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石蜡切片免疫组化实验
2019/03/05 09:34
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方案摘要：
产品配置单：
磷酸缓冲盐粉剂(1×PBS,含钙镁)
型号： 1L,10×1L
产地：
品牌： 远慕
面议
参考报价
磷酸缓冲盐粉剂(PBS,0.01mol/L)
型号： 1L,10×1L
产地：
品牌： 远慕
面议
参考报价
磷酸缓冲盐粉剂(1×PBS,无钙镁)
型号： 1L,10×1L
产地：
品牌： 远慕
面议
参考报价
磷酸缓冲盐溶液(PBSCM,pH7.5)
型号： 500ml
产地：
品牌： 远慕
面议
参考报价
磷酸缓冲盐溶液(10×PBS,无钙镁)
型号： 100ml,500ml
产地：
品牌： 远慕
面议
参考报价
方案详情：
可应用于：（1）确定组织细胞内抗原 (多肽和蛋白质)，对其进行定位、定性及定量的研究；（2）诊断异常细胞，指导治疗。
实验原理: 根据聚合酶技术把辣根过氧化物酶抗鼠或/和抗兔IgG分子结合在多聚酶上形成多聚物分子,其与待检的抗原特异性的结合后，加入底物显色。
实验材料: 石蜡切
试剂\试剂盒: PBS 柠檬酸盐缓冲液 蒸馏水 增强剂 酶标抗鼠 兔聚合物 苏木 酒精 二甲苯 树胶 盐酸 二氨基联苯胺
仪器耗材: 烘箱 微波盒 塑料切片架 显微镜 胶头滴管
实验步骤:
1. 石蜡切片置于67℃烘箱中，烘片2小时，脱蜡至水，用pH7.4的PBS冲洗三次，每次3分钟（3×3’）。
2. 取一定量pH=6.0柠檬酸盐缓冲液，加入微波盒中，微波加热至沸腾，将脱蜡水化后的组织切片置于耐高温塑料切片架上，放入已沸腾的缓冲液中，中档微波处理10分钟，取出微波盒流水自然泠却，从缓冲液中取出玻片，先用蒸馏水冲洗两次，之后用PBS冲洗2×3’。（注：不是所有的抗体都需要微波修复的，视具体情况而定）
3. 每张切片加1滴3%H2O2，室温下孵育10分钟，以阻断内源性过氧化物酶的活性。PBS冲洗3×3’。
4. 除去PBS液，每张切片加1滴相应的第1抗体（相应稀释倍数），室温下孵育2小时。
5. PBS冲洗3×5’。除去PBS液，每张切片加1滴聚合物增强剂，室温下孵育20分钟。PBS冲洗3×3’。
6. 除去PBS液，每张切片加1滴酶标抗鼠/兔聚合物，室温下孵育30分钟。PBS冲洗3×5’。
7. 除去PBS液，每张切片加1滴新鲜配制的DAB液（二氨基联苯胺），显微镜下观察5分钟。
8. 苏木素复染，0.1%HCl分化，自来水冲洗，蓝化，切片经梯度酒精脱水干燥，二甲苯透明，中性树胶封固，晾干后观察。
下载本篇解决方案：
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企业名称： 上海远慕生物科技有限公司
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