细胞计数对生物制品研发过程起到至关重要的作用，在往期文章《细胞计数的颠覆式演变 | 从手动计数到智能计数》中介绍了近年来细胞计数方法的革新，主要趋于自动化，智能化，然而，如果一款细胞计数仪对操作人员的专业技能水平要求较高或者操作较为复杂，也会降低细胞计数效率。而操作简单，免专业培训的细胞计数仪则适用于广泛的用户群体，可显著提高生产效率。友好的操作界面，轻松上手CytScop®Pro智能细胞计数仪配备了直观的界面，各项功能一目了然，配有图标和清晰的文字提示，确保用户能够快速找到所需操作。实时结果显示在屏幕上，便于随时查看和记录，极大地降低了操作难度，使得即使没有专业培训的人员也能迅速上手操作。微流控芯片，实现自动染色和混匀浚真生命科学自主研发的包埋TB染料及AOPI染料的微流控芯片可自动完成样品的染色及混匀，无需实验人员进行繁琐的样品前处理。一键启动，自动完成多个样本计数CytScop®Pro智能细胞计数仪具备一键启动功能，实验人员只需要将细胞样本放入样本托盘（24孔位，支持循环加样），仪器自动完成计数，整个过程无需复杂的设置或手动操作，同时可确保高效、准确地获取分析结果。专利技术加持，计数结果可靠对任何一款细胞计数仪而言，计数结果准确是其核心竞争力。CytScop®Pro智能细胞计数仪配备独特的明场和荧光宽场大视野光学系统，结合专利的微流控技术，搭载高精准的细胞识别算法，使得细胞计数结果更加准确可靠。申请Demo为让更多人能够体验CytScop®的易操作性、计数准确性和重复性等优势，浚真生命已开通CytScop®细胞计数仪Demo线上申请通道， 有多款型号配置可供大家选择，如您有需要，可以扫描以下二维码填写申请单，快来申请吧！往期经典回顾浚真专利光学技术赋能高精准细胞计数AI模型震撼升级（三）| 训练超级引擎CNNAI模型震撼升级（二）| 揭秘超凡智慧CNNAI模型震撼升级（一）|开启智能细胞分析新纪元1分钟了解用于细胞计数的微流控芯片专利号：ZL 202011583924.0;ZL 2020 11582981.7；ZL 202111262251.3

细胞计数仪选购关键因素准确性准确性高的细胞计数仪才能为生物制品研究提供可靠的数据支持。通常评价细胞计数仪的准确性时，在专业的评测实验设计中，对计数结果的比例指数（PI）及线性相关性（R2）分析来评价仪器的准确性，其中PI值越小，仪器准确度越高；R2接近于1，也可以用来反映整体测量方法的准确性。重复性和稳定性重复性体现在使用同一台仪器、同一样本、由同一操作员或不同操作员在不同时间进行多次计数时，所得结果的一致性。通常可以用变异系数（CV）值评价仪器的重复性，CV值越小，说明仪器的重复性越好，精确度越高。另外，稳定性良好的仪器性能才能够保证在长时间内获取的细胞计数数据的一致性，这对于长期跟踪细胞生长、评估药物效果等实验尤为重要。操作简单性在生物制药公司，选择一款简单易操作的细胞计数仪，让操作人员能够迅速上手，减少培训成本，节省宝贵的时间，让科研与生产团队能够更专注于产品质量优化与新药研发，同时降低了人为操作错误的风险，从而推动企业在激烈的市场竞争中保持领先地位。细胞计数仪性能评价案例在往期的应用分享中，在评价仪器性能的同时，也为大家提供了评价细胞计数仪专业的评估方法。《CytScop®Pro智能细胞计数仪计数之准确性和精确性 》《多台CytScop®Pro智能细胞计数仪之间的性能评价 》《CytScop®Pro智能细胞计数仪的混匀效果评价》 《CytScop®Mini 智能细胞计数仪的性能评价 》产品推荐CytScop®智能细胞计数仪用TB台盼蓝和AOPI双荧光染色法原理，采用独特的明场和荧光宽场大视野显微光学系统，结合自主创新的微流控芯片技术，搭载高精准细胞识别算法，实现快速稳定有效的细胞计数、细胞活率、细胞浓度和生长曲线的测定。