菌种的保藏方式有哪些？

                         菌种的保藏方式有哪些？

营养体菌丝体保藏的菌种，营养生长不能很旺盛，生长速度不能非常快，培养基营养成分丰富，温度较高，生长速度快的菌种，衰老速度也快，衰老的菌丝作菌种保藏时，保藏后菌丝复活程度较差，生长势也不好，菌种容易退化。营养体保藏的菌种，培养基营养成分应略贫乏，含水量和培养温度应稍低些，这样，菌丝生长速度较慢，生长势也不会太旺盛，菌丝衰老速度也慢。今天小编主要为大家介绍几种菌种的保藏方式。

1、斜面菌种低温保藏

培养基：一般菌种用PDA培养基。葡萄糖18g，马铃薯（去皮）200g ，琼脂20g ，水1000ml，PH自然。特殊菌种用特殊培养基。

接种：接种保藏菌种用的菌种，菌丝应健壮。用前端的菌丝作接种材料。接种时要防止火焰高温、消毒药液对菌种的伤害。

培养：应以适宜温度或略低于最快生长温度的温度培养。蘑菇、香菇菌种应在22度左右温度培养，灵芝等高温菌种应在25度左右温度培养，培养时试管表面用8层厚的纱布或薄棉被覆盖，避光。

保藏菌种质量要求：菌丝生长整齐，菌丝长到培养基面积2/3时。

保藏方法：用牛皮纸或硫酸纸将试管棉花塞包好，放在清洁的小木盒中。木盒上注明菌种的名称、菌名、保存日期、经手人姓名，再放在4度中保藏。保藏菌种的冰箱不要经常开启，保持温度稳定。

2、斜面菌种液体石蜡油保藏

石蜡没保藏是用灭菌并除去水分的液体石蜡油灌入母种试管中，使菌体与空气隔绝，以降低其生命活动水平，并阻止水分散失的方法来保藏。石蜡油保藏，油层下氧含量低，菌丝呼吸水平极低，培养基营养消耗速度极慢，菌种不易老化、退化，可较长时间保藏。

石蜡油保存分石蜡油灭菌、脱水处理、灌石蜡油、封口等几个步骤。

3、基质培养基菌种的保藏

基质培养基保存是用原种、生产种的培养基保存菌种。基质培养中有丰富的迟效性养分，菌丝会分解培养基中复杂养分边利用生长。

培养基本方与正常原种相同，但培养料应稍坚实。培养料的含水量应比生产用培养料含水量低2%左右。培养基较坚实，含水量较低，可降低菌丝生长速率，降低培养基中空气含量、降低呼吸强度，从而延缓衰老。

4、蒸馏水保存

蒸馏水保存菌种的原理目前还不清楚，可能是食用菌菌丝细胞壁较坚牢，游离水不能大量进入菌丝细胞内；蒸馏水中无营养成分，因此菌丝新陈代谢极慢，从而延缓衰老。

蒸馏水也可用斜面菌种保存。保藏时，在超净台中，用接种钩、接种铲将斜面菌种切割成米粒大小，然后把米粒大小的斜面菌种称许在蒸馏水保藏管中，每管放7--8粒菌种，其余操作方法和液体菌球相同保藏。

5、液氮超低温保存

液氮内的温度为-196度，在-136度——-196度下，食药用菌菌丝生长、呼吸、新陈代谢处于完全停止状态，菌丝不会衰老，从而能使菌种保存很长时间而不退化。液氮超低温保藏菌种，需要有液氮罐、菌种保存管和保存液。常用PDA培养基菌种或麦粒培养菌种。保存容器可用冻存管或安瓿管。保种程序：（1）培养菌种（2）菌种中加入保存液（3）预冷（4）放入液氮罐

6、营养液保藏法

营养液配制：马铃薯汗约900ml，葡萄糖16g,磷酸二氢钾0.3g，硫酸镁0.15g，z后补加蒸馏水使总容积到1000ml。每一12mm×16mm的试管中灌入营养液5ml，用棉塞塞管口，在111kPa蒸汽压下灭菌40分钟。冷却后，在超净台中移入待保存的菌种，菌种在移入前，先用接种钩将其分割成绿豆粒大小，每管移入7--8粒，同时用灭菌过的软木塞或橡皮塞更换棉塞，然后放入4度左右冰箱中保存。保存期间菌丝还会微量生长，可在液面形成菌膜，并向管壁上方生长，一般可保存2--3年。

7、生理盐水保藏法

先在试管中加入生理盐水，用棉塞塞住管口，在152kPa蒸汽压下灭菌40分种。冷却后，在无菌箱中，将斜面菌种切割成绿豆粒大小，并移置灭过菌的生理盐水管中，每管放7--8粒。菌种放入生理盐水管中，每管放7--8粒。菌种放入生理盐水管中后，用灭过菌的软木塞或橡皮塞塞好管口，再放入4度左右冰箱中。该法可保存1年左右。

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