大鼠肌球蛋白(MYS)ELISA试剂盒说明书

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中文名：大鼠肌球蛋白(MYS)ELISA试剂盒
别名：大鼠肌球蛋白(MYS)ELISA Kit
供应商：上海远慕
规格：48t/96t
保存：2-8℃
有效期：6个月
特异性：本试剂盒可同时检测天然或重组的，且与其他相关蛋白无交叉反应。
特点：灵敏性高、特异性强、重复性好。范围：科研实验等领域科学研究，不得用于临床诊断。
用途：用于测定血清，血浆及相关液体样本中相关含量或活性。
检测种属：大小鼠、人、豚鼠、兔子、猪、犬、牛羊、鸡鸭ELISA试剂盒等种属。
样本类型：适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞上清、组织匀浆等样本。
实验方法： 酶联免疫法/酶免法(ELISA)
ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因素较多，而且其操作中有一定的技术要求，在检测过程中除正常反应外，有时常见到一些错误的结果。
引起ELISA测定错误结果的原因主要有：
①标本因素;
②试剂因素;
③操作因素。

大鼠肌球蛋白(MYS)ELISA试剂盒组成及试剂配制：
1、酶联板（Assay plate ）：一块（96孔或者48孔）。
2、标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。
3、样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

大鼠肌球蛋白(MYS)ELISA检测试剂盒样本处理方式:
1、胃液、唾液、尿液的采集方式一般现采现用，胃液、唾液最好的采集时间是空腹采集，一般隔夜尿不采集；
2、采集血清时，一般要加入总体积1%的抗凝剂，采集后先室温或4℃静置半小时后，800-1000rmpx5min分离，取上清，-20℃或4℃保存备用；
3、组织提取液、肺泡灌洗液等，采集后离心分离，800-1000rmpx5min，取上清，-20℃或4℃保存备用；
4、采集血浆时一般不加抗凝剂，采集后立即离心800-1000rmpx5min分离，取上清，-20℃或4℃保存备用；
5、不贴壁细胞(分泌性蛋白)，将培养基和细胞转移至10ml离心管，500-800rmpx10min，吸取上清至另一10ml离心管中，10000rmpx10min，-20℃或4℃保存，作为标本进行检测，如有需要可进行透析或纯化处理。

大鼠肌球蛋白(MYS)ELISA试剂盒说明书操作步骤：
1. 编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照2 孔、阳性对照2 孔、空白对照1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）。
2. 加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液 40μl，然后再加待测样品 10μl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。
4. 配液：将20倍浓缩洗涤液加蒸馏水至600ml后备用。
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 显色：每孔先加入显色剂A 50μl，再加入显色剂B 50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15 分钟。
8. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
9. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

大鼠肌球蛋白(MYS)ELISA试剂盒注意事项：
1.实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

2.试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

3.使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

4.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

5.洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

6.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

7.加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

8.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

9.底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

大鼠肌球蛋白(MYS)ELISA检测试剂盒技术原理：
(1). 抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。
(2). 结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性。
(3). 酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。
(4). 受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。
(5). 此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。
(6). 加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。测定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水平），并且重复性好。以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。

大鼠肌球蛋白(MYS)ELISA试剂盒说明书优点： 
1、原装进口抗体——高效、灵敏、特异 
2、规范包被操作——吸附均匀，吸附性好，空白值低，孔底透明度高 
3、先进的优化方案——重复性高，可靠性强 
5、技术服务要求：专业，规范，高效 
6、适用于体液、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等多种类型的样本适用范围：此试剂盒仅用于科研实验，禁用于临床