培养基移种操作方法

2023/10/18 10:42

阅读：44

应用领域：

生物产业

发布时间：

2023/10/18

检测样品：

其他

检测项目：

培养基移种

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参考标准：

方案摘要：

液体培养基移种技术用于纯种细菌的增菌及观察细菌在液体环境中的生长特征(混浊生长，表面生长或沉淀生长)

产品配置单：

所需试剂

支原体固体培养基使用说明

型号： 250g

产地：

品牌：远慕

¥1

参考报价

N6培养基维生素溶液

型号：电询

产地：

品牌：远慕

面议

参考报价

方案详情：

一、斜面培养基移种技术

(1)材料

琼脂斜面培养基

经分离培养的平板培养物。

(2)方法

①在琼脂斜面培养基试管上部标明移种的菌名(或编号)、接种日期、接种者的组别及代号。

②左手持长有细菌的平板底，右手持接种环。接种环在火焰上灭菌冷却后，沾取平板划线上发育良好的孤立菌落。把平板放回原处，立即用此手取斜面培养基斜持，用右手小指与手掌夹持棉塞，轻轻转动后拨出棉塞，管口通过火焰灭菌。

③将已沾菌的接种环伸入斜面培养基的管底部的凝固水，沿斜面培养基的表面从底向上划一直线，然后再从底部向上划连续曲折线；也可不划直线只划曲折线。取出接种环，管口通过火焰灭菌，塞好棉塞，放试管架上，接种环火焰灭菌后放下。

向斜面培养基上移种的细菌如果是生长在斜面培养基上的，或是生长在液体培养基中的，则用左手同时斜持菌种管和斜面培养基两个管，右手无名指、小指手掌同时拔起夹持二个棉塞。管口及接种环先经火焰灭菌后，从菌种管取菌立即移种到斜面上，塞好棉塞，接种环火焰灭菌后放下。然后将斜面培养基放37℃恒温箱中培养24h。结果斜面表面形成菌苔。

二、液体培养基移种技术

用于纯种细菌的增菌及观察细菌在液体环境中的生长特征(混浊生长，表面生长或沉淀生长)

(1)材料

肉汤培养基

斜面培养物(大肠埃希菌、化脓性链球菌、枯草芽胞杆菌)

(2)方法

①取接种环在火焰上灼烧灭菌、冷却。

②以“双管移植法”左手持细菌斜面培养物和肉汤培养基两支试管，右手持接种环，按无菌操作法取少量细菌，将沾菌的接种环在斜倾的接近液面的管壁上轻轻涂抹研匀，试管直立使沾附在管壁上的细菌没入液体中，接种后放37℃恒温箱中培养。

(3)结果

①浑浊生长大肠埃希菌菌液呈均匀混浊，管底有少量沉淀。

②沉淀生长化脓性链球菌菌液管底有沉淀，菌液无明显浑浊。

③菌膜生长枯草芽胞杆菌菌液表面形成膜状物。

三、半固体培养基移种技术

用于保存菌种及间接检查细菌有无动力。

(1)材料

半固体培养基。

细菌斜面培养物。

(2)方法

①将接种针经火焰灭菌冷却后，从斜面培养物表面沾取细菌。

②用无菌法穿刺接种，将接种针刺入半固体培养基正中央，深度达距管底0.5cm处停止，然后循原路退出。注意在刺入及拔出时要保持接种针不向穿刺线外摆动。

③试管口通过火焰灭菌，塞上棉塞。接种针经火焰灭菌。培养物放37℃恒温箱中培养。

(3)结果：有动力的细菌呈扩散生长，无动力的细菌沿穿刺线生长。