尿素氮检测试剂盒微量法 微量法

尿素氮（BUN）含量检测试剂盒说明书

微量法

规格：100T/48S

产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致

溶液的配制：

1、 试剂一：临用前加 5mL 蒸馏水充分溶解，现用现配，4℃可保存一周。

2、 试剂三：临用前将 A 液倒入 B 液中混合，或者根据比例（A:B=1:4）现用现配。

3、 标准品：10 mg 尿素。临用前加入 4.66 mL 蒸馏水配制成 1 mg/mL 尿素氮标准液。

产品说明：

尿素（BUN）是人体蛋白质代谢的主要终末产物，BUN构成了血液中绝大部分的非蛋白质氮，血液尿素氮是肾功能的主要指标之一。用靛酚蓝比色法测定脲酶水解尿素产生的NH3-N，生成的蓝色靛酚和尿素氮的浓度成正比。

技术指标：

最 低检出限：0.00009 μg/mL

线性范围：0.78125-100 μg/mL

注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计/酶标仪、天平、研钵/匀浆器、低温离心机、微量玻璃比色皿/96孔板、恒温水浴锅。

操作步骤：

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

组织：按照质量（g）﹕蒸馏水体积(mL)为 1﹕5-10 的比例（建议称取约 0.1g，加入 1mL 蒸馏水），冰上匀浆后于 4℃，13000g 离心 15min，取上清待测。

细菌或细胞：按照细胞数量（10⁴个）﹕蒸馏水体积（mL）为 500-1000﹕1 的比例（建议 500 万个细胞加入 1mL蒸馏水），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3s，间隔 7s，总时间 3min）；然后 4℃，13000g 离心 15min，取上清置于冰上待测。

血清（浆）或其它液体：直接检测。

二、测定步骤

1. 分光光度计/酶标仪预热30min，波长调至630nm，分光光度计蒸馏水调零。

2. 将1mg/mL尿素氮标准液用蒸馏水稀释至25μg/mL备用。

3. 加样表：

三、计算公式

1. 按样本质量计算：

尿素氮含量（μg/g 质量）=ΔA测定÷ΔA标准×C标准品×V提取÷W=25×ΔA测定÷ΔA标准÷W

2. 按蛋白浓度计算：

尿素氮含量（μg/mg prot）=ΔA测定÷ΔA标准×C标准品×V提取÷（Cpr×V提取）=25×ΔA测定÷ΔA标准÷Cpr

3. 按细胞数量计算：

尿素氮含量（μg/10⁴ cell）=ΔA测定÷ΔA标准×C标准品×V提取÷细胞数量=25×ΔA测定÷ΔA标准÷细胞数量

4. 按液体体积计算：

尿素氮含量（μg/mL）=ΔA测定÷ΔA标准×C标准品=25×ΔA测定÷ΔA标准

C标准品：标准品浓度，25μg/mL；V提取：提取液体积，1mL；W：样本质量，g；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；细胞数量：以万计。

注意事项：

如果样本吸光值大于 1.5，建议将样本用蒸馏水稀释后进行测定。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！