嗜热链球菌抑制法检测鲜乳中抗生素残留!
一、操作步骤
原理:检样经过 80 ℃杀菌后,添加嗜热链球菌菌液。培养一段时间后,嗜热链球菌开始增殖。这时候加入代谢底物 TTC,若该样品中不含有抗生素或抗生素的浓度低于检测限,嗜热链球菌将继续增殖,还原 TTC 成为红色物质。相反,如果样品中含有高于检测限的抑菌剂,则嗜热链球菌受到抑制,因此指示剂 TTC 不还原,保持原色。
二、检验程序
⒈活化菌种:取一接种环嗜热链球菌菌种,接种在 9 mL 灭菌脱脂乳中,36 ℃±1 ℃培养 12 h~15h 后,置 2 ℃~5 ℃冰箱保存备用。每15 d 转种一次。
⒉测试菌液:将经过活化的嗜热链球菌菌种接种灭菌脱脂乳,36 ℃±1 ℃培养 15 h±1 h,加入相同体积的灭菌脱脂乳混匀稀释成为测试菌液。
⒊培养操作:取检样 9 mL,置 18 mm×180 mm 试管内,每份检样另外做一份平行样。同时再作阴性和阳性对照各一份,阳性对照管用 9 mL 青霉素 G 参照溶液,阴性对照管用灭菌脱脂乳 9 mL。所有装有样品的试管置 80 ℃水浴加热 5 min,冷却至 37 ℃以下,加入测试菌液1 mL,轻轻旋转试管混匀。36 ℃±1 ℃水浴培养 2 h,加 4%TTC 水溶液 0.3 mL,在旋涡混匀器上混合 15 s 或振动试管保证液体与样品混匀。36 ℃±1 ℃水浴避光培养 30 min,观察颜色变化。如果颜色没有变化,于水浴中继续避光培养 30 min 作最终观察。观察时要迅速,避免光照过久出现干扰。
⒋判断方法:在白色背景前观察,检样呈乳的原色时,指示乳中有抗生素存在,为阳性结果。检样呈红色为阴性结果。如最终观察现象仍为可疑,建议重新检测。
三、报告
最终观察时,检样变为红色,报告为抗生素残留阴性。检样依然呈乳的原色,报告为抗生素残留阳性。
本方法检测几种常见抗生素的zuidi检出限为:青霉素0.004 IU,链霉素 0.5 IU,庆大霉素 0.4 IU,卡那霉素 5 IU。
北京百欧博伟生物技术有限公司拥有对菌种、细胞、培养基、配套试剂等产品需求者的极优质服务,对购买项目的前期资料提供,中期合同保证,后期货物跟踪到最终售后的确保项目准确到位,都有相关人士进行维护,确保您在中国微生物菌种查询网中获得z优质服务!也正因为此,北京百欧博伟生物技术有限公司与国内外多家研制单位、生物制药、第三方检测机构和科研院所院校、化工企业有着良好、长期和稳定的合作关系!
更多
小鼠肾小管平滑肌细胞试剂盒的知识与应用研究!
厂商
2024.08.09
食物中真菌毒素的危害及检测与预防方法有哪些?
厂商
2024.08.09
红酵母属的培养条件与生理特性及分布范围与影响能力!
厂商
2024.08.09
无血清培养基的特点与分类及应用领域与使用说明!
厂商
2024.08.09