大鼠肝内胆管上皮细胞

原代培养原理和应用：

一、细胞原代培养是通过特殊分离方法从胚胎、组织器官以及外周血中分离获得单细胞，置于合适的培养基中培养，在无菌、适当温度和一定条件下，使细胞生存、生长和繁殖的过程。原代培养的“代”并非细胞的代数，是指细胞培养的次数，从体内取出组织接种培养到第一次传代的阶段，都属原代培养，一般持续1-4周。常见的原代培养过程如图1所示。

二、原代培养细胞直接来源于活体组织，体外培养也尽量模拟体内环境，使得分离得到的细胞接近生物体内的生活状态，可作为研究生物体细胞的生产、代谢、繁殖、凋亡提供有力手段，亦可用于各种药理作用、药物开发研究和临床实践。

三、原代细胞的质量取决于多个因素：取材、培养条件的优化、无菌操作，特别是组织分离技术等。对于大多数研究者而言，想要获得高质量的原代培养细胞仍然比较困难。尽管原代培养技术已较普遍，但是有时仍会得到一些难以解释的结果。拥有行政许可的洁净级实验动物中心，已构建细胞培养和实验平台，可分离培养数百种人、大小鼠和大型动物的原代细胞，并在此基础上提供相关细胞实验服务，包括细胞培养、细胞转染以及细胞药物刺激后各种增殖、侵染和凋亡实验。

大鼠肝内胆管上皮细胞

培养信息：

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 上皮细胞样

传代特性 可传1-2代

消化液 0.25%胰蛋白酶

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介：

公司实验室分离的大鼠肝内胆管上皮细胞采用胶原酶灌注消化法后，再用胶原酶-DNA酶联合消化，接种至预先包被鼠尾胶原的培养瓶中，通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的大鼠肝内胆管上皮细胞经Cytokeratin-19免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

细胞简介：

大鼠肝内胆管上皮细胞分离自肝脏组织；肝脏是身体内以代谢功能为主的一个器官，并在身体里面起着去氧化、储存肝糖、分泌性蛋白质的合成等作用；肝脏也制造消化系统中之胆汁。肝脏是机体内脏里最大的器官，位于机体中的腹部位置，在右侧横隔膜之下，位于胆囊之前端且于右边肾脏的前方，胃的上方。肝脏是机体消化系统中最大的消化腺，为一红棕色的V字形器官。肝脏是尿素合成的主要器官，又是新陈代谢的重要器官。肝脏在机体位置和形态结构：肝脏位于右上腹，隐藏在右侧膈下和肋骨深面，大部分肝为肋弓所复盖，仅在腹上区、右肋弓间露出并直接接触腹前壁，肝上面则与膈及腹前壁相接。通过控制激素调控的分泌和吸收，在保持、调整和扩大胆小管的结构中发挥重要作用，肝内胆管上皮细胞在先天性和获得性免疫应答方面起着积极作用。肝内胆管上皮细胞约占肝细胞总数的5%，其在肝内胆道系统内形成复杂的网状管形结构。肝内胆管上皮细胞具有复杂的生理代谢功能，参与肝脏的代谢、排泌、免疫等生理过程，在肝脏疾病的发生发展过程中起一定的作用。研究表明，常见的肝内胆管病变例如原发性硬化性胆管炎、胆管癌等疾病，都是以肝内胆管上皮细胞为病变靶位，进而引起肝内胆管上皮损伤。因此，了解正常肝内胆管上皮细胞的生物学特征和病变肝内胆管上皮细胞的病理特征对研究肝内胆管病变的发病机制、诊断和治疗具有重要意义。

贴壁细胞传代操作步骤：

用移液管或者巴氏吸管吸取培养液；

使用不含钙镁离子的平衡盐溶液（PBS）冲洗细胞1-2次；

弃PBS，加入胰蛋白酶-EDTA消化液（消化液浓度根据各细胞不同有调整），轻轻摇晃培养瓶，使胰酶与细胞表面充分接触，37 ℃孵育2-3 min，加入含血清完全培养基终止消化。

