G418,是一种与庆大霉素相关的氨基糖苷类抗生素,常用作真核细胞的筛选。作为硫酸新霉素的类似物,G418在真核细胞中干扰80S核糖体的功能以及蛋白质的合成。
显性作用的抗性基因(neor)的表达可筛选包含转座子Tn601(903)或Tn5的哺乳动物表达载体。当表达抗性的哺乳动物细胞在含有G418的培养基中生长时,约10-14天内产生稳定的菌落。
形态:白色粉末
融点:138~144℃
溶解性:溶于水、甲醇
CAS:108321-42-2
分子式 : C20H40N4O10·2H2SO4
分子量 :692.71
比旋: 104-121℃
水分: ≤10%
吸光值: ≤0.015 (280nm,1mg/ml), ≤0.1 (570nm, 100mg/ml)
储运:室温下运输, 干粉在室温下储存,溶于水、甲醇,溶液于-20℃储存。
1、提供纯度>90%(HPLC)的产品,与其他低浓度G418产品相比,使用量更低,更有利于细胞生长
2、效价>700ug/mg
3、严格控制ED50值,保证各批次的一致性
由于各真核细胞系对G418敏感度不同,需通过实验确认各新细胞系或细胞株稳定转染时杀死非稳定转染细胞所需用量。
最适用量通过建立细胞死亡曲线获得。将细胞稀释至1000cell/ml,每孔100ul加入有培养基的24孔板,将每孔中的G418浓度稀释至0,100,200,300,400,500,600,700,800,900,1000,1100ug/ml等12个级别, 培养10-14天,以最低细胞全部死亡浓度为基准,一般400-800ug/ml左右,筛选时比该浓度再高一个级别,维持时使用筛选浓度的一半即可。
细胞系或机体 | G418浓度(ug/ml) |
---|---|
中国仓鼠卵巢细胞 | 700-800 |
Madin-Darby犬肾细胞 | 500 |
人上皮A431细胞 | 400 |
猿CV-1细胞 | 500 |
盘基网柄菌属 | 10-35 |
植物 | 10 |
酵母 | 125-500 |
产品号 | 产品名称 | 规格 | CAS | 包装 |
---|---|---|---|---|
G274348 | G418硫酸盐 | 超纯级 | 108321-42-2 | 1g,5g |
G110917 | G418硫酸盐 | potency≥650μg/mg | 108321-42-2 | 250mg,1g,5g |
G301863 | G418溶液 | 25mg/ml,无菌 | 108321-42-2 | 1mL |
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