沉淀法miRNA分离试剂盒

沉淀法miRNA分离试剂盒

产品及特点 microRNA(miRNA)和 RNA 干扰研究是当今分子生物学研究的一大热 点，但快速分离和纯化相关的小 RNA 十分棘手，是目前研究 miRNA 的主要 技术障碍之一。目前国外相关产品寥寥无几，并且基本采用先提总 RNA 再富 集其中的小 RNA 的两步法策略，国内相关产品更是一片空白。为满 足广大用户的需求，开发了具有自主知识产权的本产品，它具有下列特点：

1. 从总 RNA 中直接分离纯化小 RNA，不需要使用离心吸附柱。得到的小 RNA 长度大部分在 200 nt 以下，包括 5S RNA、tRNA、 miRNA、 Pre-miRNA、pri-miRNA、siRNA、shRNA 和 snRNA 等。

2. 操作简单快速，整个过程只需要约 30 分钟。

3. 小 RNA 纯净，OD260/280 一般都在 1.9 以上。

4. 可用于 RT-PCR、miRNA 标记、microarray 等后续实验。

5. 此方法能去除 90%左右的大 RNA，但会有少量残留大 RNA，如果需要 纯度更高，可以选择 PAGE 回收法。

规格及成分：

运输及保存 常温运输.4℃保存，有效期一年。

自备试剂 RNase-free 塑料离心管。

使用方法

1. 在纯化好的 100 uL 总 RNA（含大 RNA 和小 RNA）中，加入 50 uL 溶液 A，振荡 30 秒混匀。如果 RNA 样品体积不足 100 uL，可以用 RNase-free 水补足，如果体积超过 100 uL，可以用本公司核酸浓缩剂 浓缩到 100 uL。

2. 室温 12000-15000 g 离心 30 分钟。小 RNA 在上清中，大 RNA 在沉 淀中。注意：离心时间不能短于 30 分钟，否则大 RNA 沉淀不充分。

3. 小心将上清液转移到干净的 1.5 mL RNase-free 塑料离心管中。留下的 沉淀可以用 75%乙醇洗涤后做大 RNA 电泳对照用。

4. 在上清液中加入 200 uL 溶液 B，振荡 30 秒混匀。

5. 室温 12000-15000 g 离心 10 分钟，小心弃上清。由于溶液 B 中有惰 性的助沉剂，所以得到的小 RNA 沉淀肉眼可见。 6. 加入 1 mL 溶液 C，震荡数秒。

7. 室温 12000-15000 g 离心 10 分钟，小心弃上清。

8. 短暂离心数秒，小心吸弃残留液体（约 50 uL 左右）。

9. 在沉淀中（含小 RNA）加入 30-100 uL RNase-free 水，吹打溶解即 得小 RNA 溶液。注意：不能只吹打管底部分，还需要吹打整个离心管管 壁的离心面部分，因为上面也有有小 RNA 沉淀。

10. 最好先 PAGE-银染检测小 RNA 纯度再使用。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！