小不整球壳属的菌株培养与使用范围及保藏方法！

                   小不整球壳属的菌株培养与使用范围及保藏方法！

小不整球壳属是有性态产生子囊壳的一类真菌，属子囊菌亚门、核菌纲。主要用于教学，研究。

一、菌种简介

平台编号：Bio-85421

规格：冻干粉

拉丁属名：Plectosphaerella Sp.

中文名称：小不整球壳属

拉丁名称：Plectosphaerella sp.

来源历史：←分离

收藏时间：2014/9/9

原始编号：1

原产国：中国

资源归类编码：15151528000

模式菌株：非模式菌株

主要用途：研究

生物危害程度：四类

培养基编号：CM0014

培养基名称：马铃薯、葡萄糖琼脂培养基(PDA)

培养基成分：马铃薯提取液 1.0L，葡萄糖 20.0g，琼脂 15.0g，pH自然。[注] 马铃薯提取液：取去皮马铃薯200g，切成小块，加水1.0L煮沸30min，滤去马铃薯块，将滤液补足至1.0L。

培养温度：25℃

需氧类型：好氧

分离基物：空气

采集地：北京市朝阳区

保存方法：-80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法

共享方式：公益性共享；资源纯交易性共享；合作研究共享；资源交换性共享

提供形式：冻干物

用途：研究

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）

二、培养方法

1、培养基 乳酸菌培养基 Ⅱ:Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract (牛肉膏) 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐温) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸钠) 5g Diamine citrate (柠檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸馏水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃,15min。

2、传代方法 ①冻干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂轮在冻干管壁划两圈,掰断,用200μL无菌水或培养基充分溶解,平板涂布,活化培养。 ②斜面:试管口用75%酒精擦拭后,火焰灼烧,后用无菌接种铲切块,挑取接入平板或斜面,培养。

三、菌种具有两大功能

1、通过灌根可有效防治植物和真菌性土传病害,同时可使植物叶部的细菌和真菌病害明显减少；

2、对土传病害 ―― 植物青枯病具有很好的防治效果,在收获后期,对番茄、茄子、辣椒、烟草、马铃薯、罗汉果和生姜青枯病(姜瘟病)的田间防效可达 70 ~ -- %,*增产率达 493 %,甚至当对照高达 -- %时防效也是如此。对芋头软腐病、大白菜软腐病、辣椒 根腐病 、花卉根腐病、玉竹根腐病、沙参根腐病、番茄猝倒病、番茄立枯病以及辣椒疫病等土传病害也具有较好的。此外,多粘类芽孢杆菌对植物具,可使田间植株高度比空白对照区增加 10-30cm ;甚至在植物不发青枯病时,也可使植物的产量增加 27.5% ,且增产主要表现为收获前期。

四、菌种的使用范围

（1）产品仅用于科研合成培养基。合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。这种培养基的化学成分清楚，酿酒酵母菌组成成分精确，重复性强，而且微生物在这类培养基中生长较慢。如高氏一号合成培养基、察氏（Czapek）培养基等。

（2）天然培养基。由天然物质制成，如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤，前者用于培养霉菌，后者用于培养细菌。这类培养基的化学成分很不恒定，也难以确定，但配制方便，营养丰富，培养效果好，所以常被采用。

（3）半合成培养基。在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类，或在合成培养基的基础上添加某些天然成分，如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。

五、保藏方法

1、传代培养保藏法

又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等(后者作保藏厌氧细菌用),培养后于4-6℃冰箱内保存。

2、液体石蜡覆盖保藏法

是传代培养的变相方法,能够适当延长保藏时间,它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡,一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡,另一方面可阻止氧气进入,以减弱代谢作用。

3、载体保藏法

是将微生物吸附在适当的载体,如土壤、沙子、硅胶、滤纸上,而后进行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。

4、寄主保藏法

用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物,如病毒、立克次氏体、螺旋体等,它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代,此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。

5、冷冻保藏法

可分低温冰箱(-20-30℃,-50-80℃)、干冰酒精快速冻结(约-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。

6、冷冻干燥保藏法

先使微生物在极低温度(-70℃左右)下快速冷冻,然后在减压下利用升华现象除去水分(真空干燥)。有些方法如滤纸保藏法、液氮保藏法和冷冻干燥保藏法等均需使用保护剂来制备细胞悬液,以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害。

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