兔骨髓间充质干细胞

原代培养原理和应用：

一、细胞原代培养是通过特殊分离方法从胚胎、组织器官以及外周血中分离获得单细胞，置于合适的培养基中培养，在无菌、适当温度和一定条件下，使细胞生存、生长和繁殖的过程。原代培养的“代”并非细胞的代数，是指细胞培养的次数，从体内取出组织接种培养到第一次传代的阶段，都属原代培养，一般持续1-4周。常见的原代培养过程如图1所示。

二、原代培养细胞直接来源于活体组织，体外培养也尽量模拟体内环境，使得分离得到的细胞接近生物体内的生活状态，可作为研究生物体细胞的生产、代谢、繁殖、凋亡提供有力手段，亦可用于各种药理作用、药物开发研究和临床实践。

三、原代细胞的质量取决于多个因素：取材、培养条件的优化、无菌操作，特别是组织分离技术等。对于大多数研究者而言，想要获得高质量的原代培养细胞仍然比较困难。尽管原代培养技术已较普遍，但是有时仍会得到一些难以解释的结果。拥有行政许可的洁净级实验动物中心，已构建细胞培养和实验平台，可分离培养数百种人、大小鼠和大型动物的原代细胞，并在此基础上提供相关细胞实验服务，包括细胞培养、细胞转染以及细胞药物刺激后各种增殖、侵染和凋亡实验。

兔骨髓间充质干细胞

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态最佳

消化液 0.25%胰蛋白酶

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介：

公司实验室分离的兔骨髓间充质干细胞采用冲洗骨髓、密度梯度离心、差速贴壁法结合培养基筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的兔骨髓间充质干细胞经CD90免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

细胞简介：

兔骨髓间充质干细胞（BMSC）分离自骨髓；骨髓是机体的造血组织，位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种：红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用，白细胞能杀灭与抑制各种病原体，包括细菌、病毒等；某些淋巴细胞能制造抗体。因此，骨髓不但是造血器官，它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨质间的网眼中，是一种海绵状的组织，能产生血细胞的骨髓略呈红色，称为红骨髓。出生时，红骨髓充满全身骨髓腔，随着年龄增大，脂肪细胞增多，相当部分红骨髓被黄骨髓取代，最后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。骨髓基质系统内存在的骨髓间充质干细胞是一种除造血干细胞以外的、具有高度自我更新能力和多向分化潜能的干细胞，可以向骨、软骨、肌组织、皮肤、脂肪、神经等多种组织分化，因此可以作为组织工程中的种子细胞。在骨髓中，BMSC占骨髓有核细胞总数的0.001%-0.1%，含量极低。骨髓间充质干细胞的体外培养条件要求较高，在培养过程中，受贴壁时间、种植密度、血清含量、培养温度和培养基pH值等条件的影响。

贴壁细胞传代操作步骤：

用移液管或者巴氏吸管吸取培养液；

使用不含钙镁离子的平衡盐溶液（PBS）冲洗细胞1-2次；

弃PBS，加入胰蛋白酶-EDTA消化液（消化液浓度根据各细胞不同有调整），轻轻摇晃培养瓶，使胰酶与细胞表面充分接触，37 ℃孵育2-3 min，加入含血清完全培养基终止消化。

将细胞悬液移入离心管中，800 rpm-1000rpm离心5min，弃上清，加入预热的完全培养基重悬细胞，轻轻吸打混匀，吹打过程中尽量不要出现气泡。

细胞计数，根据细胞量选择合适的传代比例，最后转移置37 ℃细胞培养箱中进行培养。

 悬浮细胞传代操作步骤：

悬浮细胞由于本身在生长培养基中悬浮，无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离，整个过程较为迅速，对细胞损伤较小。悬浮细胞传代，通常有两种方法，直接传代法和离心传代法。

（1）直接传代法

①　悬浮细胞长满至80%-90%左右（细胞悬液变黄，最大细胞密度随细胞系不同而有所差异），即可传代；

②　用吸管吸弃细胞悬液1/2～2/3；

③　加入适量的新鲜培养基，继续培养。

（2）离心传代法

①　将细胞悬液转移到离心管内；

②　800 rpm-1000rpm离心5min，弃上清；

③　使用新鲜的培养基重悬细胞；

④　吸管吸取适量细胞悬液，装入新的培养瓶，再加入适量的新鲜培养基，继续培养。

公司正在出售的产品：

H-Gly-Ile-OH  19461-38-2  C8H16N2O3

H-Gly-Leu-Gly-OH  2576-67-2  C10H19N3O4

H-Gly-Leu-OH  869-19-2  C8H16N2O3

H-Gly-Leu-Phe-OH  103213-38-3  C17H25N3O4

H-Gly-Leu-Tyr-OH  4306-24-5  C17H25N3O5

H-Gly-His-Arg-Pro-OH  67869-60-7  C19H31N9O5

H-Gly-His-Gly-OH  7758-33-0  C10H15N5O4

H-Gly-His-OH . HCl  3486-76-8  C8H12N4O3 · HCl

H-Gly-His-OH  2489-13-6  C8H12N4O3

H-Gly-Hyp-OH  24587-32-4  C7H12N2O4

H-Gly-Gly-Trp-OH  20762-32-7  C15H18N4O4

H-Gly-Gly-Tyr-OH  17343-07-6  C13H17N3O5

H-Gly-Gly-β-Ala-OH  42538-53-4  C7H13N3O4

H-Gly-Gly-βNA . HBr  3313-48-2  C14H15N3O2 · HBr

H-Gly-His-Arg-Pro-NH₂  209623-54-1  C19H32N10O4

小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP4)ELISA试剂盒 ，英文名： IGFBP4 ELISA Kit

兔子S100B蛋白(S-100B)ELISA检测试剂盒rabbitSolubleprotein-100B,S-100BELISAKit 96T/48T

犬肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ)免疫试剂盒 Canine heparin cofactor Ⅱ,HCⅡELISA Kit

英文名称HumanICAM-2/sCD102ELISAKit人细胞间粘附分子-2(ICAM-2/sCD102)规格：96T/48T

大量蛋白样品液相法去内毒素试剂盒5次

RatIerleukin4,IL-4ELISA试剂盒大鼠白介素4(IL-4)ELISA试剂盒规格：96T/48T

兔骨髓间充质干细胞小鼠α1-抗胰蛋白酶(α1AT)ELISA试剂盒 ，英文名： α1AT ELISA Kit

人胆固醇酯转移蛋白(CETP)ELISA检测试剂盒Humancholesterolesteransferprotein,CETPELISAKit 96T/48T

大鼠基质金属蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)免疫试剂盒 Rat tissue inhibitors of metalloproteinase 2,TIMP-2 ELISA Kit

英文名称RatCD163ELISAKit大鼠CD163规格：96T/48T

空肠弯曲菌(Campylobacterjejuni)鉴定16SrDNAPCR扩增检测试剂盒20次

ELISAKitSyk人脾脏酪氨酸激酶规格：48T/96T

鸭子胱天蛋白酶8(Casp-8)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Human ai brain tissue aibody (ABAb) ELISA Kit 人抗脑组织抗体(ABAb)ELISA试剂盒

HumanmajorhistocompatibilitycomplexⅢ,MHCⅢ/HLA-ⅢELISAKit 人主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforAD(Humanamiodarone)ELISAKit人呋同规格：48T/96T

血液总乳酸比色法定量检测试剂盒20次

Mouseprostatespecificaigen,PSAELISAKit小鼠前列腺特异性抗原(PSA)ELISA试剂盒规格：96T/48T