军团菌检测

2012年初，香港新港府总部多处发现退伍军人杆菌，证实是会议厅的厨房和立法会综合大楼3楼茶水间的两个样本，检出嗜肺军团菌。港府大楼求诊的8名员工，基本都是24岁至42岁青壮年，检测结果显示，无须入院，或可能是流感样型。换季时节，是军团菌高发的季节，由嗜肺军团菌引发的军团菌肺炎在非典型肺炎中是病情严重的一种，未经有效治疗的病死率高达20%。　　嗜肺军团菌是一种有鞭毛，革兰氏阴性，军团菌属多形态性的短小球杆菌。嗜肺军团菌不抗酸，无孢子，无荚膜，类似于杆菌。不能分解明胶、糖类或尿素，不可参加酵解反应。嗜肺军团菌无色，也非自身荧光。氧化酶与过氧化氢酶测试呈阳性，为β-内酰胺酶阳性。专性需氧，在自然界可长期存活，如在蒸馏水中可存活100d以上，污水中可存活一年，对热和一般消毒剂敏感。菌落特征为灰白色，有光泽，湿润，圆形，凸起，并有特殊臭味。革兰氏染色不明显，多用镀银法或Giemsa法染色。嗜肺军团菌　　卫生部于2006年颁布了《公共场所集空调通风系统卫生管理办法》、《公共场所集中空调通风系统卫生规范》，规定对集中空调系统冷却水和冷凝水作出了嗜肺军团菌“不得检出”的规定。　　流行病学研究阐明，冷凝塔、加湿器及风管等是病原体的来源，空气及气溶胶是病原体的传播媒介。夏季和秋季是军团菌最适宜生长的季节，也是发病率最高的季节。　　军团菌的检测军团菌因为个体小，生长缓慢，难检出，并具有传染性，对检测实验室和实验人员的操作有相当高的要求。近日，我要测工作人员联系了广州工业微生物检测中心，了解了嗜肺军团菌的检测方法及检测过程：　　嗜肺军团菌的检测　　国内外的军团菌检测方法主要依据 ISO11731-1:1998 ISO 11731-2：2004(E)、《军团菌的检测和计数》及《公共场所集空调通风系统卫生管理办法》。定性测试两种方法的检测步骤大致相同，基本包括以下步骤：　　1. 采样及运送　　采样容器可为无菌玻璃瓶,聚乙烯瓶或无菌采样袋，并且瓶口或袋口能密封；采样量一般在300-400ml 左右，如果经过氯或臭氧消毒的水，采样后加入少量硫代硫酸钠溶液，以中和样品中的氧化物；采样至送达实验室最长时间不得超过2天。嗜肺军团菌取样　　2. 样品处理　　对含少量军团菌的样品一般用薄膜过滤法来浓缩样品的浓度，如有杂质的样品可静置沉淀或离心过滤去除，并对样品进行热处理和酸处理以减少非军团菌的生长。嗜肺军团菌样品前处理　　3. 接种和培养　　军团杆菌在分类学上是一种独特的需氧革兰氏阴性杆菌，无荚膜，在普通培养基上不生长，属于细胞内寄生菌。目前标准培养基为活性碳酵母浸膏琼脂平板，也称军团菌生长平板(BCYE)。接种在 BCYE 平板上的样品在温度为35-37º C，培养10天，在浓度为2.5% CO2 的环境下培养更有利于军团菌的生长。军团菌的菌落通常呈白色、灰色、有荧光。接种和培养　　4. 军团菌的鉴定　　挑取至少3个疑似军团菌的菌落接种至军团菌生长 BCYE 平板和半光氨酸缺失的 BCYE-Cys 平板，在35-37º C条件下培养至少5天，凡是在 BCYE 平板上生长而在平板和半光氨酸缺失 BCYE-Cys 平板上不生长，并且血清学阳性的的则判为军团菌。嗜肺军团菌检测嗜肺军团菌检出　　嗜肺军团菌的预防　　第一，，对军团菌主要滋生地 -- 中央空调系统、冷热水循环系统、冷凝脱水盘、空气加湿器等进行定期清洁处理。定期更换冷却水和冷冻水，避免贮存水长期滞留，保证空调系统注入水的洁净，必要时采取杀菌杀藻等消毒措施；定期清洗空调冷却塔及管道，对大型建筑物的中央空调系统要定期使用消毒抑菌剂清洁。　　第二，使用空调(包括冬天使用暖空调)的房间应经常开窗通风，经常保持室内环境的卫生和空气流通，有条件的话对室内空气进行净化和杀菌处理。　　第三，使用空调期间，一旦出现发烧、咳嗽、胸痛、呼吸不畅，不应只考虑“感冒”，应及时就诊检查，警惕军团菌病。只要早期发现及时治疗，效果较好。　　关于广州工业微生物检测中心　　广州工业微生物检测中心通过了CNAS实验室认可及广东省CMA计量认证，已为多家星级酒店、商业广场及企业的生活用水、冷却塔、泳池水等水源提供了检测及咨询服务，出具的军团菌检测报告得到国家卫生监督部门的承认。

p　　当在空调制冷装置被军团菌感染时，人体可能会患上严重甚至致命的军团病。因此，定期检查水中的细菌是非常重要的。慕尼黑工业大学最新研发的芯片承诺将比以往更快检测出军团菌。检查军团菌的典型方法包括将水样放入培养皿中，然后等待10至14天，观察是否有细菌培养物生长。/pp style="text-align: center "img src="http://img1.17img.cn/17img/images/201803/insimg/2f990a73-392e-4f8c-89e9-60679b3e89e0.jpg" title="NewsDataAction.png"//pp　　不幸的是，军团菌数量可在短短一周内达到爆发水平。此外，如果爆发已经发生，则需要尽快确定其来源。因此慕尼黑工业大学研究人员创建了全新的LegioTyper芯片。/pp　　慕尼黑工业大学开发的便宜一次性设备包含20种不同抗体的微阵列。其中每一种都与不同的嗜肺性军团病杆菌亚型结合。如果有任何这些亚型出现在水样中，芯片将在34分钟内检测到它们的存在。/pp　　该研究论文最近发表在《生物传感器和生物电子学》杂志上。/p

配备有中央空调的大型室内公共场所，往往有着空气传播类病菌滋生的隐忧，尤其是北京、南京等地先后从中央空调中检出嗜肺军团菌。对于市民的担忧，温州检验检疫部门近日首次对温州机场候机厅的中央空调系统，进行嗜肺军团菌专项检测，检测结果符合卫生部的要求。　　据悉，军团菌是一种水源性致病菌，对人体的侵害主要表现为军团菌肺炎，是非典型性肺炎群的一种，因在1976年美国费城一次退伍军人会议期间暴发而得名。患者以呼吸道感染为主，表现为高烧、寒战、咳嗽、胸痛、呼吸困难及腹泻等，严重者有肺炎症状，并伴有多种器官的损害，死亡率较高，夏末秋初为高发季节。　　检验检疫人员表示，军团菌主要通过空气传播，尤其容易发生在配备有密闭式中央空调的室内环境里。温州检验检疫部门制定监测计划，确定从今年开始将中央空调系统军团菌监测纳入口岸公共场所环境因素卫生监测项目，每年夏秋两季定期开展监测工作，为出入境人员创造安全舒适的通关和候机环境。