支原体又双叒叕被污染了咋办！

要说做细胞实验大家最担心的是什么，那应该就是——细胞污染了，而其中支原体污染是细胞培养实验室重最常见、最“臭名昭着”的污染之一。

为什么这么说呢?
这是因为支原体污染几乎可影响所有细胞生长参数、代谢及研究的任一数据，并且，支原体缺乏细胞壁，所以常规的抗生素并不能对它们起到抵抗作用，而且由于其直径太小，滤菌器也无法过滤，所以，细胞一旦有支原体污染则十分难以被清除，会给我们的实验造成极大的损失。

研究表明，细胞培养中有15-35%的细胞存在支原体污染，有些地区甚至高达80%。因此支原体检测成为了细胞质控中不可缺少的环节，被列入《中国药典》检测的范畴。

细胞支原体污染的表现：
细胞状态变差、生长变慢，在显微镜下观察可能会有小黑点，但培养基一般不发生浑浊。细胞传代以后就出现细胞间黑点，细胞空泡化，很多类似凋亡、坏死的细胞，最终细胞漂浮，完全死亡。

支原体污染从何而来？
1. 已受污染的细胞;
2. 操作人员的疏失;
3. 已受污染的培养基、血清 ;
4. 操作环境不良、实验器具不洁等。

检测有无支原体污染可做如下检查：
①相差显微境检测：将细胞按种于事先放置于培养瓶内的盖玻片上，24h后取出，用相差油镜观察，支原体呈暗色微小颗粒位于细胞表面和细胞之间。
②荧光染色法：荧光染色用能与DNA特异性结合的荧光染料Hoechst 33258，可使支原体内含有的DNA着色，染色后用荧光显微镜观察，镜下支原体为散在于细胞同围或附于细胞膜表面的亮绿色小点。
③电镜检查：用扫描电镜方法简便快速，也可以利用透射电镜。
④DNA分子条文检查或支原体培养等方法：检出率高，但方法较为复杂。

如果检测到有支原体污染，该如何处理呢?
方法1：直接弃之!
这就非常简单粗暴了，如果还没做处理，还是赶紧弃之吧，抢救不如重新复苏了，另外对培养箱要做由里至外的清洁处理。

方法2：使用支原体清除培养基
如果你培养的细胞比较珍贵，直接丢弃可惜，那么在确定对细胞的基因及蛋白表达没有影响的情况下，可以使用——支原体清除培养基。

远慕生物支原体清除培养基的优势：
1，活性范围广：各支原体株系均可作用。
2，安全可靠：工作浓度低，无细胞毒性。
3，使用方便：将支原体去除试剂加入污染培养物即可，操作简单。
4，时效快：使用的第二天可以明显看出细胞内的小黑点变少，细胞状态变好。