人牙龈成纤维细胞

人牙龈成纤维细胞

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次；

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传3-5代左右

消化液 0.25%胰蛋白酶

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介：

公司实验室分离的人牙龈成纤维细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合酶消化后差速贴壁制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的人牙龈成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

细胞简介：

人牙龈成纤维细胞分离自牙龈组织；牙龈指紧贴于牙颈周围及邻近的牙槽骨上淡红色的结构，由复层扁平上皮及固有层组成。是口腔黏膜的一部分，血管丰富，呈淡红色，坚韧而有弹性，因缺乏黏膜下层，直接与骨膜紧密相连，故牙龈不能移动。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的表皮成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。

原代培养原理和应用：

一、细胞原代培养是通过特殊分离方法从胚胎、组织器官以及外周血中分离获得单细胞，置于合适的培养基中培养，在无菌、适当温度和一定条件下，使细胞生存、生长和繁殖的过程。原代培养的“代”并非细胞的代数，是指细胞培养的次数，从体内取出组织接种培养到第一次传代的阶段，都属原代培养，一般持续1-4周。常见的原代培养过程如图1所示。

二、原代培养细胞直接来源于活体组织，体外培养也尽量模拟体内环境，使得分离得到的细胞接近生物体内的生活状态，可作为研究生物体细胞的生产、代谢、繁殖、凋亡提供有力手段，亦可用于各种药理作用、药物开发研究和临床实践。

三、原代细胞的质量取决于多个因素：取材、培养条件的优化、无菌操作，特别是组织分离技术等。对于大多数研究者而言，想要获得高质量的原代培养细胞仍然比较困难。尽管原代培养技术已较普遍，但是有时仍会得到一些难以解释的结果。拥有行政许可的洁净级实验动物中心，已构建细胞培养和实验平台，可分离培养数百种人、大小鼠和大型动物的原代细胞，并在此基础上提供相关细胞实验服务，包括细胞培养、细胞转染以及细胞药物刺激后各种增殖、侵染和凋亡实验。
公司正在出售的产品：

Fmoc-Pro-Pro-Pro-OH  134303-96-1  C30H33N3O6

Fmoc-Pro-Pro-Pro-Pro-Pro-OH  454693-94-8  C40H47N5O8

Fmoc-p-tBu-Phe-OH  213383-02-9  C28H29NO4

Fmoc-Ser(Ac)-OH  171778-17-9  C20H19NO6

Fmoc-Ser(BSi)-OH  146346-81-8  C24H31NO5Si

Fmoc-p-Me-Phe-OH  199006-54-7  C25H23NO4

Fmoc-Pra-OH  198561-07-8  C20H17NO4

Fmoc-Pro-Gly-OH  250695-65-9  C22H22N2O5

Fmoc-Pro-Phe-OH  120943-07-9  C29H28N2O5

Fmoc-Pro-Pro-OH  129223-22-9  C25H26N2O5

Fmoc-Phe-Phe-OH  84889-09-8  C33H30N2O5

Fmoc-Phe-Pro-OH  138372-76-6  C29H28N2O5

Fmoc-Phe-Ser(Psi(Me,Me)pro)-OH  878797-01-4  C30H30N2O6

Fmoc-Phe-Thr(Psi(Me,Me)pro)-OH  1196703-48-6  C31H32N2O6

Fmoc-p-Me-D-Phe-OH  204260-38-8  C25H23NO4

小鼠吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)ELISA试剂盒 ，英文名： IDO ELISA Kit

兔子胶原酶II(CollagenaseII)ELISA检测试剂盒RabbitCollagenaseTypeIIELISAKit 96T/48T

犬黄体生成素(LH)免疫试剂盒 Canine Leinizing Hormone,LH ELISA Kit

英文名称HumanNN-T4ELISAKit人新生甲状腺素(NN-T4)规格：96T/48T

化线粒体氧化应激活性氧(ROS)高质荧光测定试剂盒20次

RatIerleukin1,IL-1ELISA试剂盒大鼠白介素1(IL-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

人牙龈成纤维细胞小鼠白介素28(IL-28)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Rat chorionic gonadoophin (CG) ELISA Kit 大鼠绒毛膜促性腺激素(CG)ELISA试剂盒

Humansolublereceptoractivatorofnuclearfactor-kBligand,sRANKLELISAKit 人可溶性核因子κB受体活化因子配基(sRANKL)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

Humancarbonicanhydrase2,CA-2ELISA试剂盒人酶2(CA-2)ELISA试剂盒规格：96T/48T

重组腺病毒包装试剂盒1套

HumansolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCRELISAKit人可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)ELISA试剂盒规格：96T/48T

猪胰岛素(INS)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Human activated protein C (APC) ELISA Kit 人活化蛋白C(APC)ELISA试剂盒

Rabbitansforminggrowthfactorβ2,TGFβ2ELISAKit 兔转化生长因子β2(TGFβ2)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforAOAb(HumanAi-OvaryAibody,AOAb)ELISAKit人抗卵巢抗体规格：48T/96T

血栓溶解活力(THROMBOLYTIC)体外检测试剂盒20次

Porcineierleukin10,IL-10ELISAKit猪白介素10(IL-10)ELISA试剂盒规格：96T/48T

贴壁细胞传代操作步骤：

用移液管或者巴氏吸管吸取培养液；

使用不含钙镁离子的平衡盐溶液（PBS）冲洗细胞1-2次；

弃PBS，加入胰蛋白酶-EDTA消化液（消化液浓度根据各细胞不同有调整），轻轻摇晃培养瓶，使胰酶与细胞表面充分接触，37 ℃孵育2-3 min，加入含血清完全培养基终止消化。

将细胞悬液移入离心管中，800 rpm-1000rpm离心5min，弃上清，加入预热的完全培养基重悬细胞，轻轻吸打混匀，吹打过程中尽量不要出现气泡。

细胞计数，根据细胞量选择合适的传代比例，最后转移置37 ℃细胞培养箱中进行培养。

 悬浮细胞传代操作步骤：

悬浮细胞由于本身在生长培养基中悬浮，无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离，整个过程较为迅速，对细胞损伤较小。悬浮细胞传代，通常有两种方法，直接传代法和离心传代法。

（1）直接传代法

①　悬浮细胞长满至80%-90%左右（细胞悬液变黄，最大细胞密度随细胞系不同而有所差异），即可传代；

②　用吸管吸弃细胞悬液1/2～2/3；

③　加入适量的新鲜培养基，继续培养。

（2）离心传代法

①　将细胞悬液转移到离心管内；

②　800 rpm-1000rpm离心5min，弃上清；

③　使用新鲜的培养基重悬细胞；

④　吸管吸取适量细胞悬液，装入新的培养瓶，再加入适量的新鲜培养基，继续培养。