土壤α-葡萄糖苷酶（S-α-GC）检测试剂盒 微量法

土壤 α-葡萄糖苷酶(S-α-GC)活性检测试剂盒说明书

微量法

注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。

规格：100T/48S

产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致

溶液的配制：

1、 试剂一：自备甲苯，2-8℃保存；

2、 试剂二：临用前取 1 瓶加入 5 mL 蒸馏水，充分溶解备用，用不完的试剂-20℃分装保存 4 周；

3、 标准品：5 mmol/L 的对硝基苯酚溶液。

产品说明：

 S-α-GC能够催化水解芳基或烃基与糖基原子团之间的糖苷键生成葡萄糖，是纤维素分解酶系中重要组成成分之一，在土壤微生物的糖类代谢方面具有重要生理功能。

S-α-GC能够催化对-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷生成对-硝基苯酚，后者在400nm有特征光吸收。

注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、恒温培养箱/水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、30-50目筛、研钵、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。

操作步骤：

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可参考文献）

新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干，过 30-50 目筛。

二、测定步骤

1、 分光光度计/酶标仪预热30min，调节波长至340nm，分光光度计蒸馏水调零。

2、 标准品：取20μL 5mmol/L的对硝基苯酚溶液，加入980μL蒸馏水，充分混匀，配制成100μmol/L标准液使用，现用现配。（实验中每管需要100μL，为减小实验误差，故配制大体积。）

3、 加样表：

三、S-α-GC 活力计算

注意事项：

若ΔA<0.01，可延长37℃水浴时间；若ΔA>1.5，可将上清液稀释后进行测定；最 后计算时注意各个因素的改变。

实验实例：

1、 取两管 0.02g 三叶草土，即为测定管和对照管，按照测定步骤操作，用 96 孔板测得计算 ΔA=A 测定管-A 对照管=0.421-0.238=0.183，ΔA 标准=A 标准管-A 空白管=0.473-0.047=0.426，计算酶活得：

S-α-GC 活力（U/g 土样）=0.444×ΔA÷ΔA 标准÷W=0.444×0.183÷ 0.426÷0.02=9.5366 U/g 土样。

2、 取两管 0.02g 林土样，即为测定管和对照管，按照测定步骤操作，用 96 孔板测得计算 ΔA=A 测定管-A 对照管=0.374-0.225=0.149，ΔA 标准=A 标准管-A 空白管=0.473-0.047=0.426，计算酶活得：

S-α-GC 活力（U/g 土样）=0.444×ΔA÷ΔA 标准÷W=0.444×0.149÷ 0.426÷0.02=7.7648 U/g 土样。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！