甲基营养型芽胞杆菌的储存与培养及打管说明！

                    甲基营养型芽胞杆菌的储存与培养及打管说明！

甲基营养型芽胞杆菌是Bacillus属的微生物，原产地为中国。G+，菌体杆状，单个或“V”字型排列。菌落近圆形，表面光滑，边缘整齐，浅黄色。液体培养中度混浊，有沉落物。主要用途为研究，具体用途为产谷氨酸。

一、菌种简介

平台编号：Bio-58279

规格：冻干物

拉丁属名：Bacillus Methylotrophicus

中文名称：甲基营养型芽胞杆菌

拉丁名称：Bacillus methylotrophicus

模式菌株：否

其它保藏中心编号：=AS 2.1203

来源历史：←四川省食品发酵工业研究设计院（1.198）←无锡酶制剂厂←中科院微生物研究所

收藏时间：2005/12/20

原产国：中国

特征特性：菌落不规则，奶油色或褐色，菌表起皱，3-6mm(30℃培养3天)。细胞杆状，单个或成对，很少成链；鞭毛侧生，G+，产芽胞，形成抗热内生孢子，微碱，有机化能，兼性厌氧；还原石蕊牛奶，迅速消化酪素而凝快少；无精氨酸双水解酶，溶血作用可变，不产生卵磷脂酶，产生多肽抗菌素。产脂肪酶。产去乙酰头孢菌素乙酰木聚糖酯酶(cephalosporin deacetylating acetyl xylan ester

参考用途：生产脂肪酶。

生物危害程度：四类

致病对象：无

培养基编号：CM0050

培养基名称：营养肉汁加葡萄糖培养基(Nutrient Broth and Glucose Medium)

CM0050:蛋白胨 30.0g，葡萄糖 1.0g，牛肉膏 5.0g，NaCl 5.0g，琼脂 15g，蒸馏水 1.0L，pH7.2。

培养温度：30 ℃

需氧类型：好氧

用途：研究；生产；生产脂肪酶。

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）

二、储存条件

冻干菌种和试管斜面请置于 2-8℃冷藏。西林瓶菌种请置于-20℃冷冻。甘油请置于-80℃

三、培养条件

1、培养基编号： 营养肉汁加葡萄糖培养基(Nutrient Broth and Glucose Medium)

2、培养基成分：蛋白胨 30.0g，葡萄糖 1.0g，牛肉膏 5.0g，NaCl 5.0g，琼脂 15g，蒸馏水 1.0L，pH7.2。

3、需氧类型：好氧

4、培养温度：30℃

四、注意事项

1、菌种常规培养时间：细菌 1-2 天，酵母 3 天，霉菌 5-7 天，大型真菌 7-10 天。

2、试管斜面菌种请尽快转接，不建议长期存放。

3、初次使用时请按照本说明书推荐条件进行复活培养，如使用其它类型培养基或培养条件造成菌种不活等损失，我单位不负责任。

4、使用者应保证菌种的安全存储和操作，带菌废弃物应高压灭菌处理后丢弃。

5、菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降，应及时和微生物菌种查询网联系或更换新的菌种。

五、打管说明书

1、安瓿瓶开封：用浸过 75％酒精的脱脂棉檫试冻干管表面进行消毒，将管顶端于酒精灯外焰上均匀加热；立即滴 2-3 滴无菌水于加热部位，使管壁破裂；再用镊子或其他适宜工具敲下破裂处。

2、菌株恢复培养：用无菌吸管吸取 0.5ml 左右液体培养基(固体培养基去掉琼脂即可)于冻干管中将冻干菌粉全部溶解。将溶解后的菌悬液转移至盛有 4~5mL 液体培养基的试管中混匀，可将残留在吸管中 1-2 滴菌悬液转接至固体培养基上。将液体试管和斜面试管于推荐条件下静置培养。以液体培养结果为准。

3、注意事项：菌种活化前，请将安瓿管保存在 2-8℃的环境下，某些菌种经过冷冻干燥保存后处于休眠状态，延迟期较长，需要转接至 2-3 代恢复活力。

4、复苏后的菌种在传 1-2 代后使用。

5、暂不启开的安瓿管应于 4℃中保藏（特殊除外）。

6、冻干管打开后需一次用完，不能留存。

7、打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行，生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作，打管时冻干管应远离面部，保护眼睛。

8、打管操作应在烧杯或托盘上方进行，用完冻干管应灭菌处理后丢弃。

9、如若有菌种复苏不活或者污染等情况，请在收到后 2 个月内联系，逾期不予受理。

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