2XLAMP MagicMix(原通用型LAMP试剂盒），含示踪染料

2XLAMP MagicMix(原通用型LAMP试剂盒），含示踪染料

Basic LAMP Amplification Kit

产品及特点 本产品是 2×LAMP MagicMix（无色），可以用于 LAMP 等温扩 增，LAMP 即Loop-Mediated Isothermal Amplification（环介导等温扩 增），是 2000 年才出现的一种新颖的等温核酸扩增方法。它利用 4 条模板专一 的特异引物和具有链置换能力的 DNA 聚合酶，在等温条件下(63℃左右) 30－ 60 分钟完成扩增。该技术在灵敏度、特异性和检测范围等指标上能媲美甚至优 于 PCR 技术，同时还不需要模板的热变性、温度循环、等过程。目前已成功应 用于人类及动植物、细菌、病毒、寄生虫、真菌等病原体的快速检测。本试剂 盒具有下列特点：

1. 即开即用的 2×LAMP MagicMix，无色。

2. 高特异性，由于同时使用 4-6 条特异引物，所以特异性比 PCR 更高。

3. 高扩增效率，扩增效率可达到 10E9-10E10，比PCR 灵敏一个数量级，可检测到单拷贝的 DNA 分子

4. 65℃左右等温扩增，可以不需要贵重的热循环仪。

5. 即开即用，包含了除引物和模板 DNA 外的所有成份，十分方便。

6. 本试剂盒足够 50 次 20uL 体系的 LAMP 扩增。

7. 提供扩增对照，便于在遇到困难时分析原因。

8. 本产品只能用于科研，不能用于临床。

运输及保存 低温运输，-20℃保存，有效期一年。

自备试剂 LAMP 模板、LAMP 引物、自备可见光染料 

使用方法 1. 制备模板DNA：选用合适的方法制备模板DNA。

2. 配制自备的5×LAMP引物混合液。

先加超纯水或自备TE缓冲液将自备的下列6种（或4种）引物干粉稀释到母 液浓度，然后在一新的离心管中按表中所列体积加入各种引物母液和超纯 水，最后得到1mL的5×LAMP引物混合液，此混合液足够250次20uL体系 的LAMP扩增。如果需要配制的5×LAMP引物混合液体积异于1mL，则各 成分的用量请按比例调整。引物混合液可以在-20℃放置2年。

3. 在冰上融化2×LAMP MagicMix，混匀，稍离心。如果有N个样品，则在 N+2个反应管中加入以下组份：

成份 样品管 LAMP 阳性对照 LAMP 阴性对照 2×LAMP MagicMix（无色） 10 uL 10 uL 10 uL 自备 5×LAMP 引物混合液 4 uL 不加 4 uL 自备模板 DNA 1-100ng 不加 不加 LAMP 阳性对照模板-引物混合物 不加 4 uL 不加 补自备超纯水到 20 uL 20 uL 20 uL

注意：此步可加入自备的各种LAMP可视化染料，这样反应结束后可以根据 反应液的颜色变化或实时荧光强度变化来判断是否有扩增，不需要开盖，避 免污染。如果加入了荧光染料，则需要在荧光定量PCR仪上进行反应和实时 检测。

4. 混匀，置于63℃保温60分钟。如果是在PCR仪中保温，必须加热盖。如 果用金属浴或水浴保温，没有热盖，必须覆盖50uL的石蜡油，否则保温 期间反应体系的水分会蒸发，影响反应效率。

5. 产物取扩增产物5 uL上样，进行2-3%的琼脂糖凝胶电泳，可见LAMP特 征性电泳图谱。

6. 结果分析：如果本试剂盒提供的阳性对照-引物混合物能够扩增而阴性对照 不能扩出，则实验有效。如果阳性对照-引物混合物没有扩增出条带，则试
剂盒的问题，请跟厂家联系。如果阴性对照（水作为模板）有扩增出条带， 则说明LAMP样品或试剂有过去的扩增产物的污染，需要注意操作的规范 性，如果不能解决，可以重新设计引物扩增新的靶片段。也可以使用不需要 开盖的2×可视化LAMP MagicMix。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！