产气荚膜梭菌培养与储存及注意事项！

                产气荚膜梭菌培养与储存及注意事项！

一、菌种简介

平台编号：bio-61421

提供形式：冻干物

拉丁属名：Clostridium perfringens

中文名称：产气荚膜梭菌

属名：Clostridium

种名加词：perfringens

其它中心编号：=ATCC 13124

来源历史：←中国检验检疫科学研究院（23901）

收藏时间：2008.11.13

资源归类编码：15131711101

模式菌株：非模式菌株

主要用途：研究；分析检测

具体用途：研究、质量控制

特征特性：G+杆菌，精氨酸双水解酶阳性，卵磷脂酶阳性，脂酶阴性，尿素酶阴性，发酵葡萄糖、海藻糖、棉子糖，不发酵阿拉伯糖、木糖。专性厌氧，最适pH5.5~8.0。

生物危害程度：三类

致病对象：人畜共患

致病名称：肠胃炎

传播途径：经口、消化道

培养基：牛肉胰酶消化液 500.0ml，牛肉浸液 500.0ml，NaCl 5.0g，葡萄糖 5.0g，琼脂 1g，硫乙醇酸钠 0.5g，碎肉渣 10g，pH7.2～7.4。

培养温度：37℃

资源保藏类型：培养物

保存方法：真空冷冻干燥法

实物状态：有实物

共享方式：公益性共享；资源纯交易性共享；合作研究共享；资源交换性共享

用途：研究、质量控制，《GB 4789.13-2012产气荚膜梭菌检验》阳性对照菌株，《GB 4789.28 培养基和试剂的质量要求》标准菌株。

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用

二、储存条件

冻干菌种和试管斜面请置于 2-8℃冷藏。西林瓶菌种请置于-20℃冷冻。

三、培养条件

1、培养基编号：CM0121

2、培养基成分：牛肉胰酶消化液 500.0ml，牛肉浸液 500.0ml，NaCl 5.0g，葡萄糖 5.0g，琼脂 1g，硫乙醇酸钠 0.5g，碎肉渣 10g，pH7.2～7.4。

3、需氧类型：厌氧

4、培养温度：37℃

四、注意事项

1、菌种常规培养时间：细菌 1-2 天，酵母 3 天，霉菌 5-7 天，大型真菌 7-10 天。

2、试管斜面菌种请尽快转接，不建议长期存放。

3、初次使用时请按照本说明书推荐条件进行复活培养，如使用其它类型培养基或培养条件造成菌种不活等损失，我单位不负责任。

4、使用者应保证菌种的安全存储和操作，带菌废弃物应高压灭菌处理后丢弃。

5、菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降，应及时和微生物菌种查询网联系菌种。

五、西林瓶打管说明书

1、开封：用 75%酒精棉擦拭西林瓶外部，在安全柜内使用尖嘴钳去除塑料盖及铝盖，注意不要同时打开胶塞。缓慢开启胶塞，用 75%酒精棉消毒瓶口部分，使用无菌吸管注入 0.2ml适宜的液体培养基复溶冻干粉末。

2、菌株恢复培养：用无菌吸管吸取 0.5ml 左右液体培养基(固体培养基去掉琼脂即可)于冻干管中将冻干菌粉全部溶解。将溶解后的菌悬液转移至盛有 4~5mL 液体培养基的试管中混匀，可将残留在吸管中 1-2 滴菌悬液转接至固体培养基上。将液体试管和斜面试管于推荐条件下静置培养。以液体培养结果为准。

3、注意事项：菌种活化前，请将安瓿管保存在 2-8℃的环境下，某些菌种经过冷冻干燥保存后处于休眠状态，延迟期较长，需要转接至 2-3 代恢复活力。

4、复苏后的菌种在传 1-2 代后使用。

5、暂不启开的安瓿管应于 4℃中保藏（特殊除外）。

6、冻干管打开后需一次用完，不能留存。

7、打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行，生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作，打管时冻干管应远离面部，保护眼睛。

8、打管操作应在烧杯或托盘上方进行，用完冻干管应灭菌处理后丢弃。

9、如若有菌种复苏不活或者污染等情况，请在收到菌钟后 2 个月内联系，逾期不予受理。