蛋白浓缩试剂盒（浓缩柱法，0.5ml）

产品概述

蛋白浓缩试剂盒是采用蛋白浓缩离心管快速浓缩小量蛋白样品的试剂盒。 蛋白浓缩离心管是一种方便的蛋白浓缩工具，只需要离心操作即可以用来对蛋白质液体样本进行浓缩，还可以用于抗原、抗体、酶和微生物的浓缩纯化。也可以用来对蛋白质样品进行缓冲液置换。还可以用来分离蛋白质标记时未结合上的游离标记物。 蛋白浓缩柱使用蛋白质低吸附性的再生纤维素过滤膜制造，具有快速、方便、回收率高的特点，可替代并优于透析法及蛋白沉淀法的蛋白浓缩方法。可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、藻类、液体、土壤等各种不同样本的蛋白提取试剂盒。 可以提供针对细胞膜、核、胞质、线粒体、溶酶体、高尔基体、内质网、外泌体等细胞不同部位的蛋白提取试剂盒。 可以提供针对下游实验不同应用的试剂盒，例如用于Western Blotting和双向电泳等不同下游应用的试剂盒；含去垢剂成分和不含去污剂成分的蛋白提取试剂盒；专用于蛋白质谱检测、Pull-down实验的试剂盒等总计300多种蛋白提取试剂盒供选择使用。 还可以提供针对动物、植物等不同样本的细胞核、线粒体、溶酶体、叶绿体、外泌体等不同细胞器的提取试剂盒。 应用场景： 1.对稀释或从柱洗脱液预先纯化的蛋白质进行浓缩； 2.组织培养提取物或细胞裂解液中蛋白质组分的纯化； 3.生物样品浓缩：包括各种抗原、抗体、酶、微生物； 4.蛋白质缓冲液更换。

保存温度

2-8℃

注意事项

1.浓缩柱配有2个微量离心管。

2.在操作过程中，一个可用于收集滤出液，而另一个用于回收浓缩后的样本。

3.用过的浓缩管要保持过滤膜湿润，不能干掉。

有效期

一年

产品特点

1.高回收率 >90%；

2.垂直结构的膜减少了浓差极化，加快离心速度，快达 5 分钟；

3.热密封膜将下游溶出物污染可能性降到zui低；

4.100 % 完整性检测确保性能可靠；

5.透明外壳和体积刻度方便样品察看；

6.直接吸取样品减少处理步骤；

7.高浓缩倍数：高达80–100 倍

使用注意事项

1.不同的蛋白浓缩的速度不同，有的需要长时间离心，有的则很快就好。和蛋白样品纯度，所用buffer类型，蛋白的浓度有关系。离心时要先短些时间，观察一下浓缩速度；

2.如果需要多次重复使用，离心速度不要太高；

3.重复使用时要仔细检查管壁上有没有裂纹；

4.浓缩柱浓缩蛋白会有蛋白损失，样品体积大就分批离心，尽可能不要离心时间太长

5.样品里的杂质如果可能尽量在离心前去除一些。

6.分子量小于5kD的溶质可能只有部分被截留。2kD的样品截留率大约只有40%。目的蛋白小于5kD的样品不要使用浓缩管法浓缩。

7.浓缩液的样本回收率低可能是由于吸附损失、过度浓缩，或样本穿过滤膜而造成的。

8.吸附损失取决于溶质浓度、疏水性、与过滤浓缩管表面接触的温度和时间、样本成分及pH。为了zui大限度降低损失，离心后请立即回收浓缩后的样本。

9.如果样本的起始浓度很高，请监控离心过程，以免样本过度浓缩。过度浓缩会导致沉淀，这也可能带来样本损失。

10.样本有可能穿过滤膜，务必将每次的滤过液一直保留到浓缩的样品分析测试完成。

11.样品蛋白zui低起始浓度为25ug/ml。

12.加蛋白液或Buffer到浓缩管时，可以用蓝枪头；但从浓缩管底吸取浓缩好的目的蛋白时，必须用黄枪头；用枪头伸入浓缩管中时，必须防止碰到滤膜，以免戳破滤膜。

使用方法

产品规格参数：

初始样本的zui大体积：500ul

最终浓缩液的典型体积：15-20ul

建议的相对离心力：10,000 x g（浓缩离心）

1,000 x g（反转离心）

zui大的相对离心力： 12,000 x g

清洗浓缩管：

1. 用缓冲液或纯水进行预清洗。也可先用0.1 M NaOH清洗，再用缓冲液或纯水进行二次清洗。

2. 离心管中的过滤膜一旦润湿后应避免变干。如果在预清洗后不是立即使用，则让液体保留在滤膜上，直到使用。

蛋白样品处理:

1. 在500ul蛋白样品中加入5ul蛋白吸附抑制剂。充分混匀待浓缩。

2. 吸附抑制剂按照1/100加到待浓缩蛋白样品。

操作步骤：

1. 将内管插入所提供的一个微量离心管中。

2. 向内管中加入不超过500 ul的样本，并盖上盖子。

3. 将盖好盖子的浓缩管放入离心转子中，让盖子的连接带朝着转子的中央；用一个类似的离心管平衡。

4. 以2000-10000 x g离心约10-30分钟。

【注】：

务必将滤过液一直保留到浓缩的样品分析测试完成。

影响流速的因素包括样本浓度、起始体积、溶质的化学性质、相对离心力、离心转子的角度、滤膜类型以及温度。500ul样本的典型离心时间大约是10至30分钟。尽管大部分样本在离心开始后的前5至10分钟发生过滤，但在离心10至30分钟后才能达到zui低的浓缩液体积（15-20ul）。

5. 离心结束后将整个浓缩管从离心机中取出，取出内管。

6. 为了回收浓缩后的溶质，将内管倒过来插在另一个干净的微量离心管中。放在离心机中，让打开的盖子朝着转子的中央；用一个类似的离心管进行平衡。以1,000 x g离心2分钟，使浓缩后的样本从浓缩内管转移到收集管中。滤液可以保存在收集管中。

7. 将蛋白浓缩管清洗后用于浓缩其它蛋白样品。

清洗和保存：

1. 使用后用水冲洗干净；

2. 内管加入超纯水500μl，5000g离心5分钟；

3. 净内管中的水，加入500μl 0.1M NaOH，5000g离心20分钟；

4. 用0.1M NaOH 浸泡24小时；

5. 用水冲洗干净；

6. 用无菌水浸泡2-8℃保存。

7. 外管用自来水洗净后，用超纯水冲洗干净，晾干。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！