赛默飞紫外分光光度计在DNA分子熔点测量的应用

赛默飞紫外分光光度计在DNA分子熔点测量的应用

简介

Melting Temperature 的缩写，熔解温度，即DNA分子的熔点。将DNA加热到一定温度时，DNA的双螺旋就会发生裂解，DNA碱基互补的主要作用力氢键结构将被破坏，在紫外光谱中表现为260nm处吸光度的增加。通常将 DNA的变性达到50%时，即增色效应达到一半时的温度称为DNA 的解链温度，也称 DNA 的熔点，简写为Tm。

方法原理

DNA熔点测定实验可以测得DNA的熔点，该实验过程以温度为横坐标，以260nm处的吸光度值为纵坐标作图得到的曲线称为热变性曲线，当到达熔点温度Tm时，有 50%DNA由双链改变为单链。

分析步骤

本实验配置的DNA溶液，从63℃升温至 95℃，每隔15 秒测定该样品在260nm处的吸光度值，并以温度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制热变性曲线。

           图1：Insight 测定Tm值软件界面

赛默飞世尔解决方案

Thermo Scientific™ Evolution 200系列及350紫外可见分光光度计优异性能，无论您是在检测DNA/RNA序列，还是双链或三螺旋序列，均可满足您的实验需求。

•      双光束光学设计可同时测量参比和样品

•      可变带宽以及可选配满足 21 CFR Part 11要求的安全软件

•      确切获得瞬间数据可为快速混合动力学测量提供最高的精确度

•      通过使用0°C- 100°C帕尔帖单样品池架或者帕尔帖8联池系统并使用斜率为0.4 - 20°C /min的多级加热/冷却曲线精确控温，用于DNA熔解和Tm计算

•      使用软件内置拟合算法自动计算不同熔解曲线的Tm值

本实验利用赛默飞世尔科技的 Evolution260 紫外可见分光光度计进行 Tm值检测，操作简单，快捷，实验结果准确，为客户提供完美解决方案。根据您的需求，我们同时有更多型号可供选择。

帕尔贴单池及 8-联池温控系统

Evolution200系列紫外可见分光光度计

Evolution350紫外可见分光光度计