支原体(mycoplasma):又称霉形体,为目前发现的最小的最简单的原核生物。支原体细胞中唯一可见的细胞器是核糖体(支原体是原核细胞,原核细胞的细胞器只有核糖体)。
支原体是在1898年发现的,是一种简单的原核生物。其大小介于细菌和病毒之间。支原体结构也比较简单,多数成球形,没有细胞壁,只有三层结构的细胞膜,故具有较大的可变性。支原体可以在特殊的培养基上接种生长,用此法配合临床进行诊断。
一、性状
形态与结构
支原体的大小为0.2~0.3um,可通过滤菌器,常给细胞培养工作带来污染的麻烦。无细胞壁,不能维持固定的形态而呈现多形性。革兰氏染色不易着色,故常用Giemsa染色法将其染成淡紫色。细胞膜中胆固醇含量较多,约占36%,对保持细胞膜的完整性具有一定作用。凡能作用于胆固醇的物质(如二性霉素B、皂素等)均可引起支原体膜的破坏而使支原体死亡。
支原体结构
支原体基因组为一环状以双链DNA,分子量小(仅有大肠杆菌的五分之一),合成与代谢很有限。 肺炎支原体的一端有一种特殊的末端结构(terminal structure),能使支原体粘附于呼吸道粘膜上皮细胞表面,与致病性有关。
培养特性
营养要求比一般细菌高,除基础营养物质外还需加入10~20%人或动物血清以提供支原体所需的胆固醇。最适pH7.8~8.0之间,低于7.0则死亡,但解脲脲原体最适pH6.0~6.5。
大多数兼性厌氧,有些菌株在初分离时加入5%CO2生长更好。生长缓慢,在琼脂含量较少的固体培养基上孵育2~3天出现典型的“荷包蛋样”菌落:圆形(直径10~16um),核心部分较厚,向下长入培养基,周边为一层薄的透明颗粒区。此外,支原体还能在鸡胚绒毛尿囊膜或培养细胞中生长。
繁殖方式多样,主要为二分裂繁殖,还有断裂、分枝、出芽等方式,盖因缺乏细胞壁造成分裂时二个子细胞大小均所致。同时,支原体分裂和其DNA复制不同步,可形成多核长丝体。
生化反应与分型
一般能分解葡萄糖的支原体则不能利用精氨酸,能利用精氨酸的则不能分解葡萄糖,据此可将支原体分为两类。解脲脲原体不能利用葡萄糖或精氨酸,但可利用尿素作能源。
各种支原体都有特异的表面抗原结构,很少有交叉反应,具有型特异性。应用生长抑制试验(Growth inhibition test,GIT)、代谢抑制试验(Metabolic inhibition test,MIT)等可鉴定支原抗原,进行分型。
抵抗力
支原体对热的抵抗力与细菌相似。对环境渗透压敏感,渗透压的突变可致细胞破裂。对重金属盐、石炭酸、来苏尔和一些表面活性剂较细菌敏感,但对醋酸铊、结晶紫和亚锑酸盐的抵抗力比细菌大。对影响壁合成的抗生素如青霉素不敏感,但红霉素、四环素、链霉素及氯霉素等作用于支原体核蛋白体的抗生素,可抑制或影响蛋白质合成,有杀灭支原体的作用。
致病性与免疫性
支原体不侵入机体组织与血液,而是在呼吸道或泌尿生殖道上皮细胞粘附并定居后,通过不同机制引起细胞损伤,如获取细胞膜上的脂质与胆固醇造成膜的损伤,释放神经(外)毒素、磷酸酶及过氧化氢等。
巨噬细胞、lgG 及 lgM 对支原体均有一定的杀伤作用。呼吸道粘膜产生的SlgA抗体已证明有阻止支原体吸附的作用。在儿童中,致敏淋巴细胞可增强机体对肺炎支原体的抵抗力。
二、特点
支原体是目前所能发现的能在无生命培基中生长繁殖的最小的微生物。支原体体形多样,基本为球形,亦可呈球杆状或丝状,其菌落呈针尖大小,故又称之为微小支原体。能引起人类泌尿系感染的是解脲支原体和人型支原体。主要通过性接触传染,少数也可间接传染。泌尿系统是它的易感细胞。
由于它没有细胞壁,因此对影响细胞壁合成的抗生素,如青霉素等不敏感,红霉素、四环素、卡那霉素、链霉素、氯霉素等作用于核蛋白体的抗生素,可抑制或影响支原体的蛋白质合成,有抑制支原体作用,但不能根治,不能使机体对其产生免疫抗体,容易反复,目前采用中药治疗可弥补这方面的缺陷。
支原体是最小最简单的独立生活的原核生物。它没有固定形态,形态随环境而变化,在液体中可呈球形、环形和丝状;它没有细胞壁,只有三层结构的细胞膜。解脲支原体(惟一确认的一种)具有尿素酶活性,能分解尿素。感染人体后,通过黏附于宿主细胞的受体上,引起细胞膜损伤,其代谢产物产生毒性作用。衣原体除可引起尿道炎、眼结膜炎外,还可引起附睾炎、前列腺炎、宫颈炎、阴道炎、输卵管炎及盆腔炎等。新生儿通过产道可被感染发生眼结膜炎、肺炎。男性同性恋者,可患直肠炎及咽炎。
三、支原体标本采集:
1.标本采集:
男性:用无菌棉拭子插入尿道约2cm处旋转,静止数秒钟后取材。女性:支原体标本抹去宫颈口粘液,用无菌拭子插入宫颈管l-2cm旋转取材。尚可用前列腺液、精液、尿液离心沉淀物作标本。
支原体标本
2.接种:将标本洗入Uu或Mh液体培养基,或用滤菌器过滤接种。
3. 培养:置370C恒温箱孵育1~3天,每日观察培养基颜色变化。
培养结果:液体培养基由黄色变红色,清亮透明可初步判断为Uu或Mh阳性。
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