2023/08/02 10:02
阅读:42
分享:方案摘要:
产品配置单:
支原体固体培养基使用说明
型号: 250g
产地:
品牌: 远慕
¥1
参考报价
方案详情:
一、无菌准备:
1、提前1个小时打开无菌室紫外灯消毒灭菌、操作者的衣着和手,进行清洁和消毒;
2、将用于微生物培养的器皿、接种的用具和培养基等进行灭菌;
3、所有无菌操作都需在酒精灯旁操作。
二、培养基配置:
1、LB肉汤:肉汤粉330g、5g葡萄糖、1000ml蒸馏水; .
2、营养琼脂培养基:琼脂培养基粉300g、5g葡萄糖、1000ml蒸馏水。
三、倒平板操作:
1、将灭菌过的培养皿放在火焰旁的桌面上,右手拿装有培养基的锥形瓶,左手拔出棉塞。右手拿锥形瓶,使瓶口迅速通过火焰;
2、用左手将培养皿打开-条稍大于瓶口的缝隙,右手将锥形瓶中的培养基(约10~20ml)倒入培养皿,左手立即盖上培养皿的皿盖,轻轻摇匀。
3、等待平板冷却凝固(大约需5~10min) 后,将平板倒过来放置,使皿盖在下,皿底在上。
四、平板划线操作:
1、将接种环放在火焰上灼烧,直到接种环烧红;
2、在火焰旁冷却接种环,并打开盛有菌液的试管的棉塞;
3、将试管口通过火焰;将已冷却的接种环伸入菌液中,沾取一环菌液;将试管口通过火焰,并塞上棉塞;
4、左手将皿盖打开一条缝隙,右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内,划三至五条平行线,盖上皿盖。注意不要划破培养基。
5、灼烧接种环,待其冷却后,从第一区域划线的末端开始 往第二区域内划线。重复以上操作,在三区域内划线。注意不要将最后一区域的划线与第一区相连。
6、将平板倒置,放入培养箱中培养。
五、稀释操作:
1、将分别盛有9ml水的6支试管灭菌,并按10~10的6次方(打不出六次方来)的顺序编号。
2、用移液管吸取1ml培养的菌液,注入10倍稀释的试管中。用手指轻压移液管上的橡皮头,吹吸三次,使菌液与水充分混匀。
3、从10倍稀释的试管中吸取1ml稀释液,注入102倍稀释的试管中,重复第2步的混匀操作。依次类推,直达完成最后一支试管的稀释。注:移液管需要经过灭菌。操作时,试管口和移液管应在离火焰的1~2cm处。
六、涂布平板操作:
1、将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中;
2、取少量菌液(不超过0.1ml),滴加到培养基表面;
3、将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃,待酒精燃尽后,冷却8~10s;
4、用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布时可转动培养皿,使涂布均匀。
注意事项:
1、将涂布器末端浸在盛有体积分数为70%的酒精的烧杯中。取出时,要让多余的酒精在烧杯中滴尽,然后将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃。
2、操作中一定要注意防火!不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中,以免引燃其中的酒精。
下载本篇解决方案:
质粒DNA提取时质粒丢失原因+解决方法
质粒提取失败可能由多种因素引起,这些因素可以大致分为三个类别:细菌培养条件、提取操作步骤以及使用的试剂和工具。识别并解决这些问题,有助于优化实验流程,确保质粒DNA提取的成功。
生物产业
2024/08/16
培养基迅速变黄原因+解决方法
培养基的颜色主要来自酚红,酚红指示颜色非常灵敏,pH值范围为6-8,颜色由黄变为紫红。为了培养方便,能让我们直观地感觉培养液的状况,加入酚红后,如果培养液偏酸,就显示偏黄色,偏碱性则会显示偏紫色。一般来说,污染细菌或者长时间不换液时,培养基变成黄色,主要是因为细菌和细胞过度增长,产生了酸性物质。
生物产业
2024/08/12
荧光定量PCR熔解曲线出现多峰原因+解决方法
荧光定量pcr的溶解曲线理解:用Syber Green方法做完PCR后,用来判断产物是否相对专一。应结束后,逐渐加温。和Syber Green分子结合的PCR产物随温度升高逐渐变为单链,就不能在和SyberGreen结合。
生物产业
2024/08/08
ELISA试剂盒出现交叉污染原因+预防措施
ELISA是一种酶联免疫吸附实验,其基本原理是利用特异性抗体对特定抗原进行识别和结合,然后通过酶标记的二抗或底物染色来检测抗原的含量。因此,试剂盒的准确性和特异性取决于抗体的选择和制备。
生物产业
2024/08/06