苏云金芽孢杆菌蜡螟亚种的特征特点与培养方法！

          苏云金芽孢杆菌蜡螟亚种的特征特点与培养方法！

苏云金芽孢杆菌蜡螟亚种是Bacillus属的微生物，原产地为中国。杆状、G+、在芽胞囊形成期形成椭圆形芽胞及伴胞晶体，好氧，中温，生化反应与蜡状芽胞杆菌大同小异，主要依据H血清学反应分血清亚种。兼性嫌气菌;在pH6的营养琼脂上生长；在含7%NaCl(W/V)的肉汤中生长；在含KCN的Brown培养基中生长；在柠檬酸培养基中不生长；在嫌气肉汤+葡萄。主要用途为分类；研究，具体用途为分类,水解木糖特性。 

一、菌种简介

平台编号：Bio-05041

规格：冻干物

拉丁属名：Bacillus Thuringiensis Subsp. Galleriae

中文译名：苏云金杆菌蜡螟亚种

拉丁学名：Bacillus thuringiensis subsp. galleriae

原始编号：3号

菌株来源：←中国科学院微生物研究所

直接来源国家：中国

保藏时间：9/1/1970

其他保藏编号

生物危害：四类

模式菌株：非模式菌株

菌株用途：杀鳞翅目昆虫

培养温度：37℃

培养基：0002    

提供形式：冻干物

用途：杀鳞翅目昆虫

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用

二、苏云金芽孢杆菌蜡螟亚种功效

1、分解出长石、云母等矿物中的钾、硅,也能分解出磷灰石中的磷,,具有溶磷、释钾和固氮功能,同时能在生长繁殖过程中产生有机酸、氨基酸、多糖、激素等有利于植物吸收和利用的物质。

2、本品在土壤中繁殖后,分泌植物生长刺激素及多种酶。

3、菌体内的钾在菌体死亡后,游离出来,又可被植物吸收利用。作为微生物肥料中的一种重要功能菌,可提高土壤速效钾、磷含量,提高作物产量和品质等多种效。

三、苏云金芽孢杆菌蜡螟亚种特征特性 

营养体:粗长杆状,两端钝圆,革兰氏染色反应不定,产生聚 β- *盐( PHB )颗粒。菌体大小为( 1.0 ~ 1.2 ) ×? ( 2.5 ~ 7.0 ) μm? ,菌体周围有厚荚膜。芽孢:壁厚,椭圆形,中生或近端生,芽孢囊不膨大或微膨大。菌落圆形,无色,隆起,胶质粘稠,透明或半透明,边缘整齐。好氧或兼性厌氧生长,水解淀粉,接触酶反应阳性,氧化酶和卵磷脂酶反应阴性,在无氮培养基上生长良好,生长温度 10?℃? ~ ?45?℃ 。

四、苏云金芽孢杆菌蜡螟亚种特点 

1、该菌具有解磷、解钾的功能。

2、具有活化土壤中硅、钙、镁中量元素作用。  

3、具有提高铁锰铜锌钼硼供应的功效。  

4、提高或延长肥效,减少化肥用量。  

5、提高作物抗逆性,预防或减轻病害。 

五、储存条件

冻干菌种和试管斜面请置于 6-10℃冷藏。 

六、培养条件

营养肉汁琼脂

蛋白胨 10.0 g 牛肉侵出物 3.0 g NaCl 5.0 g

琼脂 15.0 g 蒸馏水 1.0 L pH 7.0

七、苏云金芽孢杆菌蜡螟亚种的培养方法

1、平板划线分离法：把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环圈在平板培养基表面，通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞，经培养后生长繁殖成单菌落。

2、稀释涂布平板法将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落。

上述两种方法虽然都可以实现观察菌落特征的目的，但平板划线分离法不能对菌落计数，而稀释涂布平板法培养过程复杂，对平板的要求比较高，可参照以下步骤：

a、制备平板培养基将氯化钠蔗糖琼脂培养基加热溶化并冷却至65℃，向氯化钠蔗糖琼脂培养基中加入克林霉素溶液3～5ml并混合均匀，然后取20ml混合均匀的培养基溶液倒入培养皿，轻轻摇动培养皿，使培养基溶液均匀分布在培养皿底部，待培养基溶液凝固后即得平板培养基。

b、制备活性污泥混合液称取活性污泥土样15g，放入盛100ml无菌水并带有玻璃珠的三角烧瓶中，振摇15～20min混合均匀，用一支1ml无菌吸管从中吸取1ml土壤悬液加入盛有9ml无菌水的大试管中充分混匀，制成活性污泥混合液。

c、培养基涂布从活性污泥混合液中吸取0.2ml，滴在平板培养基表面的中央位置，用无菌玻璃涂棒将活性污泥混合液沿同心圆方向轻轻地向外扩展，使之分布均匀。

八、注意事项

1、菌种常规培养时间：细菌 1-2 天，酵母 3 天，霉菌 5-7 天，大型真菌 7-10 天。

2、菌种恢复培养前，建议将收到的菌种安瓿保存在 6-10°C 的环境下，某些菌种经过冷冻干燥保存后处于休眠状态，延迟期较长，如在说明建议的培养时间还未长起来，请继续在相应的环境下多培养 24 小时或者更长时间，直至菌种培养完成，有的菌种需要连续两次继代培养才能正常生长，一般来说菌种培养稳定后才能用于您的后续实验。

3、初次使用时请严格按照本说明书推荐条件和操作步骤进行复活培养，如使用其它类型培养基或培养条件造成菌种不活等损失，我单位不负责任。

4、恢复培养厌氧菌时，在操作过程中应严格控制厌氧条件：制作培养基时，应使用厌氧螺口试管，并利用高纯氮气去除试管和培养基中的氧气，使用者应保证菌种的安全存储和操作，带菌废弃物应高压灭菌处理后丢弃。

5、与菌种相关的其它信息请参阅微生物菌种查询网网站。