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澳睿赛生物技术(上海)有限公司
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产品介绍
猪乳腺上皮细胞
| 一、细胞基本属性 | |
细胞名称 | 猪乳腺上皮细胞 |
组织来源 | 乳房组织 |
商品货号 | ORCP014 |
种属来源 | 猪 |
产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 |
细胞简介 | 乳腺位于皮下浅筋膜的浅层与深层之间。浅筋膜伸向乳腺组织内形成条索状的小叶间隔，一端连于胸肌筋膜，另一端连于皮肤，将乳腺腺体固定在胸部的皮下组织之中。乳房腺体由15-20个腺叶组成，每一腺叶分成若干个腺小叶，每一腺小叶又由10-100个腺泡组成，这些腺泡紧密地排列在小乳管周围，腺泡的开口与小乳管相连。 乳腺上皮细胞来源于乳腺小叶中。它们与腺体导管和脂肪组织一起在乳腺中形成复杂的网络结构。乳腺上皮细胞在人和动物体出生、发育和妊娠中均会受荷尔蒙调控而进行一系列的增长、迁移和分化。激素水平失调、细胞外基质的变化和其它的基因因素都会导致乳腺上皮细胞恶性增长，最终导致乳腺癌的发生。了解乳腺上皮细胞的特性可以帮助我们理解乳腺癌的病例机制以及为治疗确定新的靶点 |
培养基 | 原代上皮细胞培养体系 |
换液频率 | 每2-3天换液一次 |
生长特性 | 贴壁 |
细胞形态 | 上皮样，多角形细胞 |
传代特性 | 根据细胞特性 |
消化液 | 0.25%胰蛋白酶 |
培养条件 | 气相：空气，95%；CO2，5% |
质量检测：澳睿赛实验室分离的猪乳腺上皮细胞经细胞角蛋白-18（CK-18）免疫荧光染色为阳性，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
猪乳腺上皮细胞体外培养周期有限；建议使用澳睿赛配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
三、使用方法
在澳睿赛技术部标准操作流程下，建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完全培养基终止消化；
3)用吸管轻轻吹打混匀，按传代比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；
4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 悬浮细胞处理
1)收集T25细胞培养瓶中的培养基至50ml离心管中，用PBS清洗细胞培养瓶1-2次，收集清洗液；
2)1200-1500rpm离心3min，弃上清，收集细胞沉淀；
3)加入5ml新鲜完全培养基，用吸管轻轻吹打混匀、分散细胞；将分散好的细胞调整合适密度接种至培养器皿中，置于37°C、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；
4)若遇到悬浮细胞团块较大，无法机械吹散时，向步骤2)中细胞沉淀添加0.25%胰蛋白酶消化液2mL至离心管中，用吸-管轻轻吹打混匀，37°C温浴2-3min，消化结束后，加入胰酶抑制剂(或血清)终止消化，用吸管轻轻吹打，分散细胞；1200rpm离心5min，弃上清，收集细胞沉淀；
5)加入5ml新鲜完全培养基，用吸管轻轻吹打混匀；按传代比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，置于37°C、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；
6)待细胞状态稳定后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
2)1200-1500rpm离心3min，弃上清，收集细胞沉淀；
3)加入5ml新鲜完全培养基，用吸管轻轻吹打混匀、分散细胞；将分散好的细胞调整合适密度接种至培养器皿中，置于37°C、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；
4)若遇到悬浮细胞团块较大，无法机械吹散时，向步骤2)中细胞沉淀添加0.25%胰蛋白酶消化液2mL至离心管中，用吸-管轻轻吹打混匀，37°C温浴2-3min，消化结束后，加入胰酶抑制剂(或血清)终止消化，用吸管轻轻吹打，分散细胞；1200rpm离心5min，弃上清，收集细胞沉淀；
5)加入5ml新鲜完全培养基，用吸管轻轻吹打混匀；按传代比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，置于37°C、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；
6)待细胞状态稳定后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
4. 细胞收货脱落
1)收集所有细胞悬液，1000rpm，离心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中，重悬沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min)；消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化；
3)经1000rpm，离心5min，丢弃上清，用5ml完全培养基(补加1%FBS，促进贴壁)重悬沉淀，接种于新的培养瓶内；
4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
5. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性，贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿（如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等）时，需要对实验器皿进行包被，以增强细胞贴壁性，避免细胞因没贴好影响实验；包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚赖氨酸PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%），依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
四、注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和澳睿赛技术部沟通；由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，详尽告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
5. 该细胞只可用于科研。
1)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
2)本产品未通过用于活体诊断的审核
备注：由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同，以上方法仅供各实验室参考
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
猪乳腺上皮细胞信息由澳睿赛生物技术(上海)有限公司为您提供，如您想了解更多关于猪乳腺上皮细胞报价、型号、参数等信息，欢迎来电或留言咨询。除供应猪乳腺上皮细胞外，澳睿赛生物技术(上海)有限公司还可为您提供小鼠脐带间充质干细胞完全培养基、小鼠滑膜成纤维细胞完全培养基、猪睾丸支持细胞等产品，公司有专业的客户服务团队，是您值得信赖的合作伙伴。
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工商信息
企业名称
澳睿赛生物技术(上海)有限公司
企业信息已认证
企业类型
有限责任公司(自然人投资或控股)
信用代码
91310000MA1H3QXJ7J
成立日期
2021-05-13
注册资本
人民币100.0000万元整
经营范围
一般项目:从事生物科技制域内的技术服务,技术开发,技术咨询、技术交流、技术转让,技术推广;工程和技术研究和试验发展,国学研究和试验发展;专用化学产品销售(不含危险化学品);仪器保表销售.鞋璃仪器销售;光学仪器销售;电子制量仪器销售;智能仪器仪表销售;企业管理咨询;软件开发;信息咨询服务(不含许可类信息咨询服务);市场营销策划;互联网销售(除销售需要许可的商品);数据处理和存销支持服务;办公设备耗材销售;计算机软硬件及辅助设备批发;第一美医疗器械销售;日用百货销售;电子元器件与机电组件设备销售;机械电气设备销售;电子产品销售;工程塑料及合成树脑销售;塑料制品销售;货物进出口,技术进出口(除依法须经批准的项目外,凭营业执照依法自主开展经营活动)。
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