弯曲乳杆菌的培养方法与注意事项！

                 弯曲乳杆菌的培养方法与注意事项！

一、菌种简介

平台编号：bio-53341

提供形式：冻干物

拉丁属名：Lactobacillus paracasei

中文名称：类干酪乳杆菌

拉丁名称：Lactobacillus paracasei

来源历史：←乳品科学教育部重点实验室(1.0399)

收藏时间：2007/2/9

原始编号：128-2

原产国：中国

资源归类编码：15131319101

模式菌株：非模式菌株

主要用途：研究

特征特性：菌落中等，表面光滑有光泽，隆起整齐乳白色不透明；发酵果糖、葡萄糖、乳糖等；不发酵蔗糖、棉子糖、蜜二糖、阿拉伯糖、山梨糖、山梨醇、木糖；耐4%和6.5% NaCl；45℃生长。

生物危害程度：四类

培养基编号：CM0006

培养基名称：MRS培养基

培养基成分：酪蛋白胨 10.0g，牛肉膏 10.0g，酵母粉 5.0g，葡萄糖 5.0g，乙酸钠 5.0g，柠檬酸二铵 2.0g，Tween 80 1.0g，K2HPO4 2.0g，MgSO4.7H2O 0.2g，MnSO4.H2O 0.05g，CaCO3 20.0g，琼脂 15.0g，蒸馏水 1.0L，pH6.8。

*培养CICC 10774时pH需调至5.0.

培养温度：37℃

需氧类型：好氧

分离基物：酸奶子

采集地：内蒙古自治区

保存方法：真空冷冻干燥法

共享方式：公益性共享；资源纯交易性共享；合作研究共享；资源交换性共享

用途：研究

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用

二、培养基

MRS 培养基

酪蛋白胨 10 克 牛肉浸取物 10 克

酵母提取液 5.0 克 葡萄糖 20 克

乙酸钠 5.0 克 柠檬酸二胺 2.0 克

吐温 80 1.0 克 磷酸氢二钾 2.0 克

七水硫酸镁 0.2 克 七水硫酸锰 0.05 克

碳酸钙 20.0 克 琼脂 20.0 克

蒸馏水 1.0 升 PH 6.8

如果要配制液体培养基，则不用加入碳酸钙和琼脂

三、保藏条件

斜面菌种和冻干菌种应在 2-8°C 保存。西林瓶菌种请置于-20℃冷冻。 

四、注意事项

乳酸菌需要在比较厌氧的环境下培养

1) 首次活化，用尽量少的复水液溶解，接种在 5ml 的液体培养基中，静止培养，如有不明白之处，请务必先咨询我单位技术人员，避免不必要的损失；二次接种量要多，固体斜面培养基水分要少才能让菌体长得比较明显，液体培养要静止培养；

2）微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方，室温放置时间过长会导致菌种衰退；

3）菌种操作应在无菌条件下进行；转种完毕，应经灭菌再做丢弃处理；

4）应根据菌种状况及时转接，冻干菌种保藏时间通常为 2-25 年；

5）菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降，应及时和微生物菌种查询网联系。

五、单层冻干管打管说明书

1、安瓿瓶开封：用浸过 75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量（2-3滴）无菌水至加热顶端使之破裂，用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端并将冻干管开口处在火焰上过一遍，并保持在火焰旁操作。

2、注意事项：菌种活化前，请将安瓿管保存在 4-10℃的环境下，某些菌种经过冷冻干燥并抽真空保存的，开启后必须一次使用完，不能留菌粉下次使用；另外，安瓿管里大部分是用牛奶作为保护剂，里面菌体为少数，复苏时要全部菌悬液接在新鲜培养基上，否则可能造成复苏不成功；

3、冻干菌种经过冷冻干燥保存后处于休眠状态，有时延滞期较长，如在说明书建议的培养时间还未长起来，请继续在相应的环境下多培养 24 小时或者更长时间，直至菌种培养完成；有的菌种需要连续两次继代培养才能正常生长，一般来说菌种稳定后才能用于您的后续实验。暂不启开的安瓿管应于 4℃中保藏（特殊除外）。

4、冻干管打开后需一次用完，不能留存。

5、打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行，生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作，打管时冻干管应远离面部，保护眼睛。