CytScop®智能细胞计数仪的主要特点宽场大视野光学系统拥有宽场大视野，双荧光+明场复合集成系统，高对比度设计，结合高分辨率物镜及自动对焦技术 ，在捕获更多细胞样本的同时，保持高清晰度，能够更好的呈现细胞形态细节，显著提升计数的准确性。微流控芯片微米级的系统结构中包括了纳米试剂包埋区、反应混合区、细胞均匀分布的检测区等功能单元，通过专利技术实现了对细胞样本进行自动试剂染色、充分混合与均匀分布的精准操控，提高了检测的精确性与准确性。 不再需要人为进行繁琐的样品前处理工作，同时避免了杂质干扰对计数结果的影响。 AI算法基于卷积神经网络CNN的模型架构的深度学习方法，通过海量真实工艺数据训练与反复测试验证，不再需要人为设置直径、亮度、圆度、系数等参数阈值，科学地识别细胞凋亡/团簇团聚等复杂细胞样本情况。 CytScop® 智能细胞计数仪，仪器操作简单，系统软件界面非常友好，用户无需花费大量的时间培训成本即可轻松使用，同时仪器的后续维护保养非常方便。申请Demo为让更多人能够体验CytScop®的易操作性、计数准确性和重复性等优势，浚真生命已开通CytScop®细胞计数仪Demo线上申请通道， 有多款型号配置可供大家选择，如您有需要，可以扫描以下二维码填写申请单，快来申请吧！

众所周知，高通量的细胞计数仪在测试的过程中，待测样本会有不同程度的沉降，如果样本在上样前未被充分混匀，测量结果的准确度和精确度将无法保证。CytScop®Pro设有上样前自动混匀装置，可以保证待测样本在上样前充分混匀。为了确定CytScop®Pro智能细胞计数仪在上样前混匀是否对样本造成影响，我们使用CHO细胞样本，在0-2h的静置时间下，使用CytScop®Pro进行测试，分析仪器的混匀效果以及对样本的影响。图1 CytScop®Pro智能细胞计数仪一、 测试样本及仪器设置参数细胞样本CHO细胞，浓度7.5×106 cells /mL，活率90%左右测试模式TB染色细胞样本仪器测试参数二、实验方案设计及取样将准备好的样品一次性取出，共计60个样本。从取完最后一个样品开始计时，对样品分别静置0h、0.5h、1h、1.5h、2h，随机抽取4台CytScop®Pro进行上机检测，每台仪器每组静置时间从取出的样品中随机抽取3个平行样本进行上机，保证取样的随机性，减小取样误差。对于静置0h的样本在上机前手动吹匀。三、计数结果分析随机取样，可以有效减小取样误差，从而对整个测量过程减少非系统性误差。变异系数（C.V）是用来衡量各观测值变异程度的一个统计量，在仪器的测量中可以用来反映仪器测量的精确性。如下图2和图3所示，是4台CytScop®Pro测量总细胞浓度（TCD）和活细胞浓度（VCD）的C.V值。图2 在不同静置时间下测量样品TCD的C.V值图3 在不同静置时间下测量样品VCD的C.V值对4台仪器在不同静置时间下测量TCD和VCD进行统计分析，如图4和图5所示。图4 在不同静置时间下4台仪器测量TCD图5 在不同静置时间下4台仪器测量VCD对4台仪器在不同静置时间下，测量样品直径（Dia）和活率（Via）的变化，如图6和图7所示。统计测量TCD、VCD和Via在0h-2h的变化，差异统计图表1所示。图6 在不同静置时间下4台仪器测量Dia图7 在不同静置时间下4台仪器测量Via的变化表1 样品静置0h和2h测量结果差异四、结论随机抽取的4台CytScop®Pro仪器，通过对静置0h-2h的样品上机测量，对TCD和VCD通过C.V分析（如图2和图3），4台仪器均表现出来非常好的测量重复性，C.V均在3%以内，说明仪器精确度较高，系统误差小。