搜展位
搜全站
澳睿赛生物技术(上海)有限公司
关注
已关注
银牌2年
已认证
粉丝量 0
400-860-5168转6012
仪器信息网认证电话，请放心拨打
产品介绍
Hoechst33342/PI双染试剂盒
产品简介:
Hoechst33342/PI双染细胞凋亡检测试剂盒是采用DNA探针双染细胞核的方法检测细胞的状态。
Hoechst33342染色液A可以透过正常细胞膜，而细胞凋亡后，细胞膜对Hoechst33342染色液A的通透性增加，因此进入凋亡细胞中的Hoechst 33342比正常细胞的多，荧光强度要比正常细胞中要高，此外，凋亡细胞的染色体DNA 的结构发生了改变从而使该染料能更有效地与DNA 结合，并且凋亡细胞膜上的p-糖蛋白泵功能受到损伤不能有效地将Hoechst33342排出到细胞外使之在细胞内积累增加等都使凋亡细胞的蓝色荧光增强。
PI染色液B不能透过细胞膜，对正常细胞和凋亡细胞不能染色，而对坏死细胞可以染色。
用两种染色液对细胞进行双染后,使用流式细胞仪或荧光显微镜即可对细胞状态进行检测。在双变量流式细胞仪的散点图上，这三群细胞表现分别为:正常细胞为低蓝色/低红色(A+/B+)，凋亡细胞为高蓝色/低红色(A++/B+)，坏死细胞为低蓝色/高红色（A+/B++)。
试剂盒组成：
产品编号 | 产品名称 | 100-200T |
组份 A | Hoechst33342染色液A | 1000μL |
组份 B | PI染色液B | 1000μL |
组份 C | 10*染色缓冲液C | 10ml |
说明书 | 1 | |
各组份储存条件:
A液和B液-20℃避光保存，
C液 2-8℃保存。
储存条件:
2-8°C避光保存
【注】
l 开盖后组份按要求条件保存。
l 拆封后请尽快使用完！
有效期:一年
Hoechst33342和PI荧光光谱
检测方法:
流式细胞仪
荧光显微镜
激光共聚焦
样本类型:
●悬浮细胞●贴壁细胞
试剂盒以外自备试剂和仪器:
仪器准备：
l 荧光显微镜/激光共聚焦/流式细胞仪
l 离心机
l 移液器
l 冰箱
l 冰盒
试剂准备：
l PBS缓冲液( pH7.4，实验室常用的10mM磷酸缓冲盐溶液（1X))( phosphate buffer saline/Dulbecco's PBS:约含8mM NazHPO4:、2mMKHPO4、137mM NaCI和3mM KCI)
l 或者HBSS(Hank's Balanced Salt Solution: With:Calcium MagnesiumGlucose: Without: Phenol Red。Components:CaCl2(anhydrous)140mg/L(1.261mM)、MgClz-6HzO 100mg/L(0.493mM)、MgSO4-7HzO100mg/L(0.407mM)、KCI 400mglL (5.333mM)、KH,PO460mglL(0.441mM)、NaHCO2,350mg/L(4.167mM)、NaCl8000mg/L(137.931mM)、NagHPOa(anhydrous)48mg/L(0.338mM)、D-Glucose 1000mg/L(5.556mM))
耗材准备：
l 离心管
l 吸头
使用方法:
使用注意事项;
l 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体洒落。
l 细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
l 标记的条件因细胞种类而异，根据不同样本的实际染色结果做相应调整，在每次实验前，请先根据不同的实验要求、细胞类型、细胞的膜通透性等进行优化，确定最佳条件。以下方法仅供参考。
l 染色浓度和时间根据不同样本的实际染色结果做相应调整。
l 染色后立即进行分析。
1、 染色缓冲液工作液的配制:
根据样品数按下列比例配制染色缓冲液。取100 uL试剂C加900 uL无菌纯水稀释，混匀即成1*染色缓冲液工作液。
2、 收集样本细胞，细胞数量在1X106个以内。
3、 用PBS洗涤细胞两次。
4、 用500 u L-1ml染色缓冲液将细胞重悬。
5、 加入5-10ul Hoechst33342染色液A。
6、 轻轻混匀后4℃避光孵育10分钟。
7、 加入5-10ul PI染色液B。
8、 轻轻混匀后4℃避光孵育5-10分钟。
9、 用PBS洗涤细胞。
10、用PBS重悬细胞。
11、用流式细胞仪或荧光显微镜检测结果。HO33342用紫外光激发，PI用蓝光激发。
Hoechst33342-DNA复合物的最大激发波长为350nm，最大发射波长为460nm，PI-DNA复合物的最大激发和最大发射波长分别为488nm和615nm.
结果分析:
正常细胞为低蓝色/低红色(A+/B+)，凋亡细胞为高蓝色/低红色（A++/B+)，坏死细胞为低蓝色/高红色（A+/B+十)。
形态学:正常细胞核形态呈圆形，淡蓝色，内有较深的蓝色颗粒:凋亡细胞的核呈亮蓝色，或核呈分叶状，碎片状。坏死细胞核红色。
注意事项:
l 正式实验前请选取几个样本做预实验，以优化实验条件，取得最佳实验效果。
l 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
l 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
l 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
l 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
l 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
Hoechst33342/PI双染试剂盒信息由澳睿赛生物技术(上海)有限公司为您提供，如您想了解更多关于Hoechst33342/PI双染试剂盒报价、型号、参数等信息，欢迎来电或留言咨询。除供应Hoechst33342/PI双染试剂盒外，澳睿赛生物技术(上海)有限公司还可为您提供Annexin V- Alexa Fluor 488/PI双染细胞凋亡检测试剂盒等产品，公司有专业的客户服务团队，是您值得信赖的合作伙伴。
相关试剂
更多
工商信息
企业名称
澳睿赛生物技术(上海)有限公司
企业信息已认证
企业类型
有限责任公司(自然人投资或控股)
信用代码
91310000MA1H3QXJ7J
成立日期
2021-05-13
注册资本
人民币100.0000万元整
经营范围
一般项目:从事生物科技制域内的技术服务,技术开发,技术咨询、技术交流、技术转让,技术推广;工程和技术研究和试验发展,国学研究和试验发展;专用化学产品销售(不含危险化学品);仪器保表销售.鞋璃仪器销售;光学仪器销售;电子制量仪器销售;智能仪器仪表销售;企业管理咨询;软件开发;信息咨询服务(不含许可类信息咨询服务);市场营销策划;互联网销售(除销售需要许可的商品);数据处理和存销支持服务;办公设备耗材销售;计算机软硬件及辅助设备批发;第一美医疗器械销售;日用百货销售;电子元器件与机电组件设备销售;机械电气设备销售;电子产品销售;工程塑料及合成树脑销售;塑料制品销售;货物进出口,技术进出口(除依法须经批准的项目外,凭营业执照依法自主开展经营活动)。
联系我们
澳睿赛生物技术（上海）有限公司
公司地址
上海市松江区新桥镇卖新公路2078号
客服电话
400-860-5168转6012
推荐产品
供应产品