将细胞悬液移入离心管中，800 rpm-1000rpm离心5min，弃上清，加入预热的完全培养基重悬细胞，轻轻吸打混匀，吹打过程中尽量不要出现气泡。

细胞计数，根据细胞量选择合适的传代比例，最后转移置37 ℃细胞培养箱中进行培养。

 悬浮细胞传代操作步骤：

悬浮细胞由于本身在生长培养基中悬浮，无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离，整个过程较为迅速，对细胞损伤较小。悬浮细胞传代，通常有两种方法，直接传代法和离心传代法。

（1）直接传代法

①　悬浮细胞长满至80%-90%左右（细胞悬液变黄，最大细胞密度随细胞系不同而有所差异），即可传代；

②　用吸管吸弃细胞悬液1/2～2/3；

③　加入适量的新鲜培养基，继续培养。

（2）离心传代法

①　将细胞悬液转移到离心管内；

②　800 rpm-1000rpm离心5min，弃上清；

③　使用新鲜的培养基重悬细胞；

④　吸管吸取适量细胞悬液，装入新的培养瓶，再加入适量的新鲜培养基，继续培养。

公司正在出售的产品：

H-Tyr(Bzl)-OBzl.HCl  52142-01-5  C23H23NO3.HCl

Boc-Tyr(3-Cl)-OH  192315-36-9  C14H18ClNO5

Z-D-Val-OH  1685-33-2  C13H17NO4

H-Dap-OH.HBr  1186-65-8  C3H8N2O2.HBr

H-D-Ser(tBu)-OMe.HCl  78537-14-1  C8H17NO3.HCl

D-Phenylglycinol  56613-80-0  C8H11NO

H-Tyr(3-I)-OH  70-78-0  C9H10INO3

H-Glu(OtBu)-OMe.HCl  6234/1/1  C10H19NO4.HCl

Rink Amide-AM Resin  183599-10-2  100-200:mesh,1%DVB

Z-Asp-OMe  4668-42-2  C13H15NO6

Z-D-Met-OH  28862-80-8  C13H17NO4S

Boc-N-Me-Ala-OH  16948-16-6  C9H17NO4

Z-Orn-OH  2640-58-6  C13H18N2O4

Fmoc-D-2-Nal-OH  138774-94-4  C28H23NO4

Z-2-Nal-OH  143218-10-4  C21H20NO4

小鼠组织金属蛋白酶抑制因子1(TIMP1)ELISA试剂盒 ，英文名： TIMP1 ELISA Kit

绵羊白介素2受体(IL-2R)ELISA检测试剂盒SheepIerleukin-2receptor,IL-2RELISAkit 96T/48T

犬胰高血糖素样肽1(GLP1)免疫试剂盒 Dog glucagon like peptide 1,GLP1 ELISA Kit

英文名称MouseAdenosineiphosphataseELISAKit小鼠ATP酶规格：96T/48T

稀酰胺1公斤

RatFibrinogen,FbgELISA试剂盒大鼠血纤蛋白原(Fbg)ELISA试剂盒规格：96T/48T

大鼠肝内胆管上皮细胞小鼠α谷胱甘肽S转移酶(α-GST)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Rat dihydrotestosterone (DHT) ELISA Kit 大鼠双氢睾酮(DHT)ELISA试剂盒

HumanPregnancySpecificβ1Glycoprotein,SP1/PSβ1-GELISAKit 人特异性β1糖蛋白(SP1/PSβ1-G)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

Humancholinephosphoglyceride,PC/CPGELISA试剂盒人胆碱0酸甘油酯(PC/CPG)ELISA试剂盒规格：96T/48T

总胆汁酸(TBA)定量检测试剂盒20次

HumanscavengerreceptorB,SRBELISAKit人清道夫受体B(SRB/CD36)ELISA试剂盒规格：96T/48T

鱼脱酶2(DIO2)ELISA检测试剂盒 96T/48T ELISA 组装/原装

Human ai IgM aibody to hepatitis A virus (ai-HAV) ELISA Kit 人抗甲型肝炎病毒IgM抗体(ai-HAV)ELISA试剂盒

swinemajorhistocompatibilitycomplexⅡ,MHCⅡ/SLAⅡELISAKit 猪主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCⅡ/SLAⅡ)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

ADVIgGVII腺病毒IgGⅦ型(间接法二步法)

血液乙醇脱氢酶III(S-亚硝基谷胱苷肽还原酶)活性比色法定量检测试剂盒20次

MousesolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCRELISAKit小鼠可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)ELISA试剂盒规格：96T/48T