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上海雅吉生物科技有限公司

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甲型流感病毒探针法法荧光定量RT-PCR试剂盒

供货周期： 14天

品牌：雅吉生物

规格： 1盒

型号： 50次/盒

货号： 1515941

有效期： 12月

标准值：详见说明

报价： ¥4490

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产品介绍

本产品仅供科研

更多产品详细信息可免费向客服索取

产品名称：甲型流感病毒探针法法荧光定量RT-PCR试剂盒

1.即开即用，用户只需要提供样品DNA模板。

2.引物等组分经过优化，灵敏度高。

3.提供阳性对照，便于区分假阴性样品。

4.特异性高，引物是根据高度保守区设计，不会跟其他的DNA/RNA发生交叉反应。

5.既可用于定性检测，又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级。

6.本产品足够50次20μL体系的染料法荧光定量PCR反应。

7. 本产品只能用于科研。

包装规格及成分（具体信息详见说明书）：

编号	成分	规格
试剂一	探针法qRT-PCR缓冲液	500μL
试剂二	探针法qRT-PCR酶混合液	50μL
试剂三	荧光PCR专用模板稀释液	1mL
试剂四	PCR引物-探针干粉	50T
试剂五	PCR阳性对照(10⁷拷贝/μL)	50μL

甲型流感病毒探针法法荧光定量RT-PCR试剂盒操作过程：

一、稀释标准曲线样品（以 10E1-10E6 拷贝/μL 这6 个10 倍稀释度为例）。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供无传染性的DNA 片段作为阳性对照。

1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2，1。

2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液，最好用带芯枪头，下同。

3. 在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。

4. 换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。

5. 换枪头，在 4 号管中加入 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E4 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。

6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。

二、样品 DNA 的制备

1. 如果有 N 个样品待提取，最好设置 N+2 个提取，多出的是PC（样品制备阳性对照）和 NC（样品制备阴性对照）。可以取阳性对照的1000倍稀释液10μL 再加上一定量的水，使总体积与待提取样品的规定体积一致，以此作为 PC。另外用水作为 NC。

2. 用自选方法纯化样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数DNA提取试剂盒兼容。

三、设置qPCR反应（20μL体系，在样品制备室进行）

如果进行定量分析，则标记N+9个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照，6个用于标准曲线样品。如果做定性分析，则6个标准曲线样品只选一个做（可以选4号，其余样品不变）。以下只介绍定量分析的反应设置。

白试剂盒.png

四、数据处理

1. 如果把本试剂盒用于定量检测，则以阳性对照浓度的log 值为横轴，以Ct值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品的 Ct 值从标准曲线上推算出样品核酸浓度的 log 值，再推算出其浓度。

2. 如果把本试剂盒用于定性检测，只判断阳性或阴性，则阴性对照Ct 必须大于或等于 40。阳性对照必须有荧光对数增长，有典型扩增曲线，Ct 值应该小于或等于 39。对待测样品，如果其 Ct 大于或等于40 则为阴性，如果小于或等于 39 则为阳性。如果在 39-40 之间，则重复一次。重复实验的Ct值如果大于或等于 40 则为阴性，如果小于 40，则为阳性。

盖上盖子后上机，按下面参数进行PCR（具体PCR参数可以根据仪器不同而自行优化）。

过程	温度	时间
逆转录	50℃	10min.
预变性 PCR反应 (40个循环)	95℃	10min.
	95℃	15sec.
	60℃	60sec(采集FAM通道的荧光信号，淬灭基团为NFQ)

甲型流感病毒探针法法荧光定量RT-PCR试剂盒注意事项

1操作严格按照说明书进行；

2试剂盒内各种组分使用前应自然融化，完全混匀并短暂离心；

3反应液应避光保存；

4反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；

5使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服；

6样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；

7实验完毕后用10%次氯酸或75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；

8试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。

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甲型流感病毒探针法法荧光定量RT-PCR试剂盒信息由上海雅吉生物科技有限公司为您提供，如您想了解更多关于甲型流感病毒探针法法荧光定量RT-PCR试剂盒报价、型号、参数等信息，欢迎来电或留言咨询。除供应甲型流感病毒探针法法荧光定量RT-PCR试剂盒外，上海雅吉生物科技有限公司还可为您提供烟草花叶病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒Tobacco Mosaic Virus(TMV)、人腺病毒D96型探针法荧光定量PCR试剂盒Human Adenovirus D96（HAdV-D96）、鳄鱼源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒等产品，公司有专业的客户服务团队，是您值得信赖的合作伙伴。

工商信息

企业名称

上海雅吉生物科技有限公司

企业信息已认证

企业类型

有限责任公司(国内合资)

信用代码

91310112572709963N

成立日期

2011-04-17

注册资本

经营范围

从事生物科技、化工科技领域内的技术开发、技术转让、技术咨询、技术服务,电子商务(不得从事增值电信、金融业务)，实验室设备、无尘室设备、仪器仪表、化工原料及产品(除危险化学品、易制毒化学品、民用爆炸物品、烟花爆竹、监控化学品)、一类医疗器械销售.[依法须经批准的项目,经相关部门批准后方可开展经营活动)

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