检验技术分享：微生物实验室设备的控制和程序！

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设备控制和程序

微生物检验常用需监控的设备和仪器：

1、培养箱（生化培养箱或CO2培养箱等）、干燥箱、高压灭菌锅、净化工作台、pH计、冰箱，（低温冰箱或冷柜）温度计、紫外灯、显微镜、离心机、天平。

2、小计量容器

3、微生物测定仪器、微生物检定仪器、空气采样器、酶标仪专用等。

（一）高压灭菌锅的温度控制

高压灭菌锅：生物指示菌法（常用）、化学变色纸片及高压灭菌锅温度计等方法进行检测。

生物指示菌法是一种高压灭菌锅的效果显示法。

高压灭菌锅由专人按作业指导书操作，并做好每一次的作业记录。

高压灭菌锅使用时，内置物品不能太多，单位体积内的内容物（每瓶内的培养基）不能太多。同时应注意内容物不同耐受温度。总的暴露时间最好不要超过45min。

高压灭菌锅日常工作记录应包含以下信息：高压灭菌的材料、开始时间、压力/温度、取出时间、高压灭菌胶带的颜色变化（日常常用无菌培养代替）。

高压灭菌锅温度波动范围：110，115和121±2℃。

高压灭菌锅校准周期一般在半年。

（二）干燥灭菌箱温度控制

干燥灭菌箱日常工作记录中应包括以下信息：开始的时间、到达灭菌温度时的时间、取出的时间（或关闭时间）。

干燥灭菌箱的温度校准；用参考温度计进行温度测试。

干燥灭菌箱温度要求与精确度：160±5 ℃或180 ±5 ℃。前者为灭菌2h，后者为30min。

干燥灭菌箱校准时间一般为一年。

（三）培养基配制用蒸馏水的控制

对于蒸馏水器来说：按设备说明，定期清洁离子交换器和更换离子交换材料。

检测要求：西欧标准为微生物检验用蒸馏水的特定电导率＜0.5ms/m；细菌数＜50CFU/ml。我们的国家标准要求电导率≤25μS/cm，菌落总数不超过1000CFU/mL。

检测频率：1次/每月。

蒸馏水定点供应，并做好相应的质量控制，记录检测结果。

（四）天平的管理

天平放置要求：无振动、无气流影响及水平台面上。

天平要有使用及运行检查记录。

天平作为计量仪器是列入国家强制检定的范围，一般1次/年进行检定。

运行检查频率按运行计划或按产品（天平生产厂家）给出的标准重量单位进行对照。

（五）pH计

pH计使用前应用标准液进行校准。

缓冲液使用有效期：PH4.00 约6个月；

PH7.00 约6个月；

pH9.00 约6个月；

pH计的维护：电极外表的定期清洗；电极敏感性检测及极性恢复。

（六）净化工作台的控制

水平流净化工作台工作区域，要求洁净度为100级。空气沉降30min，细菌数＜1CFU/皿。垂直流净化工作台，细菌数＜0.49CFU/皿.

净化工作台运行检查频次：1次/月主要是细菌沉降检测。

净化工作台高效过滤膜一般为一年更换一次，并同时进行粒子与细菌沉降检测。

（七）紫外线灯的控制

检测方法：仪器测试法和生物测试法。前者是通过专用仪器检测紫外灯管发射的紫外光强度。国家消毒技术规范中表明在距离照射下方垂直1米处，要求其强度为大于90uW/cm2。

生物测试法：采用一定的菌培养物，经一定比例稀释，菌量控制在200-250个/0.5ml，涂布平板在紫外灯光下照射，2min，同时设置普通光源的对照组，后置37℃48h，计算其杀灭率。要求杀灭率达99%。

（八）显微镜的控制

显微镜应制定作业指导书，日常维护记录及自校记录。

显微镜应置于无振动，避免灰尘，防潮等要求的环境。

（九）其它微生物检测专用仪器的控制

细菌鉴定仪、酶标仪等设备，工作中常用阳性对照检测其功能正常性。

仪器的检定则按有关的部门检定或按自校作业指导书进行。

仪器的使用登记、校准计划、校准记录等文件存档。

仪器专人使用、操作者应取得相应的岗位培训合格，持证上岗。

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