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澳睿赛生物技术(上海)有限公司
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产品介绍
其它参数
种属来源：人
细胞形态：成纤维细胞样
生长特性：贴壁
人支气管成纤维细胞
Human bronchial fibroblasts
| 一、细胞基本属性 | |
细胞名称 | 人支气管成纤维细胞 |
组织来源 | 支气管组织 |
商品货号 | ORCH015 |
种属来源 | 人 |
产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 |
细胞简介 | 人支气管成纤维细胞分离自支气管组织；支气管(Bronchi)，是指由气管分出的各级 分 枝，由气管分出的一级支气管，即左、右主支气管。左主支气管与右主支气管相比较，前 者较细长，走向倾斜；后者较粗短，走向较前者略直，所以经气管堕入的异物多进入右主 支气管。支气管和气管还有以区别就是，气管是以“C”型的气管软骨为支架，而支气管 不是。成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞 分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞 核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显 的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细 胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的支气管 成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出 伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀， 散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉 重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合， 并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。支气管成纤维细胞在生理条 件下的主要功能包括：构造和维持组织的正常形态，合成和释放细胞外基质以及组织损伤 后及时大量聚集修复损伤组织。 |
培养基 | 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 |
换液频率 | 每2-3天换液一次 |
生长特性 | 贴壁 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 |
传代特性 | 可传5代左右；3代以内状态最佳 |
传代比例 | 1:2 |
消化液 | 0.25%胰蛋白酶 |
培养条件 | 气相：空气，95%；CO2，5% |
方法简介：澳睿赛实验室分离的人支气管成纤维细胞采用胰蛋白酶 - 胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶。
质量检测：澳睿赛实验室分离的人支气管成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以
上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
人支气管成纤维细胞体外培养周期有限；建议使用澳睿赛配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
三、使用方法
人支气管成纤维细胞是一种贴壁细胞，细胞形态呈纤维细胞样，在澳睿赛技术部标准操作流程下，细胞可传5代左右；3代以内状态最佳；建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完全培养基终止消化；
3)用吸管轻轻吹打混匀，按传代比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；
4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞收货脱落
1)收集所有细胞悬液，1000rpm，离心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中，重悬沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min)；消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化；
3)经1000rpm，离心5min，丢弃上清，用5ml完全培养基重悬沉淀，接种于新的培养瓶内；
4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
5)原瓶内贴壁细胞按正常消化处理。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性，贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿（如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等）时，需要对实验器皿进行包被，以增强细胞贴壁性，避免细胞因没贴好影响实验；包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚赖氨酸PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%），依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
四、注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和澳睿赛技术部沟通；由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，详尽告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
5. 该细胞只可用于科研。
1)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
2)本产品未通过用于活体诊断的审核
备注：由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同，以上方法仅供各实验室参考
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
人支气管成纤维细胞信息由澳睿赛生物技术(上海)有限公司为您提供，如您想了解更多关于人支气管成纤维细胞报价、型号、参数等信息，欢迎来电或留言咨询。除供应人支气管成纤维细胞外，澳睿赛生物技术(上海)有限公司还可为您提供人肺动脉成纤维细胞、人子宫平滑肌细胞等产品，公司有专业的客户服务团队，是您值得信赖的合作伙伴。
工商信息
企业名称
澳睿赛生物技术(上海)有限公司
企业信息已认证
企业类型
有限责任公司(自然人投资或控股)
信用代码
91310000MA1H3QXJ7J
成立日期
2021-05-13
注册资本
人民币100.0000万元整
经营范围
一般项目:从事生物科技制域内的技术服务,技术开发,技术咨询、技术交流、技术转让,技术推广;工程和技术研究和试验发展,国学研究和试验发展;专用化学产品销售(不含危险化学品);仪器保表销售.鞋璃仪器销售;光学仪器销售;电子制量仪器销售;智能仪器仪表销售;企业管理咨询;软件开发;信息咨询服务(不含许可类信息咨询服务);市场营销策划;互联网销售(除销售需要许可的商品);数据处理和存销支持服务;办公设备耗材销售;计算机软硬件及辅助设备批发;第一美医疗器械销售;日用百货销售;电子元器件与机电组件设备销售;机械电气设备销售;电子产品销售;工程塑料及合成树脑销售;塑料制品销售;货物进出口,技术进出口(除依法须经批准的项目外,凭营业执照依法自主开展经营活动)。
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