20℃下培养到长出明显菌落（5天左右）止。 9.4.1.4 结果与分析 取同一稀释度的平板培养物，依菌落计算原则进行计算。（1）菌落计算原则平皿菌落的计算，可用肉眼观察，必要时用放大镜检查，防止遗漏，也可借助于菌落计数器计数。对长得相当接近，但不相触的菌落，应予以—一计数。对链状菌落，应当作为一个菌落来计算。平皿中若有较大片状菌落时则不宜采用，若片状菌落少于平皿的一半时，而另一半中菌落分布又均匀，则可将其菌落数的2倍作为全皿的数目。算出同一稀释度的平均菌数，供下一步计算时用。（2）计算方法①首先选择平均菌落数在30～300者进行计算。当只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时，即可用它作为平均值乘其稀释倍数（见表5－9的例1）。②若有两个稀释度的平均菌落数都在30—300之间，则应按两者的比值来决定。若其比例小于2，应报告两者的平均数；若大于2，则报告其中较小的数字（见表7-例2和例3）。③如果所有稀释度的平均菌落数均大于300，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表5－9例4）④若所有稀释度的平均菌落数均小于30，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表5－9例5）。⑤如果全部稀释度的平均菌落数均不在30—300之间，则以最接近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表5－9例6）。③菌落计数的报告，菌落在100以内时，按实有数报告；大于100时，采用二位有效数字，在二位有效数字后面的数值，以四舍五入方法计算，为了缩短数字后面的零数也可用10的指数来表示（见表5－9的“报告方式”栏）。 表5－9 稀释度选择及菌落报告方式 例次 不同稀释度的平均菌落数两个稀释度菌落数之比 菌落总数（个／ml）报告方式（个／ml） 10 -1 10 -2 10-3 1136016420-1640016000或1.6×104 22760295 461.63775038000或3.8×104 3289027160 2.22710027000或7×104 4无法计数4651513-513000510000或5.1×105 527 11 5 -270 270或2.7×102 6无法计数305 12- 30500 31000或3.1×104