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细胞凋亡检测方法
2019/04/22 11:55
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方案摘要：
产品配置单：
人elisa试剂盒,人红细胞生成素(EPO)ELISA试剂盒
型号： 96T/48T
产地：
品牌： 远慕
面议
参考报价
人嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA试剂盒
型号： 96T/48T
产地：
品牌： 远慕
面议
参考报价
人红细胞生成素受体(EPOR)ELISA试剂盒
型号： 96T/48T
产地：
品牌： 远慕
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人白细胞分化抗原30(CD30)ELISA试剂盒
型号： 96T/48T
产地：
品牌： 远慕
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人鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)ELISA试剂盒
型号： 96T/48T
产地：
品牌： 远慕
面议
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方案详情：
细胞凋亡检测可以：
1. 用于肿瘤细胞和组织在内的不同种类病理标本研究；
2. 应用于临床诊疗，新药研制、生物制品开发、肿瘤放化疗、以及从促凋亡角度探索肿瘤的基因治疗；
3. 对相关疾病的早期发现、放化疗的疗效评价具有举足轻重的地位。
细胞凋亡的检测方法有很多，下面介绍 7 种常用的测定方法。
1
形态学检测法
实验方法原理
根据凋亡细胞固有的形态特征，使用合适的显微镜检测凋亡细胞形态变化。
1. 光学显微镜和倒置显微镜
（1）未染色细胞：凋亡细胞的体积变小、变形，细胞膜完整但出现发泡现象，细胞凋亡晚期可见凋亡小体。贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落。
（2）染色细胞：常用姬姆萨染色、瑞氏染色等。凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化，核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态。
2. 荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜
一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况。
常用的 DNA 特异性染料有：HO 33342 （Hoechst 33342），HO 33258 （Hoechst 33258），DAPI。三种种染料与 DNA 的结合是非嵌入式的，主要结合在 DNA 的 A-T 碱基区。紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光。
Hoechst 是与 DNA 特异结合的活性染料，储存液用蒸馏水配成 1 mg/ml 的浓度，使用时用 PBS 稀释，终浓度为 10 ug/ml。
DAPI 为半通透性，用于常规固定细胞的染色。储存液用蒸馏水配成 1 mg/ml 的浓度，使用终浓度一般为 10 ug/ml。
结果评判：细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期：Ⅰ期的细胞核呈波纹状（rippled）或呈折缝样（creased），部分染色质出现浓缩状态；Ⅱa 期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化；Ⅱb 期的细胞核裂解为碎块，产生凋亡小体 （图 1）。
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