ELISA检测试剂盒，人ELISA试剂盒说明书

    上海远慕生物科技有限公司专业经营ELISA检测试剂盒，人ELISA试剂盒说明书，培养基，抗体，细胞株，化学试剂，标准品对照品，实验耗材，动物血清，其他生化试剂，提供相关EILSA试剂盒的价格，规格，优点，特性等资讯，为客户提供免费代测ELISA试刘盒服务，ELISA种属成千上万，欢迎来电咨询！

    中文名：人ELISA试剂盒

    别名：人ELISA Kit

    英文名：Human ELISA Kit

    供应商：上海远慕

    规格：48t/96t

    保存：2-8℃

    有效期：6个月

    范围：科研实验等领域科学研究，不得用于临床诊断。

    特点：敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存，操作简便。

    用途：用于测定血清，血浆及相关液体样本中相关含量或活性。

    检测种属：大小鼠、人、豚鼠、兔子、猪、犬、牛羊、鸡鸭ELISA试剂盒等种属。

    样本类型：适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞上清、组织匀浆等样本。

    ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因素较多，而且其操作中有一定的技术要求，在检测过程中除正常反应外，有时常见到一些错误的结果。

    引起ELISA测定错误结果的原因主要有：

    ①标本因素；

    ②试剂因素；

    ③操作因素。

    ELISA检测试剂盒，人ELISA试剂盒说明书

    ELISA检测试剂盒，人ELISA试剂盒液体类标本：

    包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。

    1）血清：

    室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

    2）血浆：

    应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

    3）尿液：

    用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。

    4）细胞培养上清：

    检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/ 分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并 放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

    5）组织标本：

    切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

    人ELISA检测试剂盒严格注明：

    1. 用户在初次使用试剂盒时，应将各种试剂管离心数分钟，以便试剂集中到管底。

    2. 每次实验留一孔作为空白调零孔，该孔不加任何试剂，只是最后加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。

    3. 为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜。

    4. 未使用完的酶标板或者试剂，请于2-8℃保存。标准品、生物素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素标记抗体工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。

    5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

    ELISA检测试剂盒，人ELISA试剂盒说明书操作步骤：

    1.使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。

    2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。

    3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

    4.甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

    5.每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。

    6.甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

    7.每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。

    8.取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。

    9.在450nm波长处测定各孔的OD值。

    建议使用的实验方案：

    6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到精确的结果。

    ELISA检测试剂盒，人ELISA试剂盒说明书性能：

    1.灵敏度：最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。

    2.特异性：不与其它细胞因子反应。

    3.重复性：板内、板间变异系数均小于10%。

    结果判断与分析：

    1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值。

    2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的ICAM-1/CD54标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的ICAM-1/CD54含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。

    3、检测值范围：0-80ng/ml

    4、敏感度：0.1ng/ml