养过细胞的童鞋大都有着这样的共识:血清,由于其复杂的内在成分和难以控制的外界因素,它既是细胞生长的必-备营养,也是细胞死亡的致命“毒-药”,远慕生物为您分析为什么要对胎牛血清内毒素格外留意。
有下列情况者,对胎牛血清内毒素应格外留意筛选:
1.养干细胞时,干细胞对内毒素非常敏感,如果血清中内毒素≥3EU/ml时,干细胞很容易死亡。很多使用者,在血清在试用前,就通过提早审核该批次《检测报告》,以决定是否入围进行试用。
2.养免疫细胞时,过高的内毒素可诱导免疫细胞释放炎症因子,抑制小鼠红细胞集落的形成等。
3.基因敲除相关的细胞实验,培养的细胞要尽可能保持其原始状态,任何引导细胞衰老或凋亡的试剂,都会让后续的实验结果“失之毫厘,谬以千里”。在准备血清和其他试剂时,选择极低的内毒素(蕞好≤1EU/ml),对实验至关重要;
4.原代培养、杂交瘤融合、细胞转染,或者肝细胞、神经细胞、内皮等难养细胞的扩增,这些都需要挑选好的血清给细胞以有力支持。因此,挑选geng低的内毒素,是保证实验顺利的第1步。
5.实验室有些细胞,需要长期培养、长期冻存,或者经常复苏、经常培养的,血清会经常或长时间作用于细胞。为保证细胞的健康,都应该选用geng低内毒素的血清,以避免内毒素长久对细胞的毒性影响。
总之,血清中内毒素含量过高,geng容易导致细胞“亚健康”,造成数据不准,或细胞状态不良、老化、甚至死亡,导致试验中断失败。血清中的内毒素越低越好。
全-球细胞培养学会均依据内毒素对血清的品质进行分级和命名。
内毒素含量越低的血清,级别就越高,以胎牛血清为例:
当血清中内毒素含量≤10EU/ml时,此血清为特级胎牛血清;
当血清中内毒素含量﹥10EU/ml,≤ 25EU/ml时,此血清为优级胎牛血清;
当血清中内毒素含量≥ 25EU/ml时,此血清为标准级胎牛血清;
目前,由于同一厂家,不同批次的血清,内毒素数值也可能有较大差异,因此很多血清厂家在名称上已不注明级别。但使用者仍可通过检测报告,自行甄别挑选。
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