大鼠子宫内膜上皮细胞提取物的应用！

                大鼠子宫内膜上皮细胞提取物的应用！

一、背景

大鼠子宫内膜上皮细胞提取物是从大鼠原代子宫内膜上皮细胞提取的，大鼠原代子宫内膜上皮细胞从正常大鼠子宫组织制备可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

二、生理结构及功能

子宫内膜上皮细胞是指构成哺乳类子宫内壁的一层，子宫内膜上皮细胞主要功能：（1）子宫内膜亦称子宫粘膜，是指构成哺乳类子宫内壁的一层。（2）子宫内膜对动情素和孕激素都起反应，因此可随着性周期（发情周期、月经周期）发生显著的变化。子宫内膜层（endometrium，uterine endome-trium）是指构成哺乳类子宫内壁的一层，对雌激素和孕激素都起反应，因此可随着性周期（发情周期、月经周期）发生显著的变化。

子宫内膜分为功能层和基底层2层。内膜表面2/3为致密层和海绵层统称功能层，受卵巢性激素影响发生周期变化而脱落。基底层为靠近子宫肌层的1/3内膜，不受卵巢性激素影响，不发生周期性的变化。雌激素可引起子宫肥大，孕激素可促使子宫内膜发生特殊的妊娠初期变化，或改变子宫内膜的性质，使之具有产生蜕膜的能力。 子宫内膜覆盖着粘膜，由粘膜上皮与其下方的固有层所组成。粘膜上皮为柱状上皮、立方上皮或复层柱状上皮，雌激素分泌时，各上皮细胞将长大、分裂使数目增多。固有层中粘膜上皮下方的部分称为机能层，上皮细胞进入其中形成子宫腺，并对雌激素起反应。机能层的下层称为基底层，富有血管。

三、应用

大鼠子宫内膜上皮细胞提取物可用于粒细胞集落刺激因子对大鼠薄型子宫内膜治疗的初步研究

粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对大鼠薄型子宫内膜的治疗作用及其可能的机制。方法取性成熟未交配雌性具有规律动情周期的SD大鼠36只,采用宫腔内保留灌注无水乙醇5分钟建立薄型子宫内膜大鼠模型,随机分为4组：

①急性损伤治疗组：于模型制备后立即皮下注射生理盐水(NS)稀释的G-CSF(40μg/kg/d),连续5d；

②急性损伤对照组：于模型制备后立即皮下注射等量NS,连续5d；

③慢性损伤治疗组：于模型制备3个动情周期后皮下注射NS稀释的G-CSF(40μg/kg/d),连续5d；

④慢性损伤对照组：于模型制备3个动情周期后皮下注射等量NS,连续5d。均于注射G-CSF或NS后的第4个动情期处死大鼠,取双侧子宫组织行苏木精-伊红(HE)染色观察子宫内膜形态学改变(测量子宫内膜厚度),免疫组织化学方法检测子宫内膜单位面积中细胞角蛋白和波形蛋白的表达。

结果1.急、慢性损伤对照组子宫内膜形态学均表现为薄型子宫内膜。与此相比,急性损伤治疗组子宫内膜明显增厚,表面呈波浪形,腺上皮及腔上皮细胞完整,呈立方状,腺体数目稀少,部分管腔囊性扩张,间质疏松,新生毛细血管数目明显增多；慢性损伤治疗组子宫内膜厚度增加,但不及急性损伤治疗组,表面略可见波浪形,腺体数目无变化,间质疏松,新生血管数目增多。

波形蛋白主要表达于间质细胞和少量内皮细胞中,以此反映间质细胞再生长情况。四组单位内膜面积中波形蛋白面积依次为：13.40±0.63%、7.27±0.48%、12.86±0.71%、7.30±0.53%,各治疗组与相应对照组间比较差异具有统计学意义(P<0.01),两治疗组比较差异有统计学意义(P<0.05),两对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。

结论1.宫腔内保留灌注无水乙醇5分钟经过约7个动情周期(约28-35天),子宫内膜仍表现为薄型,进一步证实薄型子宫内膜大鼠模型的可重复性和稳定性。2.G-CSF对子宫内膜的急性损伤和慢性损伤均具有一定的治疗作用,但对急性损伤的治疗效果佳,可能与间质细胞增生和血管新生有关。

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