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澳睿赛生物技术(上海)有限公司
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产品介绍
MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒
产品简介:
MTT法细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒被广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的检测。活细胞的线粒体中存在与 NADP相关的脱氢酶，可将黄色的MTT还原生成结晶状的蓝紫色的Formazan，死细胞无此酶，MTT不被还原。在特定溶剂存在的情况下，Formazan可以被完全溶解。然后通过酶标仪可以测定460-630nm波长附近的吸光度。细胞增殖越多越快，则吸光度越高;细胞毒性越大，则吸光度越低。
本试剂盒灵敏度高，线性范围宽，使用方便。
试剂盒组成：
产品编号 | 产品名称 | 250assays | 500assays |
组份 A | MTT溶液 | 2.5ml | 5ml |
组份 B | 溶解液 | 30ml | 60ml |
说明书 | 1 | 1 | |
储存条件:
-20°C避光保存
有效期:一年
检测方法:
l 酶标仪
样本类型:
l 动物细胞
试剂盒以外自备试剂和仪器:
仪器准备：
l 带有450mm滤光片的酶标仪
l CO2培养箱
试剂准备：
l PBS
l 纯水
试剂准备：
l 移液器及吸头
l 96孔培养板
使用方法:
贴壁细胞：
1、 收集对数期细胞，每孔加入100ul细胞悬液,使待测细胞调密度约2000-10000孔。
2、 5%CO2，37℃孵育，至细胞单层铺满孔底（96 孔平底板),加入浓度梯度的药物,原则上，细胞贴壁后即可加药，也可两小时，或半天时间后加药，一般5-7个梯度,每孔100ul,设3-5个复孔。
3、 5%CO2，37℃孵育16-48小时，倒置显微镜下观察。
4、 每孔加入10ulMTT溶液，继续培养4h。若药物与MTT能够反应，可先离心后弃去培养液，小心用PBS 冲2-3遍后，再加入含MTT的培养液。
5、 终止培养，小心吸去孔内培养液。
6、 每孔加入150ul溶解液，置摇床上低速振荡10min，使结晶物充分溶解。在酶标仪490nm或550nm或570nm 处测量各孔的吸光值。
7、 同时设置调零孔（培养基、MTT、溶解液)，对照孔（细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT、溶解液)
悬浮细胞:
1、 收集对数期细胞,调节细胞悬液浓度1×10°/ml,按次序将补足的无血清培养基40ul、需检测药物10ul、细胞悬液50ul (即5×10‘细胞/孔)，共 100ul加入到96孔板（边缘孔用无菌水或PBS填充)。每板设对照（加100ul培养基)。
2、 置37℃，5%CO2孵育16-48小时，倒置显微镜下观察。
3、 每孔加入10 ul MTT溶液，继续培养4 h。
4、 离心(1000转x10min)，小心吸掉上清，每孔加入100 ul溶解液，置摇床上低速振荡10 min，使结晶物充分溶解。490nm或550nm或570nm 处测量各孔的吸光值。
5、 同时设置调零孔(培养基、MTT、溶解液)，对照孔（细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT、溶解液)，每组设定3-5复孔。
结果分析∶
细胞的存活率:将各测试孔的OD值减去调零孔OD值或对照孔OD值。各重复孔的OD值取均数士SD。
细胞的存活率以T/C%表示，T为加药细胞的OD值，C为对照细胞的OD值。
细胞存活率%=（加药细胞OD/对照细胞OD)×100
注意事项:
l 避免反复冻融，最好小剂量分装，用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光以免分解。
l 细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
l 还原的MTT在460-630均有较好的吸收，如果你的酶标仪是滤光片，可以选 470 nm左右或630 nm左右的滤光片，如果酶标仪有单波长，你可以在检测前扫描一下吸收谱，选用最大吸收波长检测，最大波长，在550nm 附近，必要时加一个参比波长以扣除非特异性吸收。
l MTT溶液为黄色，需避光保存，长时间光照会导致失效。当颜色变为灰绿色时，请勿使用。
l MTT溶液在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固，可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
l Formazan溶解液结冻或产生沉淀时可以37℃水浴孵育以促进溶解，并且必须在全部溶解并混匀后使用。
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒信息由澳睿赛生物技术(上海)有限公司为您提供，如您想了解更多关于MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒报价、型号、参数等信息，欢迎来电或留言咨询。除供应MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒外，澳睿赛生物技术(上海)有限公司还可为您提供细胞周期检测试剂盒-绿色荧光、细胞周期检测试剂盒（7-AAD）、MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒等产品，公司有专业的客户服务团队，是您值得信赖的合作伙伴。
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工商信息
企业名称
澳睿赛生物技术(上海)有限公司
企业信息已认证
企业类型
有限责任公司(自然人投资或控股)
信用代码
91310000MA1H3QXJ7J
成立日期
2021-05-13
注册资本
人民币100.0000万元整
经营范围
一般项目:从事生物科技制域内的技术服务,技术开发,技术咨询、技术交流、技术转让,技术推广;工程和技术研究和试验发展,国学研究和试验发展;专用化学产品销售(不含危险化学品);仪器保表销售.鞋璃仪器销售;光学仪器销售;电子制量仪器销售;智能仪器仪表销售;企业管理咨询;软件开发;信息咨询服务(不含许可类信息咨询服务);市场营销策划;互联网销售(除销售需要许可的商品);数据处理和存销支持服务;办公设备耗材销售;计算机软硬件及辅助设备批发;第一美医疗器械销售;日用百货销售;电子元器件与机电组件设备销售;机械电气设备销售;电子产品销售;工程塑料及合成树脑销售;塑料制品销售;货物进出口,技术进出口(除依法须经批准的项目外,凭营业执照依法自主开展经营活动)。
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