人纤维母细胞表面抗原(FSP)elisa试剂盒
试验原理:
ELISA检测试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知待测物质浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将待测物质和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中待测物质的浓度呈比例关系。
试剂盒组成:
标本收集与试剂准备:
1. 血清、血浆样本收集应使用一次性的无热原,无内毒素试管(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝均可),血清、血浆避免使用溶血,高血脂标本,标本悬浮物应离心去除,使标本清澈透明。待测样本应尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-80℃)保存,避免反复冻融。
2. 洗涤液配置:用蒸馏水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的蒸馏水)
3. 标准品配制:取7个1.5ml离心管,分别标注1/2,1/4,1/8,1/16,1/32,1/64,blank。从第壹至七管中分别加入标准品/样品稀释液200ul。在第壹管中加入标准品溶液200ul,置于漩涡混合器上混匀后用加样器吸出200ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第六管中吸出200ul弃去,第七管为空白对照。
4. 生物素化抗体工作液配置:使用前20分钟,用生物素化抗体稀释液将100×生物素化抗体稀释成1×工作液,根据所需用量配置,当日使用,剩余弃之。
5. TMB显色液的配置:使用前10分钟,将TMB显色液A液和B液1:1混合,避光放置备用。
6. 如果您检测的样本中靶蛋白浓度高于标准品最糕值,建议重新检测,请根据实际情况,适当倍数稀释(建议做预实验,以确定稀释倍数)
操作步骤:
1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为72 pg/mL,48 pg/mL ,24pg/mL,12 pg/mL,6 pg/mL)。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
公司正在出售的产品:
牛新包虫抗体ELISA试剂盒 | PerCP-Cy5.5标记人CD117 (c-kit)单克隆抗体 |
牛雄烯二醇(AED)ELISA试剂盒 | PerCP-Cy5.5标记人CD11b单克隆抗体 |
牛雄烯二酮(ASD)ELISA试剂盒 | PerCP-Cy5.5标记人CD123单克隆抗体 |
牛嗅素4(OLFM4)ELISA试剂盒 | PerCP-Cy5.5标记人CD127 (IL7R)单克隆抗体 |
牛血管活性肠肽(VIP)ELISA试剂盒 | PerCP-Cy5.5标记人CD13单克隆抗体 |
牛血管紧张素转化酶(ACE)ELISA试剂盒 | PerCP-Cy5.5标记人CD14单克隆抗体 |
牛血管内皮生长因子C(VEGFC)ELISA试剂盒 | PerCP-Cy5.5标记人CD15单克隆抗体 |
牛血管内皮生长因子受体3(VEGFR3)ELISA试剂盒 | PerCP-Cy5.5标记人CD200单克隆抗体 |
牛血管内皮细胞生长因子165(VEGF165)ELISA试剂盒 | PerCP-Cy5.5标记人CD235a (GYPA)单克隆抗体 |
牛血管内皮细胞生长因子C(VEGFC)ELISA试剂盒 | PerCP-Cy5.5标记人CD23单克隆抗体 |
牛血管生成素1(ANGPT1)ELISA试剂盒 | PerCP-Cy5.5标记人CD24单克隆抗体 |
牛血管生长素(ANG)ELISA试剂盒 | PerCP-Cy5.5标记人CD25单克隆抗体 |
人纤维母细胞表面抗原(FSP)elisa试剂盒牛血清白蛋白(ALB)ELISA试剂盒 | PerCP-Cy5.5标记人CD26单克隆抗体 |
牛血清淀粉样蛋白A(SAA)ELISA试剂盒 | PerCP-Cy5.5标记人CD279 (PD-1)单克隆抗体 |
牛血清素/血清胺(ST)ELISA试剂盒 | PerCP-Cy5.5标记人CD27单克隆抗体 |
人纤维母细胞表面抗原(FSP)elisa试剂盒信息由上海抚生实业有限公司为您提供,如您想了解更多关于人纤维母细胞表面抗原(FSP)elisa试剂盒报价、型号、参数等信息,欢迎来电或留言咨询。除供应人纤维母细胞表面抗原(FSP)elisa试剂盒外,上海抚生实业有限公司还可为您提供人纤溶酶抗纤溶酶复合物(PAP)elisa试剂盒、人纤维蛋白溶酶(PL/Fbn)elisa试剂盒、人纤维连接素相关抗原(FRA)elisa试剂盒等产品,公司有专业的客户服务团队,是您值得信赖的合作伙伴。