大鼠腹膜间皮细胞

原代培养原理和应用：

一、细胞原代培养是通过特殊分离方法从胚胎、组织器官以及外周血中分离获得单细胞，置于合适的培养基中培养，在无菌、适当温度和一定条件下，使细胞生存、生长和繁殖的过程。原代培养的“代”并非细胞的代数，是指细胞培养的次数，从体内取出组织接种培养到第一次传代的阶段，都属原代培养，一般持续1-4周。常见的原代培养过程如图1所示。

二、原代培养细胞直接来源于活体组织，体外培养也尽量模拟体内环境，使得分离得到的细胞接近生物体内的生活状态，可作为研究生物体细胞的生产、代谢、繁殖、凋亡提供有力手段，亦可用于各种药理作用、药物开发研究和临床实践。

三、原代细胞的质量取决于多个因素：取材、培养条件的优化、无菌操作，特别是组织分离技术等。对于大多数研究者而言，想要获得高质量的原代培养细胞仍然比较困难。尽管原代培养技术已较普遍，但是有时仍会得到一些难以解释的结果。拥有行政许可的洁净级实验动物中心，已构建细胞培养和实验平台，可分离培养数百种人、大小鼠和大型动物的原代细胞，并在此基础上提供相关细胞实验服务，包括细胞培养、细胞转染以及细胞药物刺激后各种增殖、侵染和凋亡实验。

大鼠腹膜间皮细胞

培养信息：

包被条件 PLL（0.1mg/ml）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传1-2代

消化液 0.25%胰蛋白酶

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介：

公司实验室分离的大鼠腹膜间皮细胞采用混合胶原酶消化法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的大鼠腹膜间皮细胞经PCK、Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

细胞简介：

大鼠腹膜间皮细胞分离自腹膜组织；腹膜是存在于高等脊椎动物腹腔中的一层黏膜，主要由间皮细胞构成，藉由结缔组织的支持所形成的一层膜状组织。腹膜包覆大部分腹腔内的器官，能分泌黏液润湿脏器的表面，减轻脏器间的摩擦。腹腔脏器的血液、淋巴和神经组织经由腹膜与外界相连；腹膜也具有吸收撞击保护内脏的效果。腹膜（peritoneum）为全身面积最大、配布最复杂的浆膜，由皮及少量结缔组织构成，薄而光滑，呈半透明状。衬于腹、盆腔壁内表面的腹膜称为壁腹膜（parietal-peritoneum）或腹壁薄层；覆盖腹、盆腔器表面的部分称为脏腹膜（visceral-peritoneum）腹膜或腹膜脏层。脏腹膜与壁腹膜互相延续、移行，共同围成不规则的潜在性腔隙，称为腹膜腔（peritoneal-cavity）。腹膜腔是脏、壁两层腹膜之间相互移行围成的潜在性间隙。腹膜腔内有少量浆液，在脏器活动时可减少摩擦。腹膜间皮细胞属于上皮组织中的单层扁平上皮，是覆盖于腹膜表面的一层细胞。间皮细胞是构成间皮的细胞，正常大小约为15-25微米，细胞常呈圆形或者卵圆形。其功用是提供润滑，使器官与器官、器官与胸膜与腹膜间都能得到良好的保护，不会互相磨损受伤。而间皮所生产的润滑和保护作用就是靠间皮细胞所分泌的物质来达成，分泌物多半为细胞外基质、玻尿酸类物质。

贴壁细胞传代操作步骤：

用移液管或者巴氏吸管吸取培养液；

使用不含钙镁离子的平衡盐溶液（PBS）冲洗细胞1-2次；

弃PBS，加入胰蛋白酶-EDTA消化液（消化液浓度根据各细胞不同有调整），轻轻摇晃培养瓶，使胰酶与细胞表面充分接触，37 ℃孵育2-3 min，加入含血清完全培养基终止消化。

将细胞悬液移入离心管中，800 rpm-1000rpm离心5min，弃上清，加入预热的完全培养基重悬细胞，轻轻吸打混匀，吹打过程中尽量不要出现气泡。

细胞计数，根据细胞量选择合适的传代比例，最后转移置37 ℃细胞培养箱中进行培养。

 悬浮细胞传代操作步骤：

悬浮细胞由于本身在生长培养基中悬浮，无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离，整个过程较为迅速，对细胞损伤较小。悬浮细胞传代，通常有两种方法，直接传代法和离心传代法。

