具核梭杆菌聚核亚种的培养说明与注意事项！

              具核梭杆菌聚核亚种的培养说明与注意事项！

一、菌种简介

规格：冻干粉

拉丁属名：Fusobacterium nucleatum

中文名称：具核梭杆菌聚核亚种

拉丁名称：Fusobacterium nucleatum

来源历史：ATCC

原始编号：ATCC 25586

模式菌株：否

主要用途：AJ133496

生物安全级别：GR2

培养基编号：35

培养温度：37℃

培养时间：24-48h

需氧类型：严格厌氧

分离基物：病变物

采集地：**

保存方法：冷冻干燥管保藏

用途：用于一般细菌培养、转种、复壮、增菌等。

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用。

二、培养基

TSA+5%脱纤维蛋白羊血（血琼脂平板）

三、具核梭杆菌聚核亚种培养说明

培养基名称：营养琼脂（NA）

用途：用于一般细菌培养、转种、复壮和增菌等

成分(g/L)

蛋白胨               10.0

牛肉粉                3.0

氯化钠                5.0

琼脂                 15.0

pH值7.3 ± 0.1      25℃

用法：称取本品 33.0g ,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装三角瓶 ,121℃高压灭菌 15分钟,备用。

四、保藏条件

安瓿瓶冻干菌种应在 2-8°C 保存，活化好的菌种要放厌氧环境下保存。请勿长期置于室温。 

五、注意事项

1）冻干首次活化，干粉要全部用完，不能预留，参照“开管说明”，用无菌吸管吸取0.3ml-0.5ml 的培养液（即以上建议的培养基配方，不加琼脂）或者无菌水，滴入冻干管中，轻轻振荡至其溶解。吸取全部菌悬液，接种在培养基上（建议不超过 2 支平板，操作完毕尽快置于厌氧环境下恒温培养；若接种液体培养，制作液体培养液时，应使用厌氧螺口试管，并利用高纯氮气去除试管和培养液中的氧气）；

2）经过冷冻干燥保藏，菌种处于休眠状态，复苏培养时可能会延迟生长，这时需较长的培养时间； 若您收到的是已复苏的培养物（非冻干菌），则可以直接用于您的实验，或根据需要转接培养如有不明白之处，请务必先咨询我单位技术人员，避免不必要的损失；

3）微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方，室温放置时间过长会导致菌种衰退；

4）菌种操作应在无菌条件下进行；转种完毕，应经灭菌再做丢弃处理；

5）应根据菌种状况及时转接，冻干菌种保藏时间通常为 2-25 年；

6）菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降，应及时和微生物菌种查询网联系。

7）如若有菌种复苏不活或者污染等情况，请在收到菌钟后 2 个月内联系，逾期不予受理；

8）打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行，生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作，打管时冻干管应远离面部，保护眼睛。

9）安瓿瓶开封：用浸过 75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量（2-3滴）无菌水至加热顶端使之破裂，用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端并将冻干管开口处在火焰上过一遍，并保持在火焰旁操作。