大鼠内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒检测说明书

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中文名：大鼠内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒
另名：大鼠内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA Kit
供应商：上海乔羽
规格：48t/96t
保存：2-8℃
有效期：6个月
库存状态：现货供应。
保 存：2-8℃,避光保存。
适用范围：仅用于科研实验，禁用于临床。
特点：敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存，操作简便。
用途：用于测定血清，血浆及相关液体样本中相关含量或活性。
ELISA试剂盒种属：人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、猪犬、牛羊、鸡鸭、植物ELISA试剂盒等。
试剂盒检测目的：用于测定血清，血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。

大鼠内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒组成：
1. 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶
2.酶标试剂 6ml×1 瓶
3.酶标包被板 12 孔×8 条
4.样品稀释液 6ml×1 瓶
5.显色剂A 液 6ml×1 瓶
6.显色剂B 液 6ml×1/瓶
7.终止液 6ml×1 瓶
8.标准品（960pg/ml） 0.5ml×1 瓶
9.标准品稀释液 1.5ml×1 瓶
10.说明书 1 份
11.封板膜 2 张
12.密封袋 1 个

大鼠内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒检测说明书注意事项：
1. 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。

本司科研试剂具有全,新,优,品,好五大特点：
全：公司提供上万种产品,涵盖了生物试剂,elisa试剂盒,标准品,培养基,原装耗材,抗体,培养基,ATCC细胞等,基本上各种科研所需产品在我司都能找到。
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优：产品质量好,投诉比较少。
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好：我公司具有优质的技术团队,产品一旦售出,实验过程中遇到困难可提供在线技术咨询。使您使用产品时没有任何的后顾之忧。

大鼠内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒检测说明书及要求：
1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

大鼠内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒操作步骤：
1、加样：分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
2、温育：用封板膜封板后置 37℃温育30分钟。
3、配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
4、洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此
重复5次，拍干。
5、加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
6、显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
10 分钟.
7、终止：每孔加终止液50μl，终止反应(此时蓝色立转黄色)。
8、测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。