兔子巨噬细胞炎性蛋白3α（MIP3α/CCL20）ELISA检测试剂盒

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中文名：兔子巨噬细胞炎性蛋白3α（MIP3α/CCL20）ELISA试剂盒

别名：兔子巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP3α/CCL20)ELISA Kit

供应商：上海远慕

规格：48t/96t

保存：2-8℃

有效期：6个月

特点：敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存，操作简便。

用途：用于测定血清，血浆及相关液体样本中相关含量或活性。

检测种属：大小鼠、人、豚鼠、兔子、猪、犬、牛羊、鸡鸭ELISA试剂盒等种属。

常见ELISA试剂盒：白介素、选择素、集落刺激因子、肿瘤坏死因子、干扰素、转化生长因子、趋化因子、细胞因子受体、粘附分子、生长因子、凋亡因子等等。

兔子巨噬细胞炎性蛋白3α（MIP3α/CCL20）ELISA试剂盒组成及试剂配制：
1、酶联板（Assay plate ）：一块（96孔或者48孔）。
2、标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。
3、样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

兔子巨噬细胞炎性蛋白3α（MIP3α/CCL20）ELISA检测试剂盒操作步骤：
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
3.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可向客服索取说明书。
4.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中 先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
5.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
6.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
7.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
8.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
9.温育：操作同3。
10.洗涤：操作同5。
11.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟。
12. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
13. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

兔子巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP3α/CCL20)ELISA试剂盒注意事项：
1.操作严格按照说明书进行，本试剂不同批号组分不得混用。
2.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
3.浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
4.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
5.底物请避光保存。
6.试验结果判定必须以酶标仪读数为准，使用双波长检测时，参考波长为630nm
7.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为2M的硫酸，使用时必须注意安全。

兔子巨噬细胞炎性蛋白3α（MIP3α/CCL20）ELISA检测试剂盒样品收集、处理及保存方法： 

1）血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2）血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

3）细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4）组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液

5）保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。