（1）直接传代法

①　悬浮细胞长满至80%-90%左右（细胞悬液变黄，最大细胞密度随细胞系不同而有所差异），即可传代；

②　用吸管吸弃细胞悬液1/2～2/3；

③　加入适量的新鲜培养基，继续培养。

（2）离心传代法

①　将细胞悬液转移到离心管内；

②　800 rpm-1000rpm离心5min，弃上清；

③　使用新鲜的培养基重悬细胞；

④　吸管吸取适量细胞悬液，装入新的培养瓶，再加入适量的新鲜培养基，继续培养。

公司正在出售的产品：

Boc-Lys(2-Cl-Z)-ol  14028-05-8  C19H29ClN2O5

Nτ-Methyl-His-OH  332-80-9  C7H11N3O2

H-D-Phe-OtBu.HCl  3403-25-6  C13H19NO2.HCl

Fmoc-Asn-OH  71989-16-7  C19H18N2O5

Boc-N-Me-Nle-OH  117903-25-0  C12H23NO4

Boc-Cha-OH  37736-82-6  C14H25NO4

Fmoc-NH2  84418-43-9  C15H13NO2

CDI (1,1′-Carbonyldiimidazole)  530-62-1  C7H6N4O

Z-Met-OH  1152-62-1  C13H17NO4S

H-Phe(4-Br)-OH  24250-84-8  C9H10BrNO2

Boc-Asn(Trt)-OH  132388-68-2  C28H30N2O5

Boc-D-Tyr(2-Br-Z)-OH  81189-61-9  C22H24BrNO7

Z-D-Glu(OBzl)-OH  59486-73-6  C20H21NO6

H-D-Orn-OH. HCl  16682-12-5  C5H12N2O2.HCl

D-Leu-ol  53448-09-2  C6H15NO

小鼠组织金属蛋白酶抑制因子3(TIMP3)ELISA试剂盒 ，英文名： TIMP3 ELISA Kit

鸭病毒性肠炎病毒(DEV)ELISA检测试剂盒Duckviruseeritis,DEVELISAKit 96T/48T

犬乙酰胆碱受体抗体(AChRab)免疫试剂盒 Canine acetylcholine receptor aibody,AChRab ELISA Kit

英文名称MouseAβ1-42proteinELISAKit小鼠Aβ1-42蛋白规格：96T/48T

冰冻组织固着液50毫升

Ratferritin,FEELISA试剂盒大鼠铁蛋白(FE)ELISA试剂盒规格：96T/48T

大鼠腹膜间皮细胞小鼠α干扰素(IFNα)ELISA试剂盒 ，英文名： IFNα ELISA Kit

大鼠白介素1可溶性受体Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA检测试剂盒Ratsolubleierleukin-1receptorⅡ,IL-1sRⅡELISAkit 96T/48T

人L选择素(L-Selectin/CD62L)免疫试剂盒 Human L-Selectin ELISA kit

英文名称MouseMacrophage-DerivedChemokine，MDCELISAkit小鼠巨噬细胞来源的趋化因子(MDC)规格：96T/48T

冰冻切片TUNEL显色法(DAB)测定试剂盒10次

Rabbitβ-Thromboglobulin,β-TGELISA试剂盒兔子β血小板球蛋白/β血栓环蛋白(β-TG)ELISA试剂盒规格：96T/48T

鱼糖胺聚糖(GAG)ELISA检测试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Human ai thyroglobulin aibody (ATGA/TGAB) ELISA Kit 人抗甲状腺球蛋白抗体(ATGA/TGAB)ELISA试剂盒

PorcineAngiopoietin1,ANG-1ELISAKit 猪血管生成素1(ANG-1)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

ADVIgG腺病毒IgG混合型(间接法二步法)

血液乙醇脱氢酶III活性比色法定量检测试剂盒20次

MousesolubleClusterofdiffereiation86,sCD86ELISAKit小鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA试剂盒规格：96T/48T