甲型溶血性链球菌的培养方法与使用范围！

              甲型溶血性链球菌的培养方法与使用范围！

甲型溶血性链球菌（α-hemolytic streptococcus）是2019年全国科学技术名词审定委员会公布的感染病学名词。链球菌属菌种。菌落周围有1～2mm宽的草绿色溶血环，大多为条件致病菌。 

一、菌种简介

平台编号：bio-00006

规格：冻干粉

拉丁属名：α-Hemolytic streptococcus

菌株名称：甲型溶血性链球菌

培养基：血琼脂培养基（培养基 109）或适宜培养基。

培养条件：35~37℃，需氧

保存条件：常温,避光

批号：32213-8

用途：教学

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用

二、启开方法

1)复苏菌种前应准备各适于该菌种生长的固体、液体培养基和培养设备，所 有操作均应在合适的生物安全防护条 件下进行；

2)启开菌种宜采用锯开法(锯开前用 75% 酒精棉消毒菌种管外壁)。用吸管将液体培养基 0.5ml 左右注入被启开的菌种安瓿中并吹打，使安瓿中的冻干菌种溶解成菌悬液；

3)将上述菌悬液全部吸出，分别接种到固体斜面和液体培养基中，于 35~37℃培养箱中培养 18~24 小时；

4)次日观察菌种的生长情况，如菌种未生长，应继续培养至 72 小时；

5)复苏后的菌种按规定使用。

三、培养方法

1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种（一级种）、原种（二级种）和栽培种（三级种）三级。工业发酵的有用菌种，其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。

2、挑选具有某种能力的有用菌种，也称种子制备，是指菌种在一定条件下，经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。

3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备 菌种制备。

4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种，用无菌手续挑取少许，接入琼脂斜面培养基上，在25℃（或较高温度）下培养5～7天（或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子（对于霉菌类孢子制备，多数采用大米、小米之类的天然培养基）。

5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液，接种到扁瓶固体培养基上，于25～28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。

6、如果有些生产菌种不产孢子，如赤霉素产生菌或产孢子不多的，则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体，作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米浆），及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮，无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%～20%。

四、使用范围

（1）合成培养基。合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。这种培养基的化学成分清楚，组成成分精确，重复性强，而且微生物在这类培养基中生长较慢。如高氏一号合成培养基、察氏（Czapek）培养基等。 

（2）天然培养基。由天然物质制成，如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤，前者用于培养霉菌，后者用于培养细菌。这类培养基的化学成分很不恒定，也难以确定，但配制方便，营养丰富，培养效果好，所以常被采用。 

（3）半合成培养基。在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类，或在合成培养基的基础上添加某些天然成分，如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。 

五、注意事项

1、该菌种仅限用于实验室检验及研究用，不能用于商业用途。

2、如使用该菌种发表文章，应在文章中注明。

3、本中心仅对从本中心直接获取菌种的客户负责。