小鼠肾系膜细胞试剂盒的成分与生理结构及应用！

                   小鼠肾系膜细胞试剂盒的成分与生理结构及应用！

一、背景

小鼠肾系膜细胞试剂盒适用于分离培养小鼠的肾系膜细胞。小鼠肾系膜细胞试剂盒提供了的组织分离条件，分离单个细胞的效率高。此外，小鼠肾系膜细胞试剂盒还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系，可以程度地降低所培养的小鼠原代肾系膜细胞中成纤维细胞的含量。

小鼠肾系膜细胞细胞培养试剂盒适合于培养人的肾系膜细胞组织细胞。

二、小鼠肾系膜细胞试剂盒包含：

（1）小鼠肾系膜细胞组织解离液

（2）小鼠肾系膜细胞组织处理缓冲液

（3）小鼠肾系膜细胞成纤维抑制剂

（4）小鼠肾系膜组织洗液

（5）小鼠肾系膜细胞生长因子及血清

（6）小鼠肾系膜细胞基础培养基

（7）小鼠肾系膜组织预备液。

三、生理结构

肾小球系膜细胞又称间充质细胞、血管系膜细胞、球内系膜细胞、毛细血管间细胞或深部内皮细胞。肾小球系膜细胞是一种肾小球固有细胞，位于肾小球毛细血管袢之间，邻接内皮细胞或基底膜，形态不规则，细胞突起可深至内皮细胞和基底膜之间，或经内皮细胞之间伸入毛细血管腔内。肾小球系膜细胞具有分泌细胞基质、产生细胞因子、支撑肾小球毛细血管丛、吞噬和清除大分子物质以及类似平滑肌细胞收缩的功能。

肾小球系膜细胞呈星形，有多个突起，有丰富的细胞质。位于肾小球的中轴区，分布于毛细血管簇中的毛细血管之间。主要功能包括维持肾小球毛细血管网结构的完整性，调节肾小球滤过率，分泌多种细胞生长因子如转化生长因子β、血小板源性生长因子以及肾素等生物活性物质，从而发挥多种生物学功能。入球小动脉与出球小动脉在进出肾小球处与肾小球系膜细胞相连接，因此肾小球系膜细胞的收缩活动可增强小动脉的收缩作用，从而控制肾小球内血液分流。小鼠肾系膜细胞属于血管周细胞，位于肾小球毛细血管袢之间。其中，系膜细胞有多种生理功能包括和分泌系膜基质，胞吞和加工血浆大分子，通过系膜细胞收缩和分泌血管活性激素控制肾小球血流动力学。肾系膜细胞增生和基质的过多产生是多种肾小球肾炎的主要病理表现，如IgA肾病，狼疮性肾炎，糖尿病肾病以及在肾小球硬化过程中细胞外基质增加。在培养中细胞增殖和基质合成/降解是通过细胞因子和生长因子调控的，因此细胞培养是研究系膜扩张、瘢痕形成和肾小球硬化的理想方法。

虽然肾系膜组织机械韧性很强，但利用小鼠肾系膜细胞试剂盒中提供的肾系膜组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的薄的肾系膜组织片能使得肾系膜组织中肾系膜细胞的一些功能特性发生改变，从而将肾系膜细胞分离开来。

四、应用

小鼠肾系膜细胞试剂盒可以用于去泛素化酶CYLD对高糖诱导的小鼠肾系膜细胞NF-KB炎症信号的调控研究：

糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病特有而严重的微血管并发症,也是西方国家终末肾病(end stage renal defailure,ESRD)产生并最终依靠肾透析维持生命的主要原因。大量研究显示,在糖尿病肾病早期肾组织中即见到单核巨噬细胞浸润、核因子κB(NF-κB)等炎症因子产生增加,提示糖尿病肾病的发生发展与炎症有密切关联,而NF-κB在炎症反应中具有重要作用。在所有炎症反应中均可以发现NF-κB活性增高,当抑制其活性以后炎症的病理过程则被阻止。

泛素化修饰在对高糖诱导的NF-κB信号的活化中有重要调节作用。然而NF-κB信号的调节机制复杂,泛素化修饰是一个动态平衡过程,NF-κB信号通路也受到去泛素化修饰的调节。在众多调节NF-κB信号去泛素化酶中,去泛素化酶圆柱瘤蛋白(cylindromatosis,CYLD)是NF-κB信号的主要负性调控因子和炎症抑制因子之一。

通过观察高糖刺激后小鼠肾系膜细胞CYLD、总IKBα、p-IKBα、p-NF-κB p65、IKKγ、MCP-1、IL-6、IL-8表达变化,然后分别沉默和过表达CYLD基因,检测高糖诱导的NF-κB通路中总的IKBα、p-IKBα、IKKγ、p-NF-κB p65及下游炎症因子MCP-1、IL-6、IL-8的表达,探讨去泛素化酶CYLD在糖尿病肾病NF-KB信号通路激活中的调控作用。

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