相对于同一台仪器而言，对于静置0h-2h的样本进行测量，发现TCD和VCD的测量结果均没有显著性差异（p>0.05），与静置0h相比，静置2h后，测量浓度变化小于3%（如表1所示）。不同的仪器（如图4和图5所示），对相同静置时间下样本浓度的测量没有显著性差异，说明仪器间差异很小。对测量直径进行统计分析，如图6所示，可以看到对于同一台机器来说，在不同的静置时间下，样本直径变化非常小，不超过3%，没有显著性差异（p>0.05）；而对在相同静置时间下的样本，不同仪器的测试结果也没有显著性差异。对4台仪器在各静置时间下Via测试结果对比分析（如图7所示），可以看到随着样品静置时间的加长，Via出现轻微降低的趋势。与静置0h相比，静置2h后，Via平均下降4.5%左右。活率下降与常温放置时间有关，放置时间越长，活率下降越大；另外，样本初始活率较低（90%左右），细胞状态比较一般，所以样品活率在同一台仪器中的测量下降比较显著。综上，CytScop®Pro智能细胞计数仪对于静置0h-2h的样本测量具有较好的混匀效果，测量的细胞浓度在时间梯度上没有显著性差异，且对细胞本身的活率影响较小，体现了CytScop®Pro对高通量样本测量具有良好的稳定性。Demo申请为让更多人能够体验CytScop®，浚真生命科学已开通CytScop®智能细胞计数仪Demo线上申请通道，有多款型号配置可供大家选择，如您有需要，可以扫描以下二维码填写申请单，快来申请吧！—扫码申请Demo —

图像识别的细胞计数方法，是基于光学显微成像的分析系统，具有直接测量、完整计数、结果直观、重复性高等优势。测量方式的精密度与准确度取决于细胞图像的质量和采样量，即光学显微系统不仅需要满足分辨率与对比度的最佳成像质量；同时还需要追求尽可能大的观察视场，通过大采样量来减小分析系统的统计误差。显微成像系统--Microscopy根据阿贝光学原理，照明光线对检测样品作用产生衍射光，然后通过物镜收集各种衍射光，最终衍射光与透射光在像平面上发生干涉，得到样品的显微图像。系统中最为关键的是显微物镜，直接决定了成像质量。数值孔径NA数值孔径定义为物镜可以收集光线的空间角度，数值孔径决定了物镜的分辨能力。分辨率Resolution分辨率定义为标本上两点之间的最短距离，观察者或探测器仍可将其区分为单独的实体。分辨率衡量成像系统再现物体细节的能力，同时受制于所使用的照明类型、探测器像素大小或光学元件功能等因素影响。样品细节越小，所需的分辨率越高。值得注意的是，放大倍数的增加并不代表可以有更好的细节呈现，需要有更高的分辨率。放大倍数：为了在荧光成像中获得良好结果，理解放大倍数和分辨率的区别很重要。当提到放大倍数，指的是当我们在显微镜下观察一个对象时，它比原本放大了多少。分辨率：与此相反，实际意义上的分辨率指的是图片中我们能够分辨多少细节，这可能是主观的。分辨率受到光的衍射极限的限制。对比度 Contrast光学显微系统可以采用高数值孔径的物镜来产生高分辨率的图像的，而缺乏足够对比度的高分辨率对图像解析毫无价值。对比度定义为在图像和相对于整个背景强度相邻背景之间的光强度之差；在强度和/或颜色的差别创建图像的对比度，使得样本特征和细节变得可见。 其中是背景的强度，是样品的强度。视场（FOV）视场代表着光学显微系统能够观察到物体的范围。视场的大小是由物镜的放大倍率来决定的。相同的物镜放大倍率下，光学系统的探测器(相机靶面)面积越大，视场越大。