土壤酸性转化酶（S-AI）活性检测试剂盒 微量法

土壤速效钾含量检测试剂盒说明书

微量法

规格：100T/48S

产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致

溶液的配制：

1、 试剂一：自备，甲醛。

2、 工作液：临用前在 1 瓶试剂三 B 中加入 2.805mL 试剂三 A，充分溶解，现配现用，用不完的试剂 2-8℃保存一周（每瓶配好的工作液可做 37 管样本测定管试验）。

3、 标准液：20 μmol/mL 钾标准液。

产品说明：

速效钾是土壤中易被植物吸收利用的钾素，是表征土壤钾素供应状况的重要指标之一。及时测定和了解土壤速效钾的含量及其变化，对耕地地力评价及对指导钾肥的施用有着重要作用。

钾离子与四苯硼钠作用，形成不溶于水的白色四苯硼钾沉淀，产生的浊度在一定范围内与钾离子浓度成正比，通过检测其在 420nm 处的浊度来测定土壤速效钾的含量。

注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、振荡器、微量玻璃比色皿/96 孔板、研钵、30-50 目筛、甲醛（不允许快递）、蒸馏水。

操作步骤：

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

新鲜土样风干，过 30-50 目筛。按照土壤质量（g）：蒸馏水体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.2g土样，加入 1mL 提取液），振荡提取 1h，10000rpm，25℃离心 10min（若离心后上清中仍有杂质，建议将上清再次离心，至澄清），取上清液待测。

二、测定步骤

1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 420nm，分光光度计蒸馏水调零。

2、 临用前将 20 μmol/mL 钾标准液用提取液稀释至 1.2、1、0.8、0.6、0.4、0.3、0.2 μmol/mL 的标准液待测。

3、 标准液稀释可参考下表：

4、 在 EP 管或 96 孔板中进行以下操作（试剂一为有刺激性气味的有毒物质，建议以下试验在通风橱中操作）：

三、速效钾含量计算

注意事项：

1、 提取液刚从低温（4℃）条件取出会有晶体析出，震荡使其溶解即可。

2、 甲醛为有刺激性气味的有毒物质，建议本试验在通风橱中操作。

3、 当 A 测定大于 1 时，建议将样本用提取液稀释后再进行测定，计算时需在公式中乘以相应稀释倍数；当 A 测定小于 0.15 时，建议适当增加土壤样本质量或减少提取液重新提取后再进行测定。

实验实例：

1、取 0.2g 土样 1 加入 1mL 提取液，振荡提取 1h，取上清按照测定步骤操作，用 96 孔板测得计算 ΔA 测定=A 测定-A 对照=0.218-0.062=0.156，根据标准曲线 y=0.7128x-0.0301，计算 x =0.261μmol/mL，按样本质量计算速效钾含量得：速效钾含量(mg/kg 质量)=0.039x ÷W=0.039×0.261÷0.0002=50.895 mg/kg 质量。

2、取 0.2g 土样 2 加入 1mL 提取液，振荡提取 1h，取上清后按照测定步骤操作，用 96 孔板测得计算 ΔA 测定=A测定-A 对照=0.801-0.055=0.746。根据标准曲线 y=0.7128x-0.0301，计算 x =1.089μmol/mL，按样本质量计算速效钾含量得：速效钾含量(mg/kg 质量)=0.039x ÷W=0.039×1.089÷0.0002=212.355 mg/kg 质量。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！