通用型全基因组扩增试剂盒(WGA)

通用型全基因组扩增试剂盒(WGA)

Universal Whole Genome Amplification Kit

本产品是用于一管式双链cDNA合成的试剂盒。cDNA第一链合成的原理是以OligodT为通用引物的、MMLV催化的逆转录反应。其原理如下：
本产品是用于基因组DNA扩增全基因组的试剂盒，可以方便、简单、快速、经济的得到稳定产量的基因组DNA扩增样品。

产品特点：
1.基于phi29 DNA聚合酶的高保真性、高合成率和超强链取代能力。
2.可以扩增基因组达上万倍，具有高产量和高保真性的特点。
3.可使用各种来源的样品，包括全血，干血，发根，口腔粘膜刮液培养细胞，真菌和病毒等。
4.操作简便快捷，恒温(30℃)反应，无须PCR仪即可实现扩增。
5.产物可用于多种后续试验，包括多重PCR、长片断PCR、定量PCR、克隆、文库构建、单倍型分析、测序、基因芯片分析、各种遗传分析(片段差异，微卫星差异，SNP，STR)等。

试剂盒组成：

储存条件：低温运输、-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
本产品适用于纯化好的基因组DNA。

1.在PCR塑料管中加入1μL纯化好的基因组DNA，用量在100pg-100ng之间。可以同时做一个不加DNA模板的阴性对照。
2.在PCR管中依次加入2.5μL WGA溶液A，1μL WGA溶液B，超纯水4.3μL，轻柔吹打混合均匀(现在PCR管中总体积为8.8μL)。
3.95℃保温3～5分钟，室温短暂离心半分钟，然后冰上放置15分钟。
4.然后依次向上述反应液中加入0.5μL dNTP，0.2μL BSA，0.5μL Phi 29 DNA聚合酶(10U/μL)，轻柔吹打混合均匀。
5.30℃保温3-12小时。最好使用PCR仪进行30℃保温并打开热盖保温。如果采用30℃水浴，最好在样品管中加入30-50μL石蜡油以防水分蒸发，因为30℃长时间的水浴也能使水分蒸发到管壁，从而改变反应体系中各成分的浓度、降低WGA反应效率。如果模板DNA量比较高，WGA三小时即可检测到DNA扩增。
6.65℃保温10分钟使phi29 DNA聚合酶灭活。注：由于phi29 DNA聚合酶有DNA外切活性，所以最好将其灭活以免干扰后续反应。
7.立即取3μL WGA反应液进行电泳检测扩增效果。注意：WGA缓冲液中不含有甘油和电泳染料，所以需要先加上样缓冲液。
8.扩增的DNA可以用于后续试验或冰箱长期保存。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！