细胞计数--Cell Counting细胞的特性透明物体和周围介质折射率相差微弱，光线通过比较透明的标本时，光的波长（颜色）和振幅（亮度）都没有明显的变化。因此，用普通的光学显微系统观察活细胞（未经染色）的时，其形态和内部结构往往难以分辨。用化学染料染色以提高细胞成像的对比度和细胞内结构之间进行区分。染料选择性地从一个或几个波长吸收光并且通过或反射所有其它波长。活细胞的立体球状结构，与细胞死亡后塌缩的扁平结构，使得活/死细胞在成像对焦时，不在同一焦平面上。明场染色：化学染料通过与细胞器/细胞质相结合；或是细胞脂膜的通透性选择，来产生颜色（波长）的对比，从而使得细胞形态与状态得以解析。暗场荧光：荧光显微镜借助荧光染料标记，在强烈的黑暗背景对衬下，即使荧光很微弱也很容易辨识，敏感性高可准确而详细地识别细胞和亚微观细胞成分和活动。当背景是非常深的灰度值即 I（b）=0.01（红线），即细胞在暗场荧光染色下，图像强度的微小变化会产生对比度的较大变化。通过将背景变为稍浅的灰度值I（b）=0.10（绿线），即细胞在明场台盼蓝染色下，图像强度的微小变化提供了有用的对比度范围。在更亮的背景强度即I（b）≥0.50（蓝线），即细胞在明场非染色下，图像对比度对背景强度相对不敏感，图像强度的较大变化仅产生对比度的小幅增加或减少。CytScop的专利光学技术浚真生命科学CytScop智能细胞计数仪，配备了明场和荧光大视野显微光学系统，大FOV意味着大采样面积，可实现大采样量，减少仪器的系统误差。细胞各部分的折射率和厚度的不同，光线通过细胞时，透射光和衍射光的光程就会有差别。CytScop的光学专利技术利用细胞与其周围水介质之间的微小折射率差异来增强细胞与其类似的透明溶液中产生高效的对比度。这种技术方法在明场模式下，能够突出细胞的外观形态和局部特征均能产生明显的差异，具有非常好的立体感和极佳的细节表现能力。系统在暗场荧光下，系统能够收集更多的荧光信号，从而增强不同波长的荧光特异性。CytScop智能细胞计数仪可应用于抗体，细胞治疗等生物制药产品从研发至商业化生产的各个环节，保证全生命周期数据的完整性与可追溯性的基础上，实现高精密度，稳定性，一致性的测试结果。

‍‍CytScop®Mini 智能细胞计数仪采用AOPI双荧光和台盼蓝染色法原理，采用独特的明场和荧光宽场大视野显微光学系统，结合专利的微流控芯片技术，搭载高精准细胞识别算法，实现有效稳定的细胞计数、细胞活率、细胞浓度和生长曲线的测定。小型化机身助力随时随地进行智能细胞计数，软件系统可升级，实现实验数据通过蓝牙或直传云服务器，更具时间、空间灵活性。在实际应用中，细胞计数结果的准确性和精确性对于开展后续工作具有非常重要的作用。所以对于细胞计数仪器，除去人为操作误差和样本误差外，如何保证仪器的系统误差符合标准规定的要求将非常重要。为了检测CytScop®Mini的细胞计数性能，采用了ISO描述的实验操作方法（ISO 6887-1:2017）：通过一系列倍比稀释来评估CytScop®Mini的细胞计数性能。一、 测试样本及仪器设置参数细胞样本CHO细胞，母液浓度10.5×106 cells /mL，活率98%；仪器测试参数 TB模式参数AOPI模式参数二、稀释及取样按照ISO6887-1:2017提供的倍比稀释指南，对样本母液进行连续稀释，得到6个稀释梯度：1，0.5，0.25，0.125，0.0625，0.03125，每个浓度梯度取3个平行，上机测试。三、计数结果分析变异系数（C.V）是衡量各观测值变异程度的一个统计量，常常用来反映一组数据的离散程度，在仪器的测量中可以用来反映仪器测量的精确性。