Bst 4.0 SYBR Green Bead
商品属性:
货号 | 规格 | 产品名称 |
P-PR1248-100Tx25μl | 100Tx25μl | Bst 4.0 SYBR Green Bead |
产品介绍:
描述:
该制品为全体系冻干微球制品,内含恒温扩增所用的反应缓冲液、SYBR Green 荧光染料、Mg2+、dNTP、Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶等,使用时只需要加入引物、模板即可进行核酸恒温扩增。Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶具有依赖于 RNA 模板的聚合酶活性(逆转录),还具有依赖于 DNA 的聚合酶活性,因此无论 DNA 或 RNA 样本均可使用该制品进行恒温扩增。该制品是进行 LAMP 及RT-LAMP 扩增反应的绝佳试剂。
SYBR Green 系列产品为实时荧光检测的专用试剂,可直接在恒温荧光仪或定量 PCR 以上进行 LAMP 反应扩增。
储存:-20℃保存 2 年;室温(25℃)保存>6 个月。
使用冻干微球进行全扩增体系用品的制备方法:将优化的扩增引物分装于 0.2 ml EP 管底部,于 70-80℃条件烘干1-2h。烘干后的 0.2 ml EP 管已经含有干燥的扩增引物,再加入一粒冻干微球即可制备成全扩增体系干燥品,该干燥品无需冷链运输,可长期保存。
反应体系说明:每一个冻干微球为按照 25 μl 反应体系建立,在使用时只需要加入 25 μl 的 ddH2O 或模板即可进行反应。
使用实例,进行 LAMP 荧光扩增
1. 配制荧光 LAMP 反应体系在 0.2 ml EP 反应管中加入下述试剂
Bst 4.0 SG Bead 1 粒
10xLAMP Primer Mix 2.5 μl
模板 DNA/RNA X μl
ddH2O 到液体总量 25 μl
10xLAMP Primer Mix 浓度:FIP/BIP 分别为 16 μM、LoopF/B 分别为 4-8 μM、F3/B3 分别为 2 μM。
2. 反应体系配好后,置于荧光定量 PCR 仪中于 65°C进行反应 15~30min。1min 收集一次荧光信号。读取扩增曲线进行阴性和阳性判读。
3. 根据荧光扩增曲线判读阳性和阴性。
注意事项:
(1)关于矿物油的使用,在配制完 LAMP 反应体系后,可加入一滴矿物油覆盖于反应液上部,可以有效的减少气溶胶的污染。实验证明矿物油并不影响机器的荧光数值读取。
(2)关于扩增曲线的异常:由于 LAMP 扩增速度较快,荧光信号读取可能存在矫正计算问题,这与荧光设备的软件算法有管。在有些荧光 PCR 仪上,在相对荧光模式下,表现出曲线飞峰、终点曲线下降的问题。此时调整到原始荧光值模式下观察结果,或致电相应设备供应商进行咨询。
pcr相关试剂实验结果分析:
PCR实验结果的分析涉及多个方面,包括实验操作、试剂质量、实验条件等,这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。以下是对PCR实验结果分析的一些关键点:
循环次数过多:增加模板量减少循环次数,缩短退火时间及延伸时间,或改用两种温度的PCR循环,可以有效避免循环次数过多导致的问题。
退火温度过低:退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要,过低的退火温度可能导致非特异性扩增,影响结果的准确性1。
电泳体系问题:包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、凝胶没有凝固好、琼脂糖质量差等问题,这些都会影响DNA片段的分离效果。
试剂盒问题:运输储存不当可能引起试剂盒失效,试剂盒本身质量问题如引物选择、循环参数设置不当也可能导致实验失败1。
降解的陈旧模板:使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布,影响结果的解读1。
PCR假阴性结果:可能由引物长度不够、试剂浓度不标准、靶序列突变或缺失、循环参数设置错误、标本中有Taq酶抑制剂、PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。
为了获得准确的PCR实验结果,需要注意以下几点:
确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。
在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测,以便及时对反应条件进行调整。
防止样本的污染和交叉感染,以免影响PCR反应的准确性和可靠性。
通过上述分析,可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素,从而提高实验结果的准确性和可靠性。
公司正在出售的产品:
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锌指蛋白114抗体 ZNF114 | Bst 4.0 SYBR Green Bead生殖细胞增殖相关蛋白NANOS1抗体 NANOS1 |
补体C3抗体 Complement C3 | 神经胰蛋白酶抗体 Neurotrypsin |
Bst 4.0 SYBR Green Bead信息由上海博湖生物科技有限公司为您提供,如您想了解更多关于Bst 4.0 SYBR Green Bead报价、型号、参数等信息,欢迎来电或留言咨询。除供应Bst 4.0 SYBR Green Bead外,上海博湖生物科技有限公司还可为您提供D15000+2000 DNA Marker 分子量标准、DL5000+ DNA Marker 分子量标准 (100,250,500,750,1000,1500,2000,3000,5000bp)、DL8000 DNA Marker 分子量标准 (100,250,500,750,1000,2000,3000,5000,8000bp)等产品,公司有专业的客户服务团队,是您值得信赖的合作伙伴。