医脉赛核酸提取或纯化试剂磁珠法石蜡包埋样品DNA提取试剂盒

本试剂盒用于石蜡包埋组织中基因组DNA的提取。试剂盒不使用二甲苯作为石蜡溶剂，从而增加操作人员和环境的安全性；经过独特的表面修饰的磁珠，结合核酸能力更强，洗脱更容易；操作步骤简单，适合于基因组DNA的磁珠自动化提取过程。本试剂盒纯化的DNA可直接用于各种下游操作，包括PCR、文库构建、测序分析等。 
操作流程（示意图）：

产品特性：

磁珠法石蜡包埋样本DNA提取试剂盒在肿瘤病人FFPE样本提取核酸的应用实例、与国际金标准试剂盒比较和通过石蜡包埋样本所提取的gDNA的real-time PCR实验验证提取效果的实例见下。
医脉赛（EmerTher）磁珠法石蜡包埋样本DNA提取试剂盒在肿瘤病人FFPE样本提取核酸的应用实例。
1.样本
四名肿瘤病人FFPE样本（3片10μm厚的石蜡切片组织样本/每人）
2.试剂
Emerther磁珠法石蜡包埋样本DNA提取试剂盒
3.核酸提取方法
EmerTher磁珠法石蜡包埋样本DNA提取试剂盒，用自动核酸提取仪提取
A、 脱蜡

1. 溶解蛋白酶K：按标签所示，吸取PK溶解液至蛋白酶K干粉中配制成蛋白酶K溶液20mg/ml，颠倒混匀数次让蛋白酶K充分溶解；

2. 取一定量石蜡包埋组织（如1-5片10μm厚的石蜡切片组织样本），转移至1.5ml离心管中；

3. 加入300μl石蜡样本液，150μl ATL和20μl蛋白酶K溶液，置于56°C 恒温水浴锅孵育1hr ，期间混匀3-5次。也可消化过夜；

B、消化

4. 在组织样本中加入150μl石蜡消化液，置于85°C恒温水浴锅孵育30min；

C、 DNA提取

5. 15000g离心5min；

6. 小心吸取全部下层液体，加入375μl裂解吸附液、30μl核酸提取磁珠，置于旋转混合仪，温和混匀20min；

7. 用磁分离架吸附磁珠1min，弃上清；

8. 加入700μl洗涤液I洗涤磁珠，颠倒混匀洗涤1min，吸附磁珠，弃上清；

9. 再次加入700μl洗涤液I洗涤磁珠1min，吸附磁珠，弃上清；

10. 加入700μl洗涤液II洗涤磁珠1min，吸附磁珠，弃上清；

11. 再次加入700μl洗涤液II洗涤磁珠1min，吸附磁珠；

12. 尽量吸弃上清后静置5min，去除乙醇残留；

13. 加入100μl洗脱液，50°C混合均匀洗脱5min；

14. 磁场吸附磁珠，回收含基因组DNA的洗脱液至另一干净离心管内；

15. 用于后续检测或-20℃储存。

4.结果：提取的DNA产量高、纯度高，方便进行下一步的PCR扩增。

磁珠法石蜡包埋样本DNA提取试剂盒与目前市场上国际金标准试剂盒的比较。

磁珠法石蜡包埋样本DNA提取试剂盒所提取gDNA的real-time PCR实验，用以验证医脉赛（Emerther）磁珠法石蜡包埋样本DNA提取效果。（石蜡包埋样本编号：1603089）

实验结论

包埋样本DNA提取试剂盒从5片石蜡样本切片中大约可以提取4微克genomic DNA。用所得gDNA做GAPDH的real-time PCR获得曲线较好，

且提取所得DNA的OD值（260/280）分别为1.81，1.90，说明所得DNA质量良好。由于该DAN提取试剂盒所提取的DNA量较多，且质量良好，证明试剂盒效果良好。