解藻酸弧菌的形态特征与培养方法及操作流程！

                   解藻酸弧菌的形态特征与培养方法及操作流程！

解藻酸弧菌是Vibrio属的微生物，原产地为中国香港。具有潜在的抗污损活性。主要用途为研究，具体用途为potential antifouling 潜在的抗污损活性。

一、菌种简介

平台编号：Bio-00172

提供形式：冻干物

拉丁属名：Vibrio Alginolyticus

中文译名：解藻酸弧菌

拉丁学名：Vibrio alginolyticus

原始编号：90

菌株来源：←美国University of California Davis

保藏人：Baumann

直接来源国家：美国

保藏时间：6/1/1982

其他保藏编号：=ATCC 33787

生物危害：四类

模式菌株：非模式菌株

菌株用途：琥珀酸丰富

培养温度：30℃

培养基：0223    

用途：琥珀酸丰富

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）

二、菌种的概念

原意是指孢子(相当于植物的种子) ,但在实际中,常将经过人工培养的纯菌丝体连同培养基质一同叫做菌种。

三、菌种的类型

在中根据菌种的来源,繁殖代数及目的,把菌种分为母种,原种和栽培种.分别叫一级种,二级种,三级种。

母种：将纯菌丝体或孢子在试管培养基中繁殖而成。可以繁殖原种,也适宜菌种保藏。

原种：母种菌丝在固体培养基上繁殖而成。这一过程增强菌丝对培养环境的适应性,又起到扩繁的作用，原种可以直接出菇。

四、培养方法

1、平板划线分离法:把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环圈在平板培养基表面,通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞,经培养后生长繁殖成单菌落。

2、稀释涂布平板法将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养,在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个菌落。

上述两种方法虽然都可以实现观察菌落特征的目的,但平板划线分离法不能对菌落计数,而稀释涂布平板法培养过程复杂,对平板的要求比较高,可参照以下步骤:

a、制备平板培养基将氯化钠蔗糖琼脂培养基加热溶化并冷却至65℃,向氯化钠蔗糖琼脂培养基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均匀,然后取20ml混合均匀的培养基溶液倒入培养皿,轻轻摇动培养皿,使培养基溶液均匀分布在培养皿底部,待培养基溶液凝固后即得平板培养基。

b、制备活性污泥混合液称取活性污泥土样15g,放入盛100ml无菌水并带有玻璃珠的三角烧瓶中,振摇15~20min混合均匀,用一支1ml无菌吸管从中吸取1ml土壤悬液加入盛有9ml无菌水的大试管中充分混匀,制成活性污泥混合液。

c、培养基涂布从活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培养基表面的中央位置,用无菌玻璃涂棒将活性污泥混合液沿同心圆方向轻轻地向外扩展,使之分布均匀。

五、操作流程

菌株复苏:(按三区划线法将留菌管内的原始菌株进行复苏)

1) 所有菌株,显色培养基分4区,每区一株,标明菌株号、菌种名常用缩写如下:

cal: 白念珠菌 cgl:光滑念珠菌 cpa: 近平滑念珠菌 ctr: 热带念珠菌 ckr: 克柔念珠菌 cne: 新型隐球菌,其他菌种标记全名

2) 隐球菌除传显色培养基以外,另传1/2块血平皿上述菌株统一37oC孵育48h

菌种鉴定:(48h后观察结果)

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