大鼠睾丸支持细胞

原代培养原理和应用：

一、细胞原代培养是通过特殊分离方法从胚胎、组织器官以及外周血中分离获得单细胞，置于合适的培养基中培养，在无菌、适当温度和一定条件下，使细胞生存、生长和繁殖的过程。原代培养的“代”并非细胞的代数，是指细胞培养的次数，从体内取出组织接种培养到第一次传代的阶段，都属原代培养，一般持续1-4周。常见的原代培养过程如图1所示。

二、原代培养细胞直接来源于活体组织，体外培养也尽量模拟体内环境，使得分离得到的细胞接近生物体内的生活状态，可作为研究生物体细胞的生产、代谢、繁殖、凋亡提供有力手段，亦可用于各种药理作用、药物开发研究和临床实践。

三、原代细胞的质量取决于多个因素：取材、培养条件的优化、无菌操作，特别是组织分离技术等。对于大多数研究者而言，想要获得高质量的原代培养细胞仍然比较困难。尽管原代培养技术已较普遍，但是有时仍会得到一些难以解释的结果。拥有行政许可的洁净级实验动物中心，已构建细胞培养和实验平台，可分离培养数百种人、大小鼠和大型动物的原代细胞，并在此基础上提供相关细胞实验服务，包括细胞培养、细胞转染以及细胞药物刺激后各种增殖、侵染和凋亡实验。

大鼠睾丸支持细胞

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传2-3代

消化液 0.25%胰蛋白酶

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介：

公司实验室分离的大鼠睾丸支持细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的大鼠睾丸支持细胞经Fas-L免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

细胞简介：

大鼠睾丸支持细胞分离自睾丸；睾丸支持细胞又称Sertoli细胞，在体内呈不规则的高锥体形，细胞基部附着在基膜上，顶部伸至曲精小管腔面。它是生精细胞的支架，为其提供必需的营养物质，能合成与分泌雄激素结合蛋白，为其提供高浓度的雄激素环境等，还具有构成血-睾屏障，形成睾丸内微环境，调节精子发生等功能。睾丸支持细胞是睾丸的主要组成细胞，能分泌多种生长因子和免疫抑制因子，不仅可为精子提供营养支持和免疫保护，也能对其他细胞，如胰岛和神经细胞提供营养支持，而且当其与胰岛或神经细胞共移植时，也能够为这些细胞提供免疫保护，提高植活率。因此，睾丸支持细胞在细胞移植中具有广泛的应用前景。制备高活率的Sertoli不仅对Sertoli的基础研究有重要价值，而且在精子发生等领域有重要意义。

贴壁细胞传代操作步骤：

用移液管或者巴氏吸管吸取培养液；

使用不含钙镁离子的平衡盐溶液（PBS）冲洗细胞1-2次；

弃PBS，加入胰蛋白酶-EDTA消化液（消化液浓度根据各细胞不同有调整），轻轻摇晃培养瓶，使胰酶与细胞表面充分接触，37 ℃孵育2-3 min，加入含血清完全培养基终止消化。

将细胞悬液移入离心管中，800 rpm-1000rpm离心5min，弃上清，加入预热的完全培养基重悬细胞，轻轻吸打混匀，吹打过程中尽量不要出现气泡。

细胞计数，根据细胞量选择合适的传代比例，最后转移置37 ℃细胞培养箱中进行培养。

 悬浮细胞传代操作步骤：

悬浮细胞由于本身在生长培养基中悬浮，无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离，整个过程较为迅速，对细胞损伤较小。悬浮细胞传代，通常有两种方法，直接传代法和离心传代法。

（1）直接传代法

①　悬浮细胞长满至80%-90%左右（细胞悬液变黄，最大细胞密度随细胞系不同而有所差异），即可传代；

②　用吸管吸弃细胞悬液1/2～2/3；

③　加入适量的新鲜培养基，继续培养。

（2）离心传代法

①　将细胞悬液转移到离心管内；

②　800 rpm-1000rpm离心5min，弃上清；

③　使用新鲜的培养基重悬细胞；

④　吸管吸取适量细胞悬液，装入新的培养瓶，再加入适量的新鲜培养基，继续培养。

公司正在出售的产品：

Fmoc-HoTyr-OH.DCHA  198560-10-0  C25H23NO5.C12H23N

H-Leu-OH  61-90-5  C6H13NO2

Z- Pyr-OH  32159-21-0  C13H13NO5

Boc-D-Phenylalaninol  106454-69-7  C14H21NO3

Boc-Ser(Tos)-OMe  56926-94-4  C16H23NO7S

H-Thr-OH  72-19-5  C4H9NO3

Fmoc-Ala-OMe  146346-88-5  C19H19NO4

Fmoc-β-Homo-Leu-OH  193887-44-4  C22H25NO4

Ac-Trp-OH  1218-34-4  C13H14N2O3

Fmoc-Leu-OPfp  86060-88-0  C27H22F5NO4

H-D-N-Me-Leu-OBzl.TosOH  1208162-98-4  C14H21NO2.C7H8O3S

PyAOP  156311-83-0  C17H27F6N7OP2

TCTU  330641-16-2  C11H15BClF4N5O

Fmoc-Lys(Aloc)-OH  146982-27-6  C25H28N2O6

Fmoc- ß-HoIle-OH  193954-27-7  C22H25NO4

小鼠组织蛋白酶Z(CTSZ)ELISA试剂盒 ，英文名： CTSZ ELISA Kit

绵羊补体片段3b受体(C3bR)ELISA检测试剂盒SheepComplemefragme3brccptor,C3bRELISAKit 96T/48T

犬胰岛素原(PI)免疫试剂盒 Canine Proinsulin,PI ELISA Kit

英文名称Mouseapelin-12ELISAKit小鼠apelin-12(apelin-12)规格：96T/48T

病毒HRP标记制备试剂盒5次(100微克/次)

Ratfibroblastgrowthfactor-10,FGF-10ELISA试剂盒大鼠成纤维细胞生长因子10(FGF-10)ELISA试剂盒规格：96T/48T

大鼠睾丸支持细胞小鼠α-内啡肽(αEP)ELISA试剂盒 ，英文名： αEP ELISA Kit

人抗血小板抗体IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA检测试剂盒HumanplateletaibodiesIgG/M/A,PA-IgG/M/AELISAKit 96T/48T

大鼠甲状旁腺激素(PTH)免疫试剂盒 Rat Parathyroid hormone,PTH ELISA Kit

英文名称RatCXCL9/MIGELISAKit大鼠CXCL9/MIG规格：

抗原涂板(COATING)缓冲液100毫升

ELISAKitGOD人葡萄糖氧化酶规格：48T/96T

植物草酸氧化酶(OxO)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Human ai actin aibody (AAA) ELISA Kit 人抗肌动蛋白抗体(AAA)ELISA试剂盒

swinemajorhistocompatibilitycomplexⅢ,MHCⅢ/SLAⅢELISAKit 猪主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHCⅢ/SLAⅢ)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

ADVIgMIII腺病毒IgMⅢ型(间接法二步法)

血液合成酶总活性比色法定量检测试剂盒20次

Mousesolubleplateletendothelialcelladhesionmolecule1,sPECAM-1ELISAKit小鼠可溶性血小板内皮细胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA试剂盒规格：96T/48T