C.V值越小，说明仪器测试数据离散程度越小，仪器的重复性越好，精确度越高。如图1所示，CytScop®Mini分别使用TB模式和AOPI模式测量总细胞浓度（TCD）的C.V变化。图1 CytScop®Mini测量TCD的C.V变化图对CytScop®Mini测试结果进行线性拟合分析，结果如图2所示：图2 CytScop®Mini测量总细胞浓度的线性相关关系及回归分析图通过对各稀释浓度下活率进行统计分析，可以评估仪器在细胞计数过程中对样本活率的影响。统计各稀释浓度下样本的活率，结果如图3所示：图3 CytScop®Mini测量各稀释浓度下活率变化图四、结论使用CytScop®Mini分别在明场和荧光场下进行细胞计数， CytScop®Mini进行细胞计数性能分析。通过设计倍比稀释实验可以看到，在0.2M-10M的浓度范围内，CytScop®Mini对平行样本的检测具有很好的重复性和稳定性，且TB染色和AOPI染色具有高度统一性。在各稀释浓度中，各稀释浓度的C.V均值小于3%。另外，通过线性实验的PI计算，在TB染色和AOPI染色中，其PI分别为0.345和0.361，说明CytScop®Mini进行细胞计数具有很好的精确性。通过线性回归分析，可以看到，不论是TB染色还是AOPI染色，在倍比稀释实验中均具有很好的线性相关关系（R2＞0.999），更说明在所稀释范围内计数结果的一致性；同时细胞样品具有更小的PI，说明CytScop®Mini对细胞样品的计数更符合比例原则，对细胞样品的测试具有很好的适应性。对细胞样品各稀释浓度的活率进行分析，发现在0.2M-10M的浓度范围内，在不同的稀释浓度下，活率变化不超过3%，单因素方差分析P＜0.05，活率无显著性差异。综上，CytScop®Mini智能细胞分析仪在0.2M-10M的范围内，仪器对细胞计数具有很高的准确性和精确性，体现了CytScop®Mini精准的细胞计数性能。Demo申请为让更多人能够体验CytScop®，浚真生命科学已开通CytScop®智能细胞计数仪Demo线上申请通道，有多款型号配置可供大家选择，如您有需要，可以扫描以下二维码填写申请单，快来申请吧！—扫码申请Demo —‍‍

近年来细胞计数仪正逐步成为科研实验室和生物制品企业中不可或缺的工具。为了促进与生物实验室科研交流，浚真生命科学特别推出CytScop®智能细胞计数仪免费试用活动，诚邀广大科研工作者及生物领域专业人士共同体验这一科技成果魅力，携手开启高效精准细胞计数的新纪元。共享科技魅力宽场光学系统--细胞识别精准拥有满足分辨率与对比度的最佳成像质量，能够更好的呈现细胞形态细节，同时还具备足够大的观察视场，通过大采样量来减小分析系统的统计误差。微流控芯片--自动染色混匀微米级的结构中包括了纳米试剂包埋区、反应混匀区及细胞均匀分布的检测区，通过专利技术实现了细胞样本自动染色、混匀及均匀分布，有效避免了人为操作可能产生的误差，提高了检测的精确性与重复性。AI算法--测量结果准确基于卷积神经网络CNN的模型架构的深度学习方法，通过海量真实工艺的数据训练与反复测试验证，不再需要人为设置直径、亮度、圆度、系数等各种参数阈值，科学地识别细胞凋亡/团簇团聚等复杂情况。申请试用流程— 扫码申请 —1、提交申请：扫描二维码，填写免费试用申请表，提交您的基本信息及试用需求；2、审核确认：我们将对您的申请进行审核，确认试用信息后安排寄送（含设备及20片微流控芯片）；3、产品试用：在试用期间，您可以充分体验细胞计数仪的各项功能；4、反馈收集：试用结束后，用户分享试用报告/使用体验及建议；*此次活动的最终解释权归浚真生